Visualizzazione delle reti neurali e vascolari in un embrione di pollo

Inizia con un uovo di gallina fecondato contenente un embrione in fase iniziale con il suo tubo neurale asportato a livello dei somiti da uno a sette.

Prelevare un tubo neurale del donatore marcato con GFP da un embrione di pollo transgenico compatibile con lo stadio e impiantarlo nel ricevente, garantendo un corretto orientamento anatomico.

Rimuovere il liquido in eccesso intorno all'innesto per migliorare l'adesione tra il donatore e i tessuti dell'ospite.

Sigillare la finestra con nastro adesivo trasparente per evitare disidratazione e contaminazione.

Incubare l'uovo fino a quando l'embrione non si sviluppa allo stadio desiderato.

Rimuovere il nastro adesivo.

Identificare una vena vitellina sul tuorlo che trasporta il sangue verso l'embrione e rimuovere la membrana vitellina sovrastante.

Usando un ago di vetro, iniettare costantemente un colorante fluorescente lipofilo nella vena.

Visualizzare l'embrione al microscopio a stereofluorescenza.

Il colorante iniettato si lega alle cellule endoteliali che rivestono i vasi sanguigni, evidenziando la rete vascolare, mentre il tubo neurale marcato con GFP consente il tracciamento della rete neurale.

Quando sei pronto per iniziare la procedura di