JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 1:49 min. • June 17th, 2025
Inizia con un topo immunodeficiente iniettato nel suo cervello con cellule progenitrici neurali umane geneticamente modificate, o NPC.
Queste cellule esprimono luciferasi, un enzima che produce luce.
Iniettare luciferina, il substrato per la luciferasi, per via intraperitoneale nel topo.
Anestetizzare il topo, quindi applicare un lubrificante oftalmico sugli occhi per evitare che si secchi e radergli la testa per l'imaging.
Posizionare il mouse in posizione prona all'interno di una camera di imaging con condizioni preimpostate per l'imaging.
La luciferina circola nel flusso sanguigno ed entra nel tessuto cerebrale passando attraverso le cellule endoteliali, raggiungendo le NPC trapiantate.
All'interno delle cellule, la luciferina reagisce con la luciferasi e produce luce bioluminescente.
Il sistema di imaging cattura questi segnali bioluminescenti emessi dal sito di trapianto di NPC.
Questi segnali bioluminescenti confermano il successo del trapianto delle NPC umane nel cervello del topo.
Iniettare la luciferina per via intraperitoneale e dopo cinque minuti anestetizzare gli animali con un apporto continuo di isoflurano. Radere gli animali sedati sulla regione della testa usando un rasoio per capelli convenzionale. Posizionare l'animale nella camera di imaging e avviare l'imaging 15 minuti dopo l'iniezione di luciferina facendo clic su Acquisisci nel pannello di controllo.