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Inizia con un tessuto cerebrale di topo asportato contenente trombi, o coaguli di sangue, nei vasi sanguigni cerebrali.
I trombi sono marcati con una sonda fluorescente nel vicino infrarosso o NIRF che si lega in modo covalente ai filamenti di fibrina durante la maturazione dei trombi.
Posizionare il tessuto cerebrale in un imager nel vicino infrarosso, posizionando la base del cervello o il lato ventrale rivolto verso l'alto per visualizzare il trombo nelle principali arterie cerebrali.
Applicare la luce nel vicino infrarosso al tessuto cerebrale che eccita la sonda NIRF nel trombo marcato.
Dopo l'eccitazione, la sonda emette luce a una lunghezza d'onda maggiore.
Ciò fa sì che il trombo sia fluorescente e appaia luminoso su uno sfondo scuro, riducendo al minimo l'interferenza dei tessuti circostanti.
Quindi, invertire il tessuto cerebrale e visualizzare il lato dorsale del cervello per visualizzare il trombo nei piccoli vasi sanguigni corticali.
Ciò garantisce una visualizzazione completa del trombo nel tessuto cerebrale con un elevato contrasto.
Per visualizzare il trombo mediante imaging ex-vivo nel vicino infrarosso, posizionare il tessuto cerebrale asportato nell'imager con la base rivolta verso l'alto. Ottenere immagini dei tromboemboli marcati in fluorescenza nelle arterie del Circolo di Willis. Quindi, posizionare il tessuto con il vertice rivolto verso l'alto e visualizzare i tromboemboli corticali.
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