JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 5:18 min. • June 17th, 2025
Prendete una larva di pesce zebra transgenico paralizzata montata in una camera di perfusione.
La larva esprime indicatori di calcio localizzati sulla membrana nelle cellule ciliate del neuromasta, un componente del sistema della linea laterale che rileva il movimento dell'acqua.
Le cellule ciliate comprendono fasci di capelli apicali e regioni presinaptiche basali, che formano sinapsi con i neuroni afferenti per trasmettere segnali.
Sotto un microscopio confocale, utilizzare un basso ingrandimento per posizionare una pipetta a getto di fluido vicino alla larva.
Aumentare l'ingrandimento per localizzare un neuromast, riposizionare la pipetta vicino ad esso e passare all'imaging a
fluorescenza.
Eroga impulsi fluidi per deviare i fasci di capelli, aprendo i canali di meccanotrasduzione per l'afflusso di cationi apicali, compresi gli ioni calcio.
Gli indicatori debolmente fluorescenti si legano al calcio, causando un aumento localizzato della fluorescenza.
L'afflusso cationico depolarizza la cellula, innescando l'ingresso di calcio attraverso canali voltaggio-dipendenti nella presinapsi basale, dove si lega agli indicatori e aumenta la fluorescenza localmente.
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