Name: Giugno 2012: Questo mese in JOVE (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-06-01T13:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 50 s
Description: Scopri metodi innovativi per la preparazione di innesti corneali in oftalmologia. Questa ricerca di gruppi italiani e del Michigan migliora i risultati dei trapianti e aumenta la disponibilità di tessuti per pazienti con lesioni corneali.

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<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3709">Ibridazione in situ di ghiandole salivari, ovaie ed embrioni di zanzare vettrici</a></h2>
Jennifer Juhn1, Anthony A. James2, 1 1Dipartimento di Biologia Molecolare e Biochimica, Università della California, Irvine , 2Dipartimento di Microbiologia e Genetica Molecolare, Università della California, Irvine 
Le analisi dell'espressione genica temporale e spaziale hanno un ruolo cruciale nella genomica funzionale. L'ibridazione in situ a montaggio intero è utile per determinare la localizzazione dei trascritti all'interno dei tessuti e dei compartimenti subcellulari. Qui descriviamo un protocollo di ibridazione in situ con modifiche per specifici tessuti bersaglio nelle zanzare.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3763">Studio del checkpoint mitotico illustrando il comportamento dinamico della proteina cinetocora e il movimento cromosomico negli embrioni sinciziali viventi di Drosophila</a></h2>
Maureen Sinclair1, Jun-Yong Huang2, 1 1Institute for Cell and Molecular Biosciences, Università di Newcastle, Regno Unito, 2Institute for Cell and Molecular Biosciences, Università di Newcastle
Il cinetocore è il luogo in cui il SAC inizia il suo segnale monitorando la segregazione mitotica dei cromatidi fratelli. Viene descritto un metodo per visualizzare il reclutamento e il turnover di una delle proteine cinetocore e la sua coordinazione con il movimento cromosomico negli embrioni di Drosophila utilizzando un sistema confocale a scansione laser Leica.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3765">Una tecnica semplificata per l'escissione in situ della cornea e l'eviscerazione del tessuto retinico dal globo oculare umano</a></h2>
Mohit Parekh1, Stefano Ferrari1, Enzo Di Iorio1, Vanessa Barbaro1, Davide Camposampiero1, Marianthi Karali2, Diego Ponzin1, Gianni Salvalaio3, 1 1Fondazione Banca Degli Occhi del Veneto O.N.L.U.S. , 2Telethon Institute for Genetics & Medicine (T.I.G.E.M.), 3Fondazione Banca Degli Occhi del Veneto, O.N.L.U.S.
L'articolo descrive una tecnica semplificata per asportare la cornea e per eviscerare i tessuti retinici dal globo oculare di donatori cadaverici umani. La tecnica qui descritta aiuterà a asportare tessuti di buona qualità da utilizzare per trapianti, scopi chirurgici o di ricerca senza danneggiare altri tessuti del globo oculare.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3813">Differenziazione efficiente di cellule staminali embrionali di topo in motoneuroni</a></h2>
Chia-Yen Wu1, Dosh Whye2, 1, Robert W. Mason1, Wenlan Wang1 1Nemours Biomedical Research, Alfred I. duPont Hospital for Children, 2Dipartimento di Pediatria, Columbia University Medical Center
Abbiamo sviluppato un nuovo protocollo per migliorare l'efficienza della differenziazione in vitro di cellule staminali embrionali di topo in motoneuroni. Le cellule ES differenziate hanno acquisito le caratteristiche dei motoneuroni, come evidenziato dall'espressione di marcatori neuronali e motoneuronali utilizzando tecniche immunoistochimiche.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3847">Preparazione del tessuto corneale del donatore per la cheratoplastica endoteliale</a></h2>
Maria A. Woodward1, Michael Titus2, Kyle Mavin2, Roni M. Shtein1 1Dipartimento di Oftalmologia, Università del Michigan, 2MidWest Eye Banks
Il trapianto endoteliale di cornea è una tecnica chirurgica per il trattamento delle malattie corneali posteriori. La dissezione meccanica del microcheratomo per preparare il tessuto si traduce in innesti più sottili e simmetrici con una minore perdita di cellule endoteliali e risultati migliori. Le dissezioni possono essere eseguite presso la banca degli occhi prima dell'intervento chirurgico di trapianto di cornea.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3958">Microfluidica endotelializzata per lo studio delle interazioni microvascolari nelle malattie ematologiche</a></h2>
David R. Myers1, 2, 3, 4,*, Yumiko Sakurai1, 2, 3, 4,*, Reginald Tran1, 2, 3, 4, Byungwook Ahn1, 2, 3, 4, Elaissa Trybus Hardy1, 2, 3, 4, Robert Mannino1, 2, 3, 4, Ashley Kita1, 2, 3, 4, Michelle Tsai1, 2, 3, 4, Wilbur A. Lam1, 2, 3, 4 1Dipartimento di Pediatria, Emory University School of Medicine, 2Wallace H. Coulter Dipartimento di Ingegneria Biomedica, Georgia Institute of Technology e Emory University, 3Aflac Cancer Center e Blood Disorders Service of Children's Healthcare di Atlanta , 4Winship Cancer Institute della Emory University * Questi autori hanno contribuito in egual misura
Viene descritto un metodo per coltivare un monostrato di cellule endoteliali su tutta la superficie 3D interna di un dispositivo microfluidico con canali di dimensioni microvascolari (<30 μm). Questo modello di microvascolarizzazione in vitro consente lo studio delle interazioni biofisiche tra cellule del sangue, cellule endoteliali e fattori solubili nelle malattie ematologiche.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3993">Registrazione di segnali elettrocorticografici umani (ECoG) per la ricerca neuroscientifica e la mappatura corticale funzionale in tempo reale</a></h2>
N. Jeremy Hill1, Disha Gupta2, 1, Peter Brunner2, 1, Aysegul Gunduz2, 1, Matthew A. Adamo3, Anthony Ritaccio2, Gerwin Schalk1, 2, 4, 5, 6, 7 1Wadsworth Center, Dipartimento della Salute dello Stato di New York, 2Dipartimento di Neurologia, Albany Medical College, 3Dipartimento di Neurochirurgia, Albany Medical College, 4Dipartimento di Neurochirurgia, Washington University, 5Dipartimento di Biomedicina. Ing., Rensselaer Polytechnic Institute, 6Dipartimento di Biomedicina. Sci., UNIVERSITÀ STATALE DI NEW YORK AD ALBANY, 7Dipartimento di Elettronica e Comp. Ing., Università del Texas a El Paso 
Presentiamo un metodo per raccogliere segnali elettrocorticografici a scopo di ricerca da esseri umani sottoposti a monitoraggio invasivo dell'epilessia. Mostriamo come utilizzare la piattaforma software BCI2000 per la raccolta dei dati, l'elaborazione dei segnali e la presentazione degli stimoli. In particolare, dimostriamo SIGFRIED, uno strumento basato su BCI2000 per la mappatura funzionale del cervello in tempo reale.

Non ci sono conflitti di interesse dichiarati.

giugno 2012: questo mese in jove

June 2012: This Month in JoVE

Nel 1905, in quella che oggi è la Repubblica Ceca, Eduard Zirm eseguì il primo intervento chirurgico di trapianto di cornea (cheratoplastica), che restituì la vista a un paziente cieco da una lesione corneale. Oggi, le banche degli occhi di tutto il mondo preparano, conservano e distribuiscono le cornee donate agli ospedali in modo che ogni anno possano essere eseguite migliaia di cheratoplastiche salvavista. Nel giugno 2012, JoVE ha messo gli occhi su due gruppi di ricerca, uno italiano e l'altro del Michigan, che dimostrano due metodi distinti per la preparazione del trapianto di cornea prima del trapianto.
I nostri autori dall'Italia ci mostrano la loro tecnica per asportare la cornea dal globo oculare, che prevede prima di immergerla in una serie di soluzioni sterilizzanti preparandola per la manipolazione sterile, creando un'incisione sulla superficie sclerale, e infine separando il bordo corneale-sclerale dal globo. Una volta rimossa la cornea, viene controllata la densità e la vitalità delle cellule endoteliali e viene preparata per la conservazione a lungo termine, durante la quale il terreno viene periodicamente testato ad alto rendimento con altri innesti depositati presso la banca degli occhi.
Negli interventi chirurgici di trapianto di cornea, gli innesti a tutto spessore vengono utilizzati in una procedura chiamata cheratoplastica penetrante; tuttavia, JoVE apprende che in alcune cornee malate, solo lo strato endoteliale è interessato. I nostri autori dell'Università del Michigan e della Midwest Eye Bank dimostrano un'ulteriore elaborazione delle cornee dei donatori con la cheratoplastica endoteliale automatizzata stripping (DSAEK) di Descemet, una procedura che prevede l'innesto solo dello strato endoteliale corneale. Questa procedura relativamente recente è resa possibile dall'uso di un microcheratomo, un dispositivo in grado di tagliare con precisione la cornea in modo che lo strato endoteliale possa essere separato per il trapianto. L'uniformità e la qualità del tessuto donatore vengono verificate utilizzando una lampada a fessura e la microscopia speculare e l'innesto viene conservato per la chirurgia del trapianto di cornea.
Insieme, due gruppi di autori, provenienti da diversi continenti, hanno documentato i passaggi per rimuovere l'intera cornea dall'occhio e isolare lo strato posteriore per la cheratoplastica endoteliale - un processo che riduce il rischio di infezione o rigetto del trapianto e migliora la capacità di vedere di un paziente.
In JoVE Neuroscience, un team multidisciplinare di medici e scienziati introduce nuove applicazioni di ricerca dell'elettrocorticografia (ECoG). L'ECoG è una procedura invasiva che utilizza elettrodi a striscia e a griglia posizionati direttamente sul cervello per localizzare i focolai di crisi epilettici nei pazienti con epilessia. Questa procedura può essere utilizzata anche per mappare le regioni corticali che devono essere risparmiate durante la chirurgia resettiva. La mappatura corticale si ottiene monitorando se la stimolazione di un determinato elettrodo provoca l'interruzione del movimento o del linguaggio. I pazienti sono in genere sottoposti a monitoraggio intracranico per localizzare i focolai convulsivi per circa una settimana, e questa durata offre una finestra unica di opportunità per i ricercatori di studiare il cervello umano in azione con l'ECoG, che ha migliori proprietà segnale-rumore e meno suscettibilità alla registrazione di artefatti rispetto all'elettroencefalografia non invasiva (EEG).
Dopo aver determinato l'attività di base a riposo, i nostri autori registrano l'attività cerebrale nell'intervallo di frequenza gamma alta, durante semplici compiti cognitivi o motori. Quindi, questi ricercatori dimostrano come utilizzare il sistema software SIGFRIED per eseguire una mappatura funzionale rapida e in tempo reale basata su segnali ECoG, che vengono ulteriormente analizzati per fornire informazioni riguardanti le regioni cerebrali associate a particolari compiti.
In Bioingegneria, JoVE incontra un team di scienziati che dimostrano che la microvascolarizzazione può essere ricreata approssimativamente su un chip. Questo "chip" è in realtà un dispositivo con canali microfluidici rivestiti con cellule endoteliali. La fotolitografia SU-8 viene utilizzata per incidere il modello di canale su un wafer di silicio, che funge da stampo per PDMS. Una volta che il dispositivo è stato fabbricato, viene seminato con cellule endoteliali, che vengono coltivate nei canali. Grazie alla trasparenza del PDMS, le cellule possono essere visualizzate al microscopio. Questo modello in vitro della microvascolarizzazione fornisce un microambiente controllato che può essere utilizzato per studiare i normali processi emodinamici e nella malattia ematologica.
Questo breve riassunto è solo un assaggio di alcuni dei contenuti di JoVE per il mese di giugno. Ulteriori indagini potrebbero portare a metodi per l'ibridazione in situ del tessuto e dell'embrione di zanzara adulta, alla visualizzazione della mitosi in drosofila e alla differenziazione delle cellule staminali embrionali in motoneuroni. Restate sintonizzati.

Giugno 2012: Questo mese in JOVE

Back in 1905, in what is now the Czech Republic, Eduard Zirm performed the first corneal transplantation surgery (keratoplasty), which restored vision to ...

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Wendy Chao

Aaron Kolski-Andreaco

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