Name: Il trapianto di isole pancreatiche nella capsula renale di topi diabetici (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-10-31T23:37:26.000+00:00
Duration: 10 min 43 s
Description: Scopri la tecnica di trapianto di isole pancreatiche nella capsula renale di topi diabetici. Questo metodo minimizza lo stress cellulare e migliora i risultati del trapianto nei modelli murini.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

UCSF Diabetes Center. NIH UCSF DERC Islet Core. JDRF. LifeScan Inc. Johnson Johnson &amp; Company.

Preparazione di isole per trapianto (Tx) <ol><li> Sotto un microscopio invertito, selezionare manualmente isolette con una Pipetman P200 e punta della pipetta direttamente dalla isole coltivate in un piatto di 100mm. </li><li> Conte isolotti 100 in una volta e trasferire in ogni provetta (~ 500 isolotti / tubo / mouse). </li><li> Lasciare isolotti di depositarsi sul fondo dei tubi microcentrifuga. </li><li> Disegna uno isolotto a pellet in un Pipetman P200 (fissata a 130ul) utilizzando una scala a parete sottile punta della pipetta. </li><li> Posizionare un adattatore tubo di silicone sopra la punta della siringa. Inserire una lunghezza di PE50 tubo nel adattatore silicone. </li><li> Appendere la Pipetman a lato del cofano e il nastro PE50 tubo alla parete cappa superiore alla isolotti nella punta. In questo modo il isolette di stabilirsi solo nella punta della pipetta. </li><li> Trasferire il isolotti nel tubo PE50 lentamente componendo il Pipetman e spostando gli isolotti nel tubo PE50, facendo attenzione a non espellere le isole dalla fine. </li><li> Fare un nodo alla fine smussata del tubo PE50. Pur mantenendo le piegare, staccare il tubo in silicone adattatore dal Pipetman e fissare la piega con l&#39;adattatore in silicone. </li><li> Posizionare le isole, nel tubo PE50, piegato lato tubi di silicone adattatore verso il basso, in un mL 15 conico con una pipetta 5 ml e taglio del nastro il tubo PE50 sul lato della pipetta 5 mL per evitare di curling del tubo PE50 mentre centrifugazione. </li><li> Centrifugare il conicals PE50/15mL a 1000 giri al minuto e spegnere centrifuga. (Non preparare più di 10 preparati isolotto in una sola volta). </li><li> Tubo posto sul ghiaccio. </li></ol> Preparazione del mouse per trapianti <ol><li> Anestetizzare i topi con isofluorane o con ketamina / Xylexene (vedi protocollo di preparazione). </li><li> Dopo che ha preso effetto anestetico, radere il fianco sinistro del mouse. </li><li> Tampone pelle di topo, centro-out, con tampone Iodio Povidone e poi pulire con un tampone imbevuto ETOH. </li><li> Individuare il rene sinistro (appena a destra della milza). Fai una piccola incisione nella pelle, esponendo il peritoneo. </li><li> Fai una piccola incisione nel peritoneo esporre il rene. Mantenere la piccola incisione aiuterà a mantenere il rene sollevato ed esposto. </li><li> Applicare una leggera pressione su entrambi i lati dell&#39;incisione, alzare o pop il rene fuori del mouse. </li><li> Mantenere umido il renali mediante l&#39;applicazione di soluzione fisiologica con un tampone di cotone con punta. </li><li> Utilizzando una siringa 23 o 25 gauge, fare un piccolo graffio sul fianco destro del rene, la creazione di un nick nella capsula del rene, non troppo profonda o troppo grande. </li></ol> Trapianto di isole Nota: Quando il mouse si sta preparando per Tx, la seconda persona deve preparare la vite-drive Hamilton siringa trapianto di isole. <ol><li> Rimuovere lentamente il tubo in silicone adattatore dal tubo PE50 mantenendo il nodo nel tubo. </li><li> Posizionare l&#39;estremità opposta del tubo PE50 nel tubo in silicone adattatore e posizionare il tubo in silicone adattatore sulla punta della pipetta collegata al &quot;vite-drive&quot; siringa di vetro Hamilton. Rilasciare lentamente il nodo nel tubo PE50, assicurandosi che le isole non fuoriesca. </li><li> Anticipo le isolette lentamente fino alla punta del tubo PE50 utilizzando il meccanismo &quot;a vite&quot;, ma mantenere una piccola bolla d&#39;aria nella parte anteriore delle isole nel tubo PE50. </li><li> Nel nick fatto nel rene, far scorrere con attenzione la PE50 tubi sotto la capsula, facendo una piccola tasca. State molto attenti a non sgorbia o pungere il rene attraverso la capsula. </li><li> Aiuta a mantenere la zona umida e capsula con normale soluzione fisiologica Gentamicina tampone di cotone imbevuto di punta, una capsula secca si strappa facilmente. </li><li> Spostare delicatamente il tubo in tutte le direzioni, creando una &quot;tasca&quot; per le isole trapiantate per riposare. Ricordarsi di riapplicare ulteriore soluzione fisiologica per mantenere la zona umida. </li><li> Sotto la direzione della persona che ha aperto il mouse e che ha posto il PE50 tubi sotto la capsula renale, la seconda persona, che ha preparato il mouse e la siringa trapianto Hamilton, lentamente anticipo isole sotto la capsula, all&#39;interno della &quot;tasca&quot;, dietro una piccola bolla d&#39;aria formulato dal tubo PE50, fino a quando tutte le isole sono trapiantati. </li><li> Rimuovere lentamente il tubo PE50, asciugare la zona con un tampone asciutto e con attenzione cauterizzare il nick a basse temperature. </li><li> Utilizzando un tampone di cotone asciutto capovolto, assicurarsi che tutti sanguinamento si è fermato. Una volta emorragia si è fermata, ri-inumidire il rene con soluzione salina sterile, e gentilmente sostituire il rene nel peritoneo prima di chiudere il mouse con sutura e punti metallici pelle. </li></ol> Chiusura / Revival di mouse <ol><li> Chiudere il peritoneo con un punto in esecuzione utilizzando 5-0 suture di seta w / un ago C-6 19mm. </li><li> Forcipe utilizzando disegnare entrambi i lati della incisione cutanea insieme. </li><li> Il fiocco pelle con 2 o 3 punti. </li><li> Pulire la pelle del mouse di qualsiasi sangue, usando un tampone di cotone con punta e Saline. </li><li> Immediatamente trattare il mouse con una iniezione sottocutanea di Flunixin e buprenorfina. </li><li> Posizionare il mouse in una gabbia, che viene posizionato su una piastra elettrica o sotto una lampada riscaldante, fino a quando il mouse è pienamente attiva. </li><li> Rimuovere i punti della pelle in 2 settimane. </li></ol>

<ol><li>Tang, Q., Henriksen, K. J., Bi, M., Finger, E. B., Szot, G., Ye, J., Masteller, E. L., McDevitt, H., Bonyhadi, M., Bluestone, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro-expanded+antigen-specific+regulatory+T+cells+suppress+autoimmune+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">In vitro-expanded antigen-specific regulatory T cells suppress autoimmune diabetes.</a> J Exp Med. 199, 1455-1465 (2004).</li>
<li>Rulifson, I. C., Szot, G. L., Palmer, E., Bluestone, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inability+to+induce+tolerance+through+direct+antigen+presentation%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Inability to induce tolerance through direct antigen presentation.</a> Am J Transplant. 2, 510-519 (2002).</li>
<li>Lenschow, D. J., Zeng, Y., Hathcock, K. S., Zuckerman, L. A., Freeman, G., Thistlethwaite, J. R., Gray, G. S., Hodes, R. J., Bluestone, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+transplant+rejection+following+treatment+with+anti-B7-2+and+anti-B7-1+antibodies.+Transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Inhibition of transplant rejection following treatment with anti-B7-2 and anti-B7-1 antibodies. Transplantation.</a> Transplantation. 60, 1171-1178 (1995).</li>
<li>Lenschow, D. J., Zeng, Y., Thistlethwaite, J. R., Montag, A., Brady, W., Gibson, M. G., Linsley, P. S., Bluestone, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+survival+of+xenogeneic+pancreatic+islet+grafts+induced+by+CTLA4lg%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Long-term survival of xenogeneic pancreatic islet grafts induced by CTLA4lg.</a> Science. 257, 789-792 (1992).</li>
</ol>

Questo protocollo fornisce una soluzione pratica ed efficiente per fornire in modo pulito e facilmente le cellule o isolotti sotto la capsula renale di topi diabetici o normale. La tecnica di concentrazione e cubettatura le isolette o cellule nel tubo di consegna finale (PE50) utilizzato per il trapianto di cellule sotto la capsula renale offre un metodo semplice ed efficace di trapianto di cellule, riducendo qualsiasi sforzo eccessivo per le celle o per il mouse.

<table><tbody><tr><td>Guanti chirurgici</td><td>Fisher Scientific</td><td>11-394-95(sz)</td><td></td></tr><tr><td>Spugne per antisepsi chirurgica</td><td>Moore Medical</td><td>42940AK</td><td></td></tr><tr><td>Pinze</td><td>Miltex Inc.</td><td>6-114 e 6-26</td><td>2 con denti, 2 dritte</td></tr><tr><td>Forbici da dissezione n=2</td><td>Miltex Inc.</td><td>5-290</td><td></td></tr><tr><td>Rasoio Oster (lama taglia 40)</td><td>Fisher Scientific</td><td>01-305-10B</td><td></td></tr><tr><td>Compresse sterili di garza 4x4</td><td>Moore Medical</td><td>08252AK</td><td></td></tr><tr><td>Compresse di iodopovidone</td><td>Moore Medical</td><td>08486AK</td><td></td></tr><tr><td>Compresse alcoliche</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-819-2</td><td></td></tr><tr><td>Pad riscaldante</td><td>Moore Medical</td><td>42508AK</td><td></td></tr><tr><td>Aghi 23G o 25G</td><td></td><td></td><td>lunghi 1&quot;</td></tr><tr><td>Soluzione Cidex</td><td>Moore Medical</td><td>07535AK</td><td>per la pulizia e la disinfezione degli strumenti</td></tr><tr><td>Tubing in polietilene PE50</td><td>BD Biosciences</td><td>427411</td><td>PE50, 0,965 mm di diametro esterno x 0,58 mm di diametro interno</td></tr><tr><td>Cidex + soluzione a 28 giorni</td><td>Moore Medical</td><td>35625AK</td><td></td></tr><tr><td>Tubing in silicone</td><td>Spectrum Chromat.</td><td>123732</td><td>5/32&amp;#8221; diametro esterno x 1/32&amp;#8221; diametro interno</td></tr><tr><td>Contenitore per sterilizzazione strumenti</td><td>Moore Medical</td><td>39074AK</td><td></td></tr><tr><td>Punte per pipetta dritte</td><td>USA Scientific, Inc.</td><td>1111-0810</td><td>sterili</td></tr><tr><td>Siringa di vetro con vite di comando</td><td>Hamilton Co</td><td>1001</td><td></td></tr><tr><td>Strumento cauterizzante</td><td>Roboz Surgical Instruments Co.</td><td>RS230</td><td></td></tr><tr><td>Pinza per aghi</td><td>Moore Medical</td><td>41-067</td><td></td></tr><tr><td>Seta 5-0</td><td>LOOK Surgical</td><td>754B</td><td>per sutura (6-C)</td></tr><tr><td>Tampone di ovatta</td><td>Moore Medical</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stapler autoclip da 9 mm</td><td>BD Biosciences</td><td>7630</td><td></td></tr><tr><td>Staples da 9 mm</td><td>BD Biosciences</td><td>7631</td><td></td></tr><tr><td>Stacca-staples da 9 mm</td><td>BD Biosciences</td><td>7637</td><td></td></tr></tbody></table>

il trapianto di isole pancreatiche nella capsula renale di topi diabetici

Transplantation of Pancreatic Islets Into the Kidney Capsule of Diabetic Mice

Il nostro protocollo è stato sviluppato per fornire in modo pulito e facilmente le cellule o isolotti sotto la capsula renale di topi diabetici o normale. Abbiamo scoperto che era più facile concentrare le isolette o cellule in pellet nel tubo di consegna finale (PE50) utilizzato per il trapianto di cellule sotto la capsula renale. Questa tecnica fornisce velocità e facilità, riducendo qualsiasi sforzo eccessivo per le celle o per il mouse. Caricamento in corso: Fondata, raccolte a mano, isolotti o cellule pellet sono accuratamente aspirato dal fondo di una provetta 1,5 ml con un pipetteman P200 e un rettilineo, a parete sottile punta della pipetta. Una lunghezza di PE50 tubo è attaccato alla punta della pipetta con un piccolo tubo di silicone adattatore. Le cellule sono permesso di stabilirsi, in punta, e poi vengono trasferiti al tubo PE50 lentamente componendo il pipetteman. Una volta che le cellule sono quasi alla fine del tubo PE50, un punto di discontinuità è fatto e il tubo in silicone adattatore è posizionato sopra il nodo. La PE50 tubo è trasferito ad un 15 ml conica contenente una riduzione del 5 pipetta ml, e il tubo PE50 è registrato sul lato della pipetta 5 mL per evitare il curling durante la centrifugazione. Le cellule sono permesso di raggiungere 1.000 giri al minuto e si fermò. Trapianto: topi destinatari sono anestetizzati, rasato e pulito. Una piccola incisione viene fatta sul fianco sinistro del mouse e il rene è esposto. L&#39;, rene grasso e il tessuto sono mantenute umide con normale soluzione salina tampone. L&#39;estremità distale del PE50 è attaccato ad una siringa Hamilton azionamento della vite, contenente un puntale, utilizzando il tubo adattatore silicone. Un piccolo nick è fatto sul lato fianco destro del rene, non troppo grande né troppo profondo. L&#39;estremità smussata del tubo PE50, più vicino alle celle, è accuratamente posizionato sotto la capsula, il tubo viene spostato delicatamente per fare spazio, mentre tampone soluzione fisiologica; una capsula secca può strappare facilmente. Una piccola bolla d&#39;aria è fornito sotto la capsula lentamente componendo il disco vite siringa. Isolotti sono poi lentamente consegnati dietro la bolla d&#39;aria. Omeostasi renale una volta le isole sono state consegnate viene mantenuta e la knick è cauterizzato a basse temperature. Il rene è posto nuovamente dentro la cavità ed il peritoneo e la pelle sono suturate e pinzati. I topi sono immediatamente trattati con Buprenorfina e Flunixin mq e posto in una gabbia su una piastra elettrica.

Il nostro protocollo è stato sviluppato per fornire in modo pulito e facilmente le cellule o isolotti sotto la capsula renale di topi. Le cellule sono concentrate in pellet nel tubo finale utilizzato per il trapianto delle cellule sotto la capsula renale. La facilità di questa tecnica riduce lo stress per le cellule e il mouse.

Il trapianto di isole pancreatiche nella capsula renale di topi diabetici

Il nostro protocollo è stato sviluppato per somministrare in modo pulito e semplice isolotti o cellule sotto la capsula renale di topi diabetici o normali. Abbiamo riscontrato che era più facile...

Ciao, mi chiamo Greg Zod. Sono presso il Centro per il Diabete dell'UCSF, nel laboratorio di Bluestone, e oggi vi mostrerò come trapiantare isolotti pancreatici sotto la capsula renale di topi diabetici. Questa procedura prevede il prelievo di isolotti purificati da ceppi di topi sinnici o allogenici, la loro purificazione e il trapianto sotto la capsula renale di topi diabetici.Topi che possono sviluppare naturalmente il diabete, come i topi NOD, o topi resi artificialmente diabetici mediante iniezione di streptozotocina. Ora siamo pronti per selezionare manualmente gli isolotti. Procederò alla selezione manuale degli isolotti e li conterò mentre li aspiro con una pipetta dotata di punta di pastorizzazione.Lascierò indietro qualsiasi a nel nostro tessuto e, semplicemente osservando il modo in cui la luce si rifrange nel tessuto, riesco a distinguere un occhiello da ciò che non lo è. Poi conterò gli occhielli. Li metterò in una provetta microcentrifuga e li raccoglieremo per il trapianto.Gli occhielli hanno un aspetto più denso, quasi rossastro, e l'apice in R è più chiaro e soffice. Ha inoltre un aspetto tendente al biancastro. Pertanto, durante il prelievo degli occhielli otterrete anche un po' di tessuto dell'apice in R, ma finché preleverete la maggior parte degli occhielli, andrà bene.E puoi vedere che c'è un bel pezzo grande di tessuto R. E poi qui c'è un bel foro con un altro foro sopra. E poi, però, c'è un po' di A nell'R tra i due che ti permette di spostare un po' le cose e catturare i singoli fori.E se lo si nota, sto usando una punta per pipetta non conica. Questa punta ha pareti molto sottili ed è dritta. Ciò consente una maggiore facilità nell'inserire e rimuovere gli occhielli dalla punta.Attenzione a non tentare di afferrare un linfonodo. Questi sono linfonodi particolari, linfonodi pancreatici, che vengono digeriti ed eliminati. Io cerco di afferrare soltanto gli occhielli, se possibile, lasciando i linfonodi al loro posto.Dopo aver selezionato manualmente gli anellini, ho 500 anellini liberi sul fondo di questa provetta da microcentrifuga. Ora trasferirò questi anellini nel nostro tubo P150 per il trapianto. Per farlo, prendo una punta da pipetta e aspiro lentamente gli anellini dal fondo della provetta.Dopo aver inserito gli occhielli nella punta della pipetta, prendo il tubo di silicone collegato al tubo B 50 e li lascio depositare all'interno della punta della pipetta fissandoli con del nastro sul lato della parete della cappa. Una volta che i pellet si sono depositati all'interno della punta della pipetta, rimuoveremo la pipetta e spingeremo lentamente il pellet nel tubo agendo sulla manopola della pipetta, non sul pistone. Mentre ruoto la manopola della pipetta, sposto contemporaneamente il tubo.Permettono ai pellet di entrare nel tubo P 50. Quando i pellet si sono spostati a circa un pollice dalla fine del tubo, ho piegato il tubo per mantenere i pellet al suo interno. Ho rimosso il tubo di silicone e trasferito nella piega.Questo viene quindi inserito in un tubo da centrifuga con una pipetta da cinque millimetri che è stata tagliata. Poi piego il tubicino e lo fisso con del nastro alla pipetta da cinque millimetri. Ora è pronto per la centrifusione.Il topo è stato rasato e anestetizzato, e ora verificheremo che non risponda a una pinzatura delle dita del piede. Procederò a pulire il topo con tamponi di iodopovidone. L'intervento chirurgico viene eseguito in modo asettico, ma tutte le punte degli strumenti che utilizzo sono sterili.Proprio a destra della milza, nel fianco sinistro del topo, eseguirò una piccola incisione. L'obiettivo è mantenere questa incisione di piccole dimensioni in modo da poter trattenere il rene in posizione. Quando si isola il rene, si taglierà ora la parete peritoneale esattamente sopra tale rene, praticando una piccola incisione.E con un solo movimento, sollevo la pelle verso sinistra e spingo verso l'alto, poi verso il basso sul rene, facendolo uscire così com'è. Mantengo il rene umido, con un po' di soluzione salina e gentamicina, un antibiotico. Con un ago da 25 gauge, pratico un piccolo foro nel rene nel punto in cui verrà posizionato il tubicino.Non si vuole scavare nel rene, si desidera solo fare una piccola incisione. Si vedrà una sottile linea di sangue. A quel punto si sa di essere entrati nella capsula.Prendendo il mio tubo P 50 tagliato con un bordo obliquo, andrò a infilarmi sotto il bordo del taglio che ho realizzato e posizionerò lentamente il tubo sotto la capsula. Pavel mantiene il rene umido durante questa procedura perché una capsula secca si strappa facilmente. Una volta che il tubo P 50 si trova sotto la capsula, Pavo avanzerà il pellet utilizzando una siringa Hamilton con azionamento a vite.E puoi vedere il pellet che entra lentamente, qui, piano piano. E si guida il posizionamento dell'occhiello in base alla vite di avanzamento. Una volta posizionati gli occhielli, prendo un batuffolo di garza asciutta, tampono la zona e, utilizzando un bisturi elettrico, sigillo l'incisione e il rene.Utilizzando un filo di seta 5-0, afferro il peritoneo e lo suturo. Eseguo una sutura continua per chiudere il topo. Chiudiamo la cute con punti metallici.Prima di svegliare il topo, gli somministro un'iniezione sottocutanea di bpro, ammina e flu nixon come antinfiammatori e un analgesico. Il topo viene quindi riportato nella sua gabbia su un tappetino riscaldante. Vi ho appena mostrato come trapiantare occhielli sotto la capsula renale dei topi.Questo è un ottimo modello per studiare la tolleranza al trapianto o i metodi per trattare il diabete. In particolare nel nostro laboratorio, utilizziamo questo modello per analizzare gli effetti delle cellule T regolatorie sul trapianto di cellule delle isole o per indurre tolleranza mediante diverse molecole di blocco costimolatorio.

transplantation-pancreatic-islets-into-kidney-capsule-diabetic

Research

Ricerca

JoVE Journal

Biology

Biologia

Trapianto di isole isolate è stato proposto di essere un potenziale trattamento per il diabete di tipo 1. Qui si descrive un metodo per isolare le isole dal pancreas del mouse e trapiantarle allo spazio sottocapsulare del rene.

Un metodo per isolamento Islet murini e trapianto renale subcapsulare

Questo video descrive il protocollo per l'innesto di isole pancreatiche umane nella camera anteriore dell'occhio del topo per monitorare la rivascolarizzazione degli innesti di isole umane in vivo. Aiuta anche a comprendere il contributo delle cellule riceventi rispetto a quelle del donatore nel promuovere l'incapsulamento e la vascolarizzazione del trapianto.

Innesto di isole pancreatiche: un metodo per impiantare le isole pancreatiche nella camera anteriore dell'occhio del topo per l'imaging in vivo

Questo protocollo dimostra l'isolamento delle isole murine e la semina su un impalcatura decellulare. Isole supportate da ponteggi sono state trapiantate nel pad di grasso epididimo di topi diabetici indotti da streptozotocina (STZ). Isole sopravvissute al sito di trapianto e invertite la condizione iperglicemica.

Il trapianto di isole nel supporto del grasso epididimico dei topi diabetici

Tra trapianto di organo solido addominale, gli innesti del pancreas sono inclini a sviluppare danno lesione-collegata dell'innesto di grave ischemia riperfusione, che conduce alla fine precoce perdita dell'innesto. Questo protocollo descrive un modello di trapianto di pancreas murino usando una tecnica di sutura non polsino, ideale per analizzare questi danni presto, deleteri.

Modello di topo per il trapianto di Pancreas usando una tecnica modificata polsino

È stato introdotto un metodo per il trapianto omentale di isolotti in un mouse. Gli isolotti isolati sono mescolati con idrogel e la miscela viene inserita nel sacchetto omentale di un topo diabetico. Quindi, il glucosio nel sangue è controllato e viene eseguita l'analisi immuno-istochimica.

Un metodo per il trapianto dell'isolotto al omento in Mouse

Trapianto di isole pancreatiche è un modo per raggiungere normoglycemia in diabete di tipo 1. Questo articolo si concentra sulla tecnica di trapianto attraverso il percorso intraportal per mantenere i livelli normali del glucosio nei topi diabetici.

Intraportal trapianto di isole pancreatiche nel modello del topo

In questo protocollo, viene descritto un metodo di isolamento murine ilet e trapianto nel tessuto adiposo bianco sottocutaneo inguinale. Le isole di murine singeniche isolate vengono trapiantate in un recipiente murino utilizzando un idrogel di membrana sotterranea. Viene monitorato il livello di glucosio nel sangue dei destinatari e viene eseguita l'analisi istologia degli innesti di islet.

Modello di trapianto di Murine (ISWAT) del tessuto adiposo sottocutaneo inguinale (ISWAT)

L'obiettivo di questo protocollo è quello di monitorare continuamente le dinamiche del processo di innesto dell'isolotto pancreatico umano e delle cellule che contribuiscono tra l'ospite e il donatore. Ciò si ottiene trapiantando isolotti umani nella camera anteriore dell'occhio (ACE) di un NOD. (Cg)-Gt(ROSA)26Sortm4-Rag2-/-destinatario del mouse seguito da ripetute immagini a 2 fotoni.

Longitudinale in Vivo Imaging e quantificazione dell'isolotto pancreatico umano Innesto e contribuendo cellule ospitanti nella camera occhio anteriore

Qui presentiamo procedure chirurgiche raffinate sull'esecuzione con successo del trapianto intraportale di isole, una procedura chirurgica clinicamente rilevante ma tecnicamente impegnativa, nei topi.

Ridurre al minimo il sanguinamento della vena porta post-infusione durante il trapianto di isole intraepatiche nei topi

Forniamo un protocollo minimamente invasivo per il trapianto intramuscolare di isolotti di cellule staminali pancreatiche derivate da cellule staminali umane in topi immunodeficienti per l'impianto in vivo e l'analisi a valle.

Trapianto intramuscolare di cellule endocrine pancreatiche derivate da cellule staminali pluripotenti umane nei topi

Scopri la tecnica di trapianto di isole pancreatiche nella capsula renale di topi diabetici. Questo metodo minimizza lo stress cellulare e migliora i risultati del trapianto nei modelli murini.

Il trapianto di isole pancreatiche nella capsula renale di topi diabetici

Esplora altri video