JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 2:13 min. • June 17th, 2025
Iniziate con un topo anestetizzato con un ganglio genicolato esposto chirurgicamente, un gruppo di neuroni periferici che elaborano il gusto.
Questi neuroni esprimono GCaMP, un indicatore del calcio che diventa fluorescente al legame con il calcio.
Rimuovere qualsiasi liquido che copre il ganglio per una visualizzazione chiara.
Posiziona il mouse su un tampone assorbente al microscopio e individua il ganglio genicolato utilizzando punti di riferimento anatomici.
Utilizzando un filtro appropriato sull'oscilloscopio per epifluorescenza, rilevare la fluorescenza verde dai neuroni che esprimono GCaMP.
Quindi, inserire un ago di erogazione collegato al tubo di erogazione tastant nella bocca del topo ed erogare il tastant.
Il tastant stimola le cellule dei recettori del gusto, rilasciando ATP, che si lega ai recettori dei neuroni ganglionari, innescando l'afflusso di calcio.
Questi ioni calcio si legano alle GCaMPs, inducendo l'emissione di fluorescenza.
Allinea la fotocamera con il campo visivo del microscopio e sincronizza la registrazione video con l'erogazione tatent, per catturare l'attività neuronale in tempo reale attraverso i cambiamenti di fluorescenza.
Per far funzionare il pannello ta
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