Consegna mirata di siRNA ai neuroni per il silenziamento della proteina prionica utilizzando complessi liposomiali
JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 2:57 min. • June 18th, 2025
Inizia con un piccolo RNA interferente che sopprime l'espressione della proteina prionica, una proteina legata alle malattie neurodegenerative da prioni.
Aggiungere una sospensione di liposomi cationici.
Il siRNA caricato negativamente si lega alla superficie del liposoma caricato positivamente.
Introdurre il peptide RVG-9r, una glicoproteina del virus della rabbia attaccata a una coda di poliarginina.
I residui di arginina facilitano il legame con RVG-9r-siRNA.
Iniettare i complessi liposoma-siRNA-peptide nella vena della coda di un topo anestetizzato.
Gli LSPC circolano attraverso il flusso sanguigno e raggiungono il cervello.
Il peptide RVG-9r si lega ai recettori nicotinici dell'acetilcolina sulle cellule endoteliali, innescando la transcitosi mediata dal recettore attraverso la barriera emato-encefalica.
All'interno del cervello, RVG-9r si lega ai recettori neuronali dell'acetilcolina, facilitando l'endocitosi LSPC e il rilascio di siRNA.
Il complesso di silenziamento indotto dall'RNA si lega al siRNA.
Il filamento passeggero si dissocia, mentre il filamento guida si lega e scinde l'mRNA della PrP, impedendo la traduzione e riducendo l'espressione della PrP.
Aggiungere 20 microlitri del
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