Name: Non invasiva di misurazione ottica del metabolismo cerebrale ed emodinamica nei neonati (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-03-14T09:20:00.000+00:00
Duration: 11 min 39 s
Description: Impara a misurare il metabolismo cerebrale e l'emodinamica nei neonati con spettroscopia ottica non invasiva. Questo metodo consente valutazioni al letto per monitorare la salute cerebrale.

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Gli autori ringraziano tutte le famiglie per la loro partecipazione a questo studio e gli infermieri, i medici, e del personale in neonatale terapia intensiva, la scuola materna Special Care, Neurologia Pediatrica, e le unità di maternità presso il Massachusetts General Hospital, Brigham and Women Hospital e Hospital di Boston per bambini per il loro aiuto e sostegno. In particolare ringraziamo Linda J. Van Marter, Robert M. Insoft, Jonathan H. Cronin, Julianne Mazzawi, e Steven A. Ringer. Gli autori hanno anche ringraziare Marcia Kocienski-Filip, Yvonne Sheldon, Alpna Aggarwall, Maddy Artunguada e Genevieve Nave per la loro assistenza durante le misurazioni. Questo progetto è sostenuto da NIH R01-HD042908, R21-HD058725, P41-R43-RR14075 e HD071761. Marcia Kocienski Filip-Yvonne e Sheldon sono supportati dal Premio Clinical Science Translational UL1RR025758 a Harvard e Brigham e dell&#39;ospedale delle donne dal National Center for Research Resources. Il contenuto è di esclusiva responsabilità del unuthors e non rappresentano necessariamente le opinioni ufficiali del Centro nazionale per le risorse di ricerca o il National Institutes of Health.

1. Preparazione per le misure da comodino <ol><li> Le FDNIRS ed i sistemi DCS sono compatti e facili da spostare su un piccolo carrello al capezzale del bambino in ospedale (Figura 1). </li><li> Dopo aver spostato il carrello con i dispositivi per il letto, accendere il sistema e collegare la sonda ottica per le FDNIRS e dispositivi DCS. Assicurarsi che due sperimentatori sono presenti per ogni misura: uno per la gestione degli strumenti e computer, e una per tenere la sonda. </li><li> Scegliere la sonda appropriata a seconda dell&#39;età postmestruale del neonato (PMA). La sonda ottica con FDNIRS sorgente-detector separazioni di cm 1, 1.5, 2 e 2.5 viene utilizzato per i bambini &lt;37 settimane PMA e la sonda con separazioni FDNIRS 1.5, 2, 2.5 e 3 cm viene usato per bambini più grandi (Figura 2-A ). La scelta della sorgente-detector più brevi separazioni è dettata da piccole dimensioni neonati prematuri &#39;e curvatura testa più grande. Quando si utilizza una sonda più grande, con un neonato pretermine, la relativamente dimensione più piccola della testa del bambino e la sua curvatura significativa insieme impedire efficace contatto tra la testa del bambino e tutte le sorgenti e rivelatori. Per questo motivo, la sonda con FDNIRS sorgente-detector separazioni di cm 1, 1.5, 2 e 2.5 è adatta per l&#39;uso con neonati prematuri. La nostra ricerca ha verificato che le scelte sorgente-detector separazioni sono sufficienti per misurare le proprietà ottiche della corteccia cerebrale del 14 sia a termine o prematuri. DCS fibre sorgente e rivelatore sono disposti in una fila parallela alle fibre FDNIRS con sorgente-rivelatore distanze di 1,5 (uno detector) e 2 cm (tre rivelatori) in entrambe le sonde prematuri e neonati a termine. </li><li> Sterilizzare le sonde ottiche con un panno Sani-disinfezione pulire e inserire la sonda e le fibre in un unico uso manicotto in plastica polipropilene. </li></ol> 2. Impostazioni di guadagno FDNIRS e taratura <ol><li> Aprire l&#39;interfaccia FDNIRS grafica utente (GUI) e selezionare il file delle impostazioni del programmablocco corrispondente alla sonda e calibrazione utilizzata. </li><li> Per regolare guadagni rivelatore, delicatamente la sonda su una superficie di testa del soggetto senza capelli (preferibilmente il lato sinistro della fronte) e mantenerla nella stessa posizione senza applicare alcuna pressione. Attivare sorgenti e rivelatori e regolare tensione PMT fino l&#39;ampiezza qualsiasi delle sorgenti laser raggiunge 20.000 conteggi. 32000 conta è la digitalizzazione massimo della scheda di acquisizione analogica a digitale, e gli utili devono essere impostati al di sotto di tale soglia per evitare la saturazione durante l&#39;acquisizione dei dati. I guadagni dovrebbero essere impostati nella zona frontale perché questa regione ha generalmente il più basso assorbimento della luce laser e quindi è più incline a saturazione. </li><li> Spegnere le sorgenti e rivelatori e tornare la sonda al blocco di calibrazione. I laser devono essere disattivata quando si sposta la sonda per la sicurezza degli occhi, i rilevatori devono essere disabilitati perché PMT sono molto sensibili e l&#39;esposizione a qualsiasi luce increases rumore di fondo e può danneggiarli in modo permanente. </li><li> Con la sonda di nuovo sul blocco di calibrazione, utilizzare la densità neutra (ND), filtrare nel caso la sorgente-rivelatore saturi coppia. Filtri ND differenti possono essere selezionati a causa di guadagni ottimizzazione nei bambini con i toni della pelle diversi Tenere la sonda ancora per 16 secondi durante l&#39;esecuzione della procedura di calibrazione. Dal momento che non spostare fisicamente una fonte a distanze diverse da un singolo rivelatore per ottenere un multi-sistema di distanza, ma invece utilizzare quattro combinazioni di due fonti indipendenti e due rivelatori indipendenti, abbiamo bisogno di calibrazione per il diverso potere delle due fonti e i diversi guadagni dei due rivelatori. Misurando un blocco di calibrazione note proprietà ottiche, si stima l&#39;ampiezza e fattori di correzione di fase necessaria per recuperare i coefficienti di assorbimento e diffusione del blocco di calibrazione. </li><li> Dopo la calibrazione, acquisire altri 16 sec di dati sul blocco e visivamente valutare l&#39;adeguatezza del secolocalibrazione e con un in-house MATLAB GUI. Il misurata μa e ms &#39;dovrebbe corrispondere i coefficienti reali del blocco di calibrazione in tutte le lunghezze d&#39;onda. Ricalibrare se l&#39;adattamento è scarsa. </li><li> Se guadagni rivelatore devono essere cambiate, o fibre di origine e di rilevatore devono essere scollegati durante le misurazioni, ripetere la procedura di calibrazione del dispositivo FDNIRS. </li><li> Alla fine della sessione di misura, acquisire un altro 16 sec di dati sul blocco di calibrazione per verificare se la taratura è stata mantenuta durante le misurazioni sull&#39;argomento. Se la taratura non è stato mantenuto, prendere una seconda calibrazione al termine della misurazione e applicare ai dati acquisiti. </li></ol> 3. DCS Impostazioni <ol><li> Aprire l&#39;in-house DCS acquisizione dati GUI e caricare il file di impostazioni corrispondente alla sonda ottica in uso. </li><li> Prima di iniziare le misurazioni, verificare che la potenza del laser della sorgente DCS è appropriato per il trattamento della pelle, misurando tegli potenza del laser della sorgente DCS con un misuratore di potenza e controllo della dimensione del punto con una scheda di visualizzazione IR (il laser emette a 785 nm, che non è visibile). La potenza del laser è DCS ~ 60 mW ed accoppiato ad una fibra di diametro relativamente piccolo (400-600 micron). Per soddisfare gli standard ANSI per l&#39;esposizione della pelle, la luce in corrispondenza della sonda deve essere attenuata e diffusa in una vasta area. Ciò si ottiene coprendo la punta della fibra con un diametro di 3 mm teflon bianco foglio (Figura 2-A). Il Teflon è altamente diffondenti e diffonde ampiamente il raggio laser. Al letto, in modo che la potenza del laser in corrispondenza della sonda è inferiore a 25 mW e la dimensione del punto è maggiore di 3 mm di diametro. Per quanto riguarda i FDNIRS, spegnere sempre sorgenti e rivelatori durante lo spostamento della sonda ottica. </li><li> Rilevamento DCS è photon-counting e non c&#39;è regolazione guadagno APD come è richiesto per il dispositivo FDNIRS. Una bandiera nel software di acquisizione indica se troppa luce viene rilevato, nel qual caso l&#39;accoppiamento con luce IETla sorgente o fibre rivelatore deve essere ridotta ruotando i connettori di fibra. Adeguata di rilevamento della luce è la gamma di 200,000-4,000,000 fotoni rivelati (corrispondenti a -26 ~ 0 dB sul display del computer). Evitare l&#39;eccessiva luce camera per ridurre il rumore di fondo. </li><li> Il DCS non necessita di calibrazione per misurare i CBF. Il flusso di sangue è proporzionale al tempo necessario a perdere correlazione. Un solido blocco non è sufficiente per verificare la qualità del segnale, perché non ci sono particelle in movimento a diffusione causano la carie. Un braccio di sperimentatore mostra invece decadimento - più veloce è il flusso di sangue, più ripida il decadimento. </li></ol> 4. Acquisizione dei dati <ol><li> Mentre FDNIRS e misure DCS può essere effettuata rapidamente in sequenza, prima misurare tutte le posizioni con un solo dispositivo e quindi ripetere la stessa progressione con l&#39;altro dispositivo, utilizzando il software di acquisizione indipendente corrispondente a ciascuna. </li><li> Misurare sette sedi che coprono frontale, temporale e Parietaree Al, secondo un sistema di 10-20 (Fp1, FPZ, FP2, C3, C4, P3, P4), in sequenza (Figura 2-B). Parte i capelli lungo la linea sorgente-rilevatore e posizionare la sonda in quella zona della testa. </li><li> Accendere il laser FDNIRS e rivelatori e verificare la qualità del segnale: conta l&#39;ampiezza deve essere compreso tra 2.000 e 20.000 e sfasamenti SNR &lt;2 gradi. Se al di fuori di questi intervalli, riposizionare la sonda, garantendo capelli è divisa e tutte le fonti ei rivelatori sono in contatto con la pelle. </li><li> Acquisire dati per 16 sec. Ripetere le misurazioni fino a tre volte in ogni posizione (Figura 2-C), tagliando il pelo e riposizionare la sonda in un punto leggermente diverso per ogni acquisizione. Questo viene fatto per minimizzare effetti di disomogeneità locali, come capelli e superficiali grandi vasi e per fornire valori rappresentativi di una regione, invece di un singolo punto. </li><li> Accendere il laser DCS e rilevatori e acquisire dati per 10 sec. Riposizionare la sonda e rappresentantemangiare le acquisizioni (come con le misure FDNIRS). </li><li> Spegnere tutti i laser quando si sposta la sonda da un luogo all&#39;altro. La raccolta dei dati in tutte le sette località non è sempre possibile. Interrompere le misurazioni se il soggetto manifesta alcun segno di disagio o di movimento. Riprova l&#39;acquisizione, se possibile. Elettrodi EEG o attrezzature respiratorie possono anche precludere misure in alcune località. </li></ol> 5. Misura dei parametri sistemici <ol><li> Per il calcolo di CMRO 2i, due parametri sistemici, l&#39;ossigenazione arteriosa (SaO2) e di emoglobina nel sangue (HGB), deve essere acquisita. HGB è necessaria anche per il calcolo CBV. Mentre pulsossimetria convenzionale prevede misure di SaO2, HGB è convenzionalmente misurata con un esame del sangue. Un pulsossimetro nuovo, sviluppato da Masimo Corporation, è in grado di misurare HGB non invasivo utilizzando lunghezze d&#39;onda multiple. Il dispositivo è approvato dalla FDA per bambini&gt; 3 kg, e consente una misura comodino veloceure di entrambi 2 Sao e HGB. </li><li> Record SaO2 e HGB con un pulsossimetro Masimo (spot Pronto controllo del polso co-ossimetro). Per queste misurazioni, attaccare un adesivo sensore monouso per l&#39;alluce del piede del bambino. HGB sarà visualizzato sul monitor in pochi secondi. </li><li> Quando non è possibile utilizzare l&#39;impulso Masimo co-ossimetro, misura SaO 2 con altri approvati dalla FDA pulsossimetri. HGB può essere sia recuperati da cartelle cliniche dei pazienti o stimati sulla base di valori normativi. </li></ol> 6. Analisi dei dati <ol><li> Aprire un in-house di post-elaborazione dei dati di analisi GUI utilizzando MATLAB. Questo software non solo stima di tutti i parametri emodinamici, ma utilizza anche la ridondanza dei dati per valutare automaticamente la qualità di misura e limitare i risultati. </li><li> Automatici criteri oggettivi per il controllo della qualità dei dati sono costituiti scartare per FDNIRS se: R2 &lt;0.98 per l&#39;adattamento del modello dei dati sperimentali, p-value&gt; 00,02 per il coefficiente di correlazione di Pearson momento prodotto tra gli otto coefficienti di assorbimento misurati e la misura dell&#39;emoglobina (Figura 3-A), p-value&gt; 0,02 per il fit lineare dei coefficienti di scattering ridotte rispetto lunghezza d&#39;onda (Figura 3-B) 15. Se più del 33 per cento della meriti dati scartando, l&#39;intera serie viene scartato. Per i DCS, dati viene scartato se: la coda della curva di raccordo diversa da 1 da più di 0,02, la variazione cumulativa fra i tre primi punti della curva è più di 0,1, o il valore medio dei tre primi punti è più di 1,6 (Figura 4). Se più del 50 percento di curve vengono scartati, oppure i valori di misura hanno un coefficiente di variazione&gt; 15 per cento, l&#39;intera serie viene scartato 15. </li><li> Calcola assoluta HBO e le concentrazioni di HBr inserendo i coefficienti di assorbimento a tutte le lunghezze d&#39;onda, utilizzando i valori di letteratura per Hb estinzione coefficienti 16 euna concentrazione di 75 per cento di acqua in tessuto 17. Derive concentrazione totale di emoglobina (HbT = HBO + HBr) e SO 2 (HBO / HBT) in base alle concentrazioni HBO e HBr. </li><li> Stima del volume ematico cerebrale utilizzando l&#39;equazione descritta in Ijichi et al 18. CBV = (MW HbT × Hb) / (HGB × D bt), dove MW Hb = 64.500 [g / mol] è il peso molecolare di Hb, e D bt = 1,05 g / ml è la densità del tessuto cerebrale. </li><li> Calcola CBF i inserendo le funzioni di misura di autocorrelazione temporali all&#39;equazione correlazione diffusione. Il quadro teorico dettagliato per il calcolo CBF i è in Boas et al. E Boas e Yodh 10,11. Nelle equazioni, usare coefficienti di assorbimento individuali misurate dalle FDNIRS e una media dei coefficienti di scattering in tutta l&#39;intera popolazione. </li><li> Calcolare l&#39;indice di consumo di ossigeno cerebrale utilizzando la misura FDNIRS di SO <sub&gt; 2 e la misura del DCS CBFi con la seguente equazione: CMRO 2i = (HGB CBFi × × (SaO2 - SO 2)) / (4 × MW Hb × β) 15, in cui il fattore 4 riflette i quattro O 2 molecole associato a ciascuna emoglobina e β è il contributo percentuale del compartimento venoso per la misura dell&#39;emoglobina ossigenazione 19. </li></ol>

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Maria Angela Franceschini, suo marito David Boas, e Beniamino Barbieri (ISS Inc) detengono i brevetti su questa tecnologia.

Abbiamo dimostrato una misurazione quantitativa di emodinamica cerebrale e metabolismo con FDNIRS e DCS nella popolazione neonatale. La configurazione della sonda è ottimizzato per la misura corteccia cerebrale neonatale 14. Variazioni di flusso del sangue misurate dal DCS sono stati ampiamente convalidati in altre tecniche in studi su animali e umani 22,23. Utilizzando una misura diretta DCS del flusso di sangue, siamo in grado di ridurre la varianza nel calcolo del CMRO 2i 24. La varianza di misure ripetute era anche più piccola delle modifiche tra le regioni del cervello e con l&#39;età 20. Dai nostri precedenti risultati, CBFi e CMRO 2i ha mostrato significativi cambiamenti con PMA in neonati pretermine sani. La misura della CMRO 2i è meglio in grado di rilevare i danni cerebrali rispetto alla misura di SO 2. Ciò suggerisce che le misure combinate di parametri vascolari e metabolici servire b come più robustoiomarkers di salute del cervello neonatale e lo sviluppo di saturazione di ossigeno da solo. I miglioramenti tecnici si concentrerà sull&#39;integrazione di due strumenti per ridurre il tempo di acquisizione 35-40% per ogni sessione e l&#39;attuazione di feedback in tempo reale sulla qualità dei dati per ridurre la frequenza delle misure di scarto. Nel prossimo futuro, questo sistema può essere consegnato clinici utenti finali come un monitor posto letto romanzo di alterato metabolismo dell&#39;ossigeno cerebrale. Misurando traiettorie di CMRO 2 nel corso del tempo può anche aumentare significato clinico e prevedere i risultati. Questo strumento potrebbe dare un contributo significativo verso una migliore gestione del danno cerebrale neonatale.

Il dispositivo è un FDNIRS personalizzato dominio della frequenza dal sistema ISS Inc. con due serie identiche di 8 diodi laser che emettono a lunghezze d&#39;onda comprese otto 660-830 nm, e due tubi fotomoltiplicatori (PMT) rivelatori. Sorgenti e rivelatori sono modulati a 110 MHz e 110 MHz più 5 kHz, rispettivamente, per ottenere un rilevamento eterodina 6. Ogni diodo laser è acceso per 10 msec in sequenza, per un tempo di 160 msec acquisizione totale per ciclo. Sorgenti e rivelatori sono accoppiati a fibre ottiche e disposti in una fila in una sonda ottica. La disposizione delle fibre sulla sonda è tale che produce quattro differenti sorgente-rivelatore separazioni. Misurando la luce trasmessa (attenuazione ampiezza e sfasamento) a distanze diverse, si può quantificare l&#39;assorbimento (μa) e dispersione (ms &#39;) coefficienti del tessuto sotto osservazione. Dai coefficienti di assorbimento a lunghezze d&#39;onda multiple, abbiamo poi stimare i valori assoluti di ossigenato (HBO) edeossigenata (HBR) concentrazioni di emoglobina 7, del volume ematico cerebrale (CBV) e saturazione di ossigeno dell&#39;emoglobina (SO 2). Il dispositivo DCS è una casa - sistema integrato simile a quello sviluppato da Drs. Arjun Yodh e Turgut Durduran presso l&#39;Università della Pennsylvania 8,9. Il sistema DCS che consiste di un solido - stato, laser coerenza a lungo a 785 nm, quattro fotoni conteggio valanghe fotodiodi (APD) rilevatori (EG &amp; G Perkin Elmer SPCM-AQRH) dotati di bassa conta scure (&lt;50 conteggi / sec) e di un elevato quantum yield (&gt; 40% a 785 nm), e un canale di quattro, 256-bin multi-tau correlatore, con risoluzione di 200 nanosecondi. Con i DCS misuriamo flusso sanguigno microvascolare in corteccia cerebrale quantificando le fluttuazioni di intensità di luce moltiplicano temporali sparsi che deriva da spostamenti Doppler prodotta spostando globuli rossi. La tecnica, simile a flussimetria laser Doppler sangue (cioè sono Fourier Transform analoghi), le misure di una funzione di autocorrelazione delle fluttuazioni di intensità di ogni canale rivelatore calcolato da un correlatore digitale in un intervallo di tempo di ritardo di 200 nsec - 0,5 sec. Il correlatore calcola l&#39;intensità temporale autocorrelazione della luce riemergere dal tessuto. Abbiamo poi montare l&#39;equazione di correlazione diffusione alla funzione di autocorrelazione misurata, acquisito sequenzialmente, circa una volta al secondo, per ottenere l&#39;indice di flusso sanguigno (CBF i) 10,11. Misure DCS dei cambiamenti del flusso sanguigno sono stati ampiamente convalidati 12,13. Combinando le misure FDNIRS di SO 2 con le misure di DCS CBF i, otteniamo una stima del metabolismo dell&#39;ossigeno cerebrale (CMRO 2i).

<table border="1"><tbody><tr><td> Attrezzatura </td><td> Azienda </td><td> Numero di catalogo </td><td> Commenti (opzionale) </td></tr><tr><td> Imagent </td><td> ISS </td><td></td><td> FDNIRS </td></tr><tr><td> DCS fibre laser </td><td> Thorlabs </td><td> FT400 </td><td> DCS componente </td></tr><tr><td> DCS rilevatore di fibra </td><td> Thorlabs </td><td> 780HP </td><td> DCS componente </td></tr><tr><td> DCS laser </td><td> CrystaLaser </td><td> DL785-070-S </td><td> DCS componente </td></tr><tr><td> DCS rivelatore </td><td> Pacer International </td><td> SPCM-AQRH-14-FC </td><td> DCS componente </td></tr><tr><td> DCS Correlatore </td><td> Correlator.com </td><td> Flex05-8ch </td><td> DCS componente </td></tr><tr><td> Pronto co-ossimetro </td><td> Masimo </td&gt; <td></td><td> HGB e São 2 monitor </td></tr><tr><td> NOVA </td><td> OPHIR </td><td> 7Z01500 </td><td> Misuratore di potenza laser </td></tr><tr><td> Sensore carta </td><td> Newport </td><td> F-IRC1-S </td><td> IR visualizzatore </td></tr><tr><td> Filtro a densità neutra </td><td> Kodak </td><td> NT54-453 </td><td></td></tr></tbody></table>

non invasiva di misurazione ottica del metabolismo cerebrale ed emodinamica nei neonati

Non-invasive Optical Measurement of Cerebral Metabolism and Hemodynamics in Infants

Danno cerebrale perinatale resta una causa significativa di mortalità infantile e la morbosità, ma non esiste ancora uno strumento efficace che può comodino accuratamente lo screening per le lesioni al cervello, lesioni evoluzione monitor o valutare la risposta alla terapia. L&#39;energia utilizzata dai neuroni deriva in gran parte dal metabolismo ossidativo dei tessuti, e iperattività neuronale e la morte cellulare si riflettono da corrispondenti variazioni nel metabolismo dell&#39;ossigeno cerebrale (CMRO 2). Pertanto, le misure di CMRO 2 sono riflettenti della vitalità neuronale e di fornire informazioni diagnostiche critiche, rendendo CMRO 2 un bersaglio ideale per la misurazione capezzale di salute del cervello. Brain-tecniche di imaging come la tomografia ad emissione di positroni (PET) e single-tomografia computerizzata a fotone (SPECT) misure di rendimento di glucosio cerebrale e metabolismo dell&#39;ossigeno, ma queste tecniche richiedono la somministrazione di radionuclidi, in modo che siano utilizzate solo in casi più acuti. Onda continua spettroscopia nel vicino infrarosso (CWNIRS) prevede misure di radiazioni non invasive e non ionizzanti di saturazione di ossigeno dell&#39;emoglobina (SO 2) come surrogato di consumo di ossigeno cerebrale. Tuttavia, SO 2 è meno ideale come sostituto per il metabolismo cerebrale dell&#39;ossigeno come viene influenzato sia l&#39;apporto di ossigeno e di consumo. Inoltre, le misure di SO 2 non sono abbastanza sensibili per rilevare ora lesioni cerebrali dopo il 1,2 insulto, perché il consumo di ossigeno e la consegna raggiungere l&#39;equilibrio dopo i transienti acuti 3. Abbiamo studiato la possibilità di utilizzare NIRS più sofisticati metodi ottici per quantificare metabolismo cerebrale ossigeno al letto in neonati sani e cerebrolesi. In particolare, abbiamo combinato nel dominio della frequenza (NIRS FDNIRS) misura di SO 2 con la spettroscopia di correlazione diffuso (DCS) misura dell&#39;indice di flusso sanguigno (CBF i) yield un indice di CMRO 2 (CMRO 2i) 4,5. Con i FDNIRS combinato / sistema DCS siamo in grado di quantificare il metabolismo cerebrale e l&#39;emodinamica. Questo rappresenta un miglioramento rispetto CWNIRS per rilevare la salute del cervello, lo sviluppo del cervello, e la risposta alla terapia nei neonati. Inoltre, questo metodo aderisce a tutte le unità di terapia intensiva neonatale (TIN) politiche in materia di controllo delle infezioni e politiche istituzionali in materia di sicurezza laser. I lavori futuri si cercherà di integrare i due strumenti per ridurre il tempo di acquisizione al letto del paziente e per attuare feedback in tempo reale sulla qualità dei dati per ridurre il tasso di rifiuto dei dati.

Negli ultimi cinque anni abbiamo dimostrato la fattibilità e l&#39;utilità clinica del metodo proposto. In particolare, abbiamo dimostrato CMRO 2 a essere più rappresentativo della salute del cervello e lo sviluppo di SO 2. In uno studio trasversale su più di 50 bambini sani, abbiamo scoperto che, mentre CBV è più del doppio durante il primo anno di vita, SO 2 rimane costante 4 (Figura 5). In uno studio su 70 neonati sani abbiamo anche scoperto che SO 2 è costante in tutte le regioni del cervello, mentre CMRO 2i, CBV e CBF sono più elevati nelle regioni temporali e parietali che nella regione frontale (Figura 6) 20, che è coerente con l&#39;assorbimento del glucosio PET risultati 21. In entrambi i nostri studi, la costante SO 2, all&#39;interno di un intervallo 60-70 per cento indica che la somministrazione di ossigeno segue per il consumo locale, mentre CBV, CBF e CMRO 2 sono more strettamente accoppiati con lo sviluppo neurale. Per verificare che CMRO 2i è uno strumento di screening migliore di SO 2 nel rilevamento di lesioni cerebrali neonatali, abbiamo misurato i bambini del cervello lese durante la fase acuta 5, e (in un paio di bambini) durante la fase cronica diversi mesi dopo la lesione. Risultati in figura 7 mostrano come SO 2 non è significativamente alterato da lesioni cerebrali in entrambe le prime (1-15 giorni dopo insulto) e croniche (mesi dopo la lesione) Ciclo di vita, mentre CMRO 2i è significativamente diverso rispetto al normale sia durante la fase acuta e cronica . In particolare, CMRO 2i è elevata durante la fase acuta a causa di attività convulsiva dopo una lesione cerebrale, e più bassa del normale durante la fase cronica a causa della perdita neuronale. I neonati con ipossia lesioni ischemiche sono attualmente trattati con ipotermia terapeutica (TH) per il metabolismo del cervello inferiore e ridurre i danni dopo l&#39;ins ipossicaUlt. Ipotermia terapeutica è mantenuto per tre giorni e siamo stati in grado di monitorare 11 neonati durante il trattamento (Figura 8). Abbiamo trovato che CMRO 2i diminuisce significativamente a livelli inferiori normale durante TH, e questa diminuzione sembra essere correlato alla risposta alla terapia e conseguenze per lo sviluppo. Questi risultati preliminari suggeriscono che il FDNIRS-DCS metodo può essere in grado di guidare e ottimizzare la terapia con ipotermia. <img alt="Figura 1" src="/files/ftp_upload/4379/4379fig1.jpg" /> Figura 1. Immagine del carrello con i FDNIRS e dispositivi di DCS. I due strumenti sono abbastanza compatto da poter stare su un piccolo carrello che può essere spostato al capezzale del bambino in terapia intensiva. <img alt="Figura 2" src="/files/ftp_upload/4379/4379fig2.jpg" /> Figura 2. (A) di configurazione della sonda ottica. <strong&gt; (B) Il regime posizione di misura. (C) Una foto di un tipico FDNIRS-DCS misura su un bambino. <img alt="Figura 3" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/4379/4379fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/4379/4379fig3.jpg" /> Figura 3. Esempi rappresentativi di forma buono e cattivo di misura (A) coefficienti di assorbimento e la misura dell&#39;emoglobina (B) i coefficienti di scattering e la misura lineare. P-value&gt; 0,02 si riferisce ad una misura negativa. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/4379/4379fig3large.jpg" target="_blank">Clicca qui per ingrandire la figura</a> . <img alt="Figura 4" src="/files/ftp_upload/4379/4379fig4.jpg" /> Figura 4. Un esempio rappresentativo di buona vestibilità e il male di una funzione di autocorrelazione delle fluttuazioni di intensità calcolatida un correlatore su un intervallo di tempo di ritardo 200 nsec - 0,5 sec. Nella figura adatta male la coda della curva raccordo diversa da 1 di oltre 0,02 e la variazione dei tre primi punti è più di 0,1. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/4379/4379fig4large.jpg" target="_blank">Clicca qui per ingrandire figura</a> . <img alt="Figura 5" fo:content-width="4in" fo:src="/files/ftp_upload/4379/4379fig5highres.jpg" src="/files/ftp_upload/4379/4379fig5.jpg" /> Figura 5. Variazioni CBV e SO 2 tra le regioni corticali frontali, temporali e parietali in lattanti sin dalla nascita a un anno di età. <img alt="Figura 6" fo:content-width="4in" fo:src="/files/ftp_upload/4379/4379fig6highres.jpg" src="/files/ftp_upload/4379/4379fig6.jpg" /> Figura 6. CBF, SO 2, CBV e CMRO 2i del frontale, teregioni mporal e parietali in 70 neonati sani. <img alt="Figura 7" src="/files/ftp_upload/4379/4379fig7.jpg" /> Figura 7. Esempi di consumo di ossigeno anormale e normale SO 2 dopo danno cerebrale nei neonati. Lesione cerebrale è caratterizzata da cambiamenti nella CMRO 2 rispetto al normale, mentre SO 2 non è significativamente diverso dal normale. Si prega di notare che in queste due figure, CMRO 2 è stato calcolato utilizzando la relazione Grubb, perché la misura DCS non era disponibile al momento di tali misure. <img alt="Figura 8" src="/files/ftp_upload/4379/4379fig8.jpg" /> Figura 8. rCMRO 2 su 11 lattanti durante l&#39;ipotermia terapeutica vs pari età controlli sani. Metabolismo di ossigeno è fortemente ridotta in tutti i bambini con la terapia ipotermia.

Abbiamo combinato nel dominio della frequenza del vicino infrarosso misure di spettroscopia di ossigenazione dell&#39;emoglobina cerebrale con misure di spettroscopia di correlazione di diffuse indice flusso ematico cerebrale per stimare un indice di metabolismo dell&#39;ossigeno. Abbiamo testato l&#39;utilità di questa misura come strumento di screening letto per valutare la salute e lo sviluppo del cervello neonato.

Non invasiva di misurazione ottica del metabolismo cerebrale ed emodinamica nei neonati

La lesione cerebrale perinatale rimane una causa significativa di mortalità e morbilità infantile, ma non è ancora disponibile uno strumento efficace da utilizzare al letto del paziente che possa accuratamente...

L'obiettivo generale di questa procedura è valutare il metabolismo cerebrale dell'ossigeno nei neonati al letto del paziente. Questo viene ottenuto posizionando innanzitutto una sonda ottica sulla testa e misurando, mediante uno strumento basato sulla spettroscopia nel dominio della frequenza nell'infrarosso vicino o FD-NIRS, l'ossigenazione e la concentrazione di emoglobina cerebrale nel tessuto cerebrale sottostante. Successivamente, utilizzando uno strumento di spettroscopia a correlazione diffusa o DCS, viene misurato un indice del flusso ematico cerebrale; quindi le misurazioni con FD-NIRS e DCS vengono ripetute in altre sei posizioni che coprono le aree frontale, temporale e parietale.Utilizzando un pulsossimetro con analisi dell'ossiemoglobina, vengono quindi acquisiti parametri sistemici come l'ossigenazione arteriosa e la concentrazione di emoglobina nel sangue. Infine, tutti i parametri vengono combinati per calcolare il consumo di ossigeno o il CM RO₂. In definitiva, è possibile ottenere risultati che mostrano l'ossigenazione emoglobinica cerebrale, il flusso ematico cerebrale e il metabolismo cerebrale dell'ossigeno attraverso le regioni corticali, al fine di aiutare a rilevare eventuali risposte del cervello a un danno o a una terapia oppure per misurare lo sviluppo cerebrale.Il vantaggio principale della D CSS rispetto ai metodi esistenti come MI e Path è che fornisce una misurazione del metabolismo cerebrale al letto del paziente senza alcun rischio per il neonato. Utilizziamo dispositivi di ricerca che richiedono una certa competenza tecnica e formazione per essere utilizzati. Al momento stiamo collaborando con Incorporated e altre aziende per sviluppare sistemi FD near DCS completamente integrati e più facili da usare.Questo metodo potrebbe migliorare la salute cerebrale del neonato consentendoci di effettuare lo screening delle lesioni, monitorare la risposta ai trattamenti, prevedere gli esiti e, idealmente, ottimizzare le cure individuali. Abbiamo avuto per la prima volta questa idea quando ci siamo resi conto che il consumo nullo di ossigeno rappresenta una misura più precisa e accurata della funzione neuronale rispetto alla frazione di estrazione dell'ossigeno. A dimostrare la procedura sarà Lynn, insieme ad Angela Ollio e Catherine Hagen, membri del nostro gruppo di studio. Tutte le seguenti dimostrazioni sono state filmate nell'unità di terapia intensiva neonatale del Brigham and Women Hospital con il prezioso aiuto del personale del reparto di terapia intensiva neonatale.Queste registrazioni sono approvate dal comitato etico Partners Healthcare IRB. La spettroscopia nel dominio della frequenza, la spettroscopia nel vicino infrarosso e la spettroscopia di correlazione diffusa costituiscono un sistema personalizzato nel dominio della frequenza prodotto da ISS Incorporated, composto da due set identici di otto diodi laser che emettono a otto lunghezze d'onda comprese tra 660 e 830 nanometri, due rivelatori a fotomoltiplicatore e un dispositivo DCS, che è un sistema realizzato in laboratorio costituito da un laser a stato solido a lunga coerenza a 785 nanometri e quattro rivelatori a fotodiodo a valanga con conteggio dei fotoni. Scegliere la sonda appropriata in base all'età postmenstruale (PMA) del neonato. Ad esempio, utilizzare una sonda ottica con distanze sorgente-rivelatore FD nears di 1,52 e 2,5 centimetri per neonati con PMA inferiore a 37 settimane e la sonda con distanze FD nears di 1,52, 2,5 e tre centimetri per neonati più grandi; questo vale per entrambe le sonde.Le distanze tra sorgente e rivelatore del DCS sono di 1,5 e due centimetri; disinfettare le sonde con una salvietta disinfettante e inserire la sonda e le fibre in un manicotto di plastica in polipropilene monouso per soddisfare gli standard ANSI per l'esposizione cutanea. La luce alla sonda viene attenuata e diffusa su un'ampia area da un disco bianco in teflon al capezzale del letto. Utilizzando un misuratore di potenza, assicurarsi che la potenza del laser alla sonda sia inferiore a 25 milliwatt e usare una carta di visualizzazione a infrarossi per verificare che il diametro del fascio sia superiore a tre millimetri.Aprire l'interfaccia utente di ER e selezionare il file di impostazioni del sensore corrispondente al sensore e al blocco di calibrazione utilizzati per regolare i guadagni del rivelatore. Posizionare delicatamente il sensore su un'area della testa del soggetto priva di capelli e mantenerlo nella stessa posizione senza applicare alcuna pressione. Preferiamo impostare i guadagni nella zona frontale poiché questa regione presenta l'assorbimento più basso ed è quindi la più soggetta a saturazione.Accendere le sorgenti e i rivelatori e regolare la tensione del PMT finché l'ampiezza di uno qualsiasi dei laser sorgente raggiunge 20.000 conteggi. Rimettere la sonda sul blocco di calibrazione e utilizzare filtri neutri di densità, se presenti.La coppia sorgente-rivelatore satura: mantenere fermo il sonda per 16 secondi durante l'esecuzione della procedura di calibrazione. La misurazione di un blocco di calibrazione con proprietà ottiche note consente la stima dei fattori di accoppiamento per ogni coppia sorgente-rivelatore. Dopo la calibrazione, acquisire 16 secondi di dati sul blocco e utilizzare un'interfaccia grafica MATLAB sviluppata in sede per valutare visivamente l'adeguatezza della calibrazione.I coefficienti di assorbimento e di scattering misurati devono corrispondere ai coefficienti effettivi del blocco di calibrazione a tutte le lunghezze d'onda. Ricalibrare se l'adattamento è scadente. Per la preparazione del DCS, aprire l'interfaccia grafica MATLAB per l'acquisizione dati DCS sviluppata in-house e caricare il file delle impostazioni corrispondente alla sonda ottica in uso.Non è prevista alcuna regolazione del guadagno per i rivelatori DCS. Per quanto riguarda il dispositivo FD vicino, se si osservano conteggi bassi, dividere i capelli e riposizionare la sonda per ottenere una migliore rilevazione della luce. Evitare una luminosità eccessiva dell'ambiente per ridurre il rumore di fondo.Oltre al CBFI e al SO2, che verranno acquisiti mediante la FD, sono necessari due parametri sistemici, l'ossigenazione arteriosa e l'emoglobina nel sangue, per calcolare il metabolismo cerebrale dell'ossigeno. Utilizzare un co-ossimetro a impulsi per acquisire questi parametri sistemici applicando un sensore adesivo monouso all'alluce o al piede del neonato; l'SaO2 e l'HbG saranno visualizzati sul monitor entro pochi secondi. Misurare sette posizioni che coprono le aree frontale, temporale e parietale secondo il sistema 10-20 nell'ordine mostrato qui.Iniziare dividendo i capelli del neonato lungo la linea tra sorgente e rivelatore e posizionare la sonda su un'area della testa. Successivamente, accendere i laser e i rivelatori vicini a FD e acquisire i dati per 16 secondi. Poi accendere il laser DCS e i rivelatori e acquisire i dati per 10 secondi.Ripetere le misurazioni FD vicino a DCS fino a tre volte in ciascuna posizione, riposizionando la sonda in un punto leggermente diverso per ogni acquisizione. Questo passaggio serve a minimizzare l'effetto dell'eterogeneità locale, come capelli e vasi superficiali di grandi dimensioni, e a fornire valori rappresentativi di una regione piuttosto che di un singolo punto, per l'analisi dei dati.Aprire uno script MATLAB interno per l'analisi dei dati in post-elaborazione. Questo software non solo stima tutti i parametri emodinamici, ma utilizza anche la ridondanza dei dati per valutare automaticamente la qualità delle misurazioni e limitare i risultati. Calcolare le concentrazioni assolute di HBO e HBR adattando i coefficienti di assorbimento a tutte le lunghezze d'onda, utilizzando i valori letterari dei coefficienti di estinzione dell'HB e una concentrazione del 75% di acqua nei tessuti per ricavare la concentrazione totale di emoglobina e la saturazione dell'emoglobina in ossigeno a partire dalle concentrazioni di HBO e HBR.Stimare il volume ematico cerebrale utilizzando il peso molecolare dell'emoglobina e la densità del tessuto cerebrale. Calcolare l'indice di flusso ematico o CBFI adattando le funzioni di autocorrelazione temporale misurate all'equazione di correlazione della diffusione. Infine, calcolare l'indice di consumo cerebrale di ossigeno utilizzando la misura FD di SO₂ e la misura DCS di CBFI con l'equazione seguente.Come mostrato qui, uno studio trasversale su oltre 50 neonati sani ha rivelato che, mentre il CBV raddoppia più che nel primo anno di vita, la SO due rimane costante. Uno studio su 70 neonati sani ha inoltre dimostrato che il C-B-V-C-B-F-I e il CMR O2 I sono più elevati nelle regioni temporali e parietali rispetto alla regione frontale, risultato coerente con i dati di captazione del glucosio ottenuti con PET. In entrambi i nostri studi, la costanza della SO due indica che la fornitura di ossigeno corrisponde strettamente al consumo locale, mentre il C-B-V-C-B-F e il CM O2 sono più strettamente associati allo sviluppo neuronale.Per verificare che il consumo cerebrale di O₂ (CMRO₂) sia uno strumento di screening migliore rispetto alla saturazione cerebrale di O₂ (SO₂) nel rilevare lesioni cerebrali neonatali, studi condotti su neonati con lesioni cerebrali dimostrano che la SO₂ non risulta significativamente alterata dalla lesione cerebrale sia nelle fasi precoci che croniche, mentre il CMRO₂ risulta significativamente diverso rispetto ai valori normali sia nelle fasi acute che croniche. Questo permette di verificare che la terapia ipotermica riduca i danni successivi a un insulto ipossico riducendo il metabolismo cerebrale.Abbiamo misurato 10 neonati durante la terapia e li abbiamo confrontati con controlli normali. Come mostrato qui, il CMR O2 I dei neonati trattati con ipotermia terapeutica diminuisce significativamente a livelli al di sotto della norma. Questi risultati preliminari suggeriscono che il metodo FD nears DCS potrebbe essere in grado di guidare e ottimizzare la terapia ipotermica una volta padroneggiato.Questa tecnica può essere eseguita in modo efficiente al letto del paziente senza disturbare il neonato. Per garantire una qualità ottimale dei dati, è importante mantenere un buon contatto tra la sonda e la testa del neonato durante l'acquisizione. Dopo aver visto questo video, si dovrebbe avere una buona comprensione di come effettuare misurazioni del metabolismo cerebrale e dell'emodinamica nei neonati.

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