3 ottobre 2016
Sebbene i ricercatori siano generalmente informati sulle procedure e le precauzioni di sicurezza richieste per gli esperimenti di biosicurezza di livello 1 o 2 (BSL-1/2), potrebbero non avere familiarità con le procedure sperimentali nei laboratori con tuta BSL-4. Questo articolo fornisce una dimostrazione visiva dettagliata del controllo dei sistemi di laboratorio della tuta BSL-4, delle procedure di ingresso, movimento e uscita dal laboratorio.
L'obiettivo generale di questa procedura è dimostrare come indossare e rimuovere correttamente una tuta a pressione positiva e come entrare e uscire da un laboratorio di livello di biosicurezza 4 per tute. Per il personale nuovo alla ricerca in contenimento elevato, questa procedura illustra i passaggi necessari per indossare una tuta a pressione positiva ed entrare in un laboratorio BSL-4 per tute. Grazie a questa tecnica, la sicurezza del personale presso l'Integrated Research Facility del NIH di Fort Detrick è garantita ispezionando adeguatamente l'equipaggiamento di protezione individuale e decontaminando in modo appropriato la tuta.
La procedura sarà dimostrata da Ricky Adams, un tecnico della Integrated Research Facility del NIH presso il Fort Detrick. Registrare il nome della persona, l'ora di ingresso, la posizione del laboratorio e i patogeni in studio nel registro di ingresso/uscita del personale. Indicare la posizione del laboratorio e verificare che l'accesso ai laboratori sia stato autorizzato.
Per assicurarsi che la pressione nella stanza del laboratorio rientri nei valori prefissati di pressione negativa che garantiscono un corretto flusso d'aria direzionale, consultare il modulo di controllo sistemi completato. Prelevare camici, calze e asciugamani dalla stanza di stoccaggio contenente le forniture della struttura, situata vicino al registro di ingresso/uscita del personale. Dopo aver superato i punti di controllo d'accesso di sicurezza per accedere alla stanza esterna di cambio, rimuovere i vestiti di uso quotidiano, gli indumenti intimi, i gioielli e gli orologi.
Indossare il camice e procedere nella stanza delle tute. Selezionare una tuta protettiva a pressione positiva e ispezionare visivamente la tuta alla ricerca di fori, strappi, punti di perforazione, aperture nelle cuciture o punti deboli. Ispezionare attentamente i guanti esterni della tuta, poiché i guanti sono gli elementi più soggetti a danni.
Cambiare i guanti almeno ogni sette giorni solari o se si riscontra un danneggiamento dei guanti. Per sostituire i guanti esterni della tuta in questo modello, rimuovere il nastro adesivo dal guanto esistente, arrotolare l'anello di tenuta sulla manica ed eliminare il vecchio guanto. Indossare un nuovo guanto sul polsino della tuta assicurandosi che copra interamente il polsino e che il pollice sia nella posizione corretta.
Posizionare la guarnizione ad anello sopra il guanto, inserirla nella scanalatura del polsino e utilizzare del nastro adesivo robusto per fissare il guanto esterno della tuta. Ripiegare il bordo del guanto sul nastro adesivo e sulla guarnizione ad anello, sigillare il guanto con un ultimo pezzo di nastro adesivo e ispezionare nuovamente il guanto appena fissato. Applicare uno strato sottile di lubrificante per cerniere sulla cerniera almeno una volta alla settimana.
Successivamente, coprire ciascuna delle valvole di scarico all'interno della tuta con del nastro adesivo rinforzato o con un tappo di prova in alluminio, quindi chiudere la cerniera della tuta. Collegare l'attacco rapido di connessione all'estremità di ciascuna linea respiratoria al raccordo del tubo sulla tuta. Gonfiare la tuta fino a quando braccia e gambe risultano rigide, quindi posizionarla in posizione verticale.
Scollegare l'alimentazione d'aria. Non sovrapressurizzare la tuta, poiché una pressione eccessiva può causare gravi danni alla tuta stessa. Ispezionare accuratamente la tuta alla ricerca di eventuali segni di perdita d'aria per circa cinque minuti e verificare la presenza di segni di sgonfiamento.
Se la tuta perde rigidità, verificare la presenza di perdite gonfiando nuovamente la tuta. Ascoltare e cercare eventuali perdite che potrebbero verificarsi lungo le cuciture della tuta, la cerniera e il giunto tra la visiera e la tuta. Se necessario, spruzzare sulla tuta una soluzione saponata per aiutare a individuare il punto della perdita.
Controllare la formazione di bolle che indicano una perdita, prestando particolare attenzione alle cuciture della visiera. Verificare che le valvole di scarico siano completamente sigillate. Aprire la cerniera della tuta ed eliminare i coperchi dalle valvole di scarico.
Il mancato smontaggio dei coperchi di scarico impedirà l'uscita dell'aria e danneggerà gravemente la tuta. Registrare le informazioni relative ai test e alle riparazioni nel registro di controllo dell'integrità della tuta a pressione positiva. Successivamente, fissare con del nastro i calzini alle gambe degli indumenti monouso.
Indossare guanti in nitrile interni e fissarli con nastro adesivo ai polsini degli abiti monouso. Indossare una seconda paia di guanti in nitrile sopra i guanti interni. Se necessario, pulire la visiera interna con detergente per vetri per una migliore visibilità.
Indossare la tuta a pressione positiva, chiudere completamente la cerniera e collegare la linea d'aria per la respirazione. Prima dell'ingresso nel laboratorio BSL-4, verificare che il sistema di automazione dell'edificio indichi una pressione normale nella zona. Per entrare nei laboratori BSL-4 dotati di tuta, scollegarsi dalla linea d'aria nella stanza delle mute, quindi premere il pulsante di richiesta accesso alla stanza della doccia chimica.
Per attraversare la stanza della doccia chimica, chiudere la porta resistente alla pressione dell'aria, o porta APR, verso la stanza delle tute e attendere che la guarnizione sigilli completamente il telaio della porta. Attivare la seconda porta APR, che conduce al laboratorio. Entrare nel laboratorio BSL-4 e collegare la tuta a una linea di alimentazione dell'aria respirabile.
Chiudere la porta dell'APR che conduce al laboratorio. Assicurarsi che la doccia chimica si attivi automaticamente. Al termine del ciclo di doccia, la porta dell'APR può essere nuovamente aperta dalla stanza delle tute.
Spostarsi liberamente all'interno del laboratorio modificando le connessioni alle tubazioni dell'aria compressa. Mantenere la connessione alla tubazione dell'aria compressa per il maggior tempo possibile, anche quando ci si piega in avanti. Osservare i vari allarmi dei monitor e lo stato attuale del sistema.
Per uscire dal laboratorio della suite BSL-4, disinfettare le mani guantate e i polsini con un detergente disinfettante in contenitori di plastica appositi. Se non è presente un contenitore, spruzzare abbondantemente le mani guantate con disinfettante. Scollegarsi dalla linea d'aria respiratoria e procedere verso la doccia chimica.
Entra nella doccia chimica premendo il pulsante di richiesta di accesso per aprire la porta APR dal laboratorio e chiudere la porta. Ricollega la tuta a una linea d'aria respirabile all'interno della doccia. Una volta chiusa la porta APR, il ciclo della doccia chimica dovrebbe avviarsi automaticamente.
Verificare la presenza di perdite nei guanti e nelle scarpe immergendo mani inguantate e piedi nel contenitore di plastica contenente la soluzione detergente disinfettante conservata all'interno della doccia chimica. Controllare la presenza di strappi, lacerazioni o punti deboli sul guanto esterno e cercare tracce di liquido intrappolato sotto il guanto esterno. Se si riscontra una perdita, attendere il completamento del ciclo della doccia, rimuovere il guanto esterno della tuta e lasciarlo nel contenitore di plastica.
Strofinare la tuta e gli stivali integrati nella tuta con una spazzola a lungo manico o a mano per distribuire il disinfettante chimico sulla tuta. Sciacquare accuratamente la tuta dal detergente disinfettante durante il ciclo d'acqua della doccia. Scollegare la tubazione dell'aria respirabile, disinfettare e sciacquare il collegamento sulla tuta durante i cicli chimico e acqua della doccia.
Al termine, aprire la porta dell'APR che conduce alla stanza delle tute e chiuderla dopo essere usciti. Asciugare l'esterno della tuta con un grande asciugamano. Sfilare la cerniera della tuta a pressione positiva.
Rimuovere una mano dal guanto esterno della tuta ed esaminare attentamente l'esterno del guanto in nitrile per verificare la presenza di umidità. Rimuovere l'altra mano e ripetere il controllo. Rimuovere la tuta, appenderla e continuare ad asciugare l'esterno della tuta per prevenire danni da marciume secco.
Spruzzare l'interno dello schermo facciale con detergente per vetri e asciugare. Dopo aver appeso la tuta ad asciugare, rimuovere il nastro adesivo e i guanti in nitrile interni dal camice e smaltire questi materiali nel cestino per rifiuti biologici. Procedere nella stanza degli spogliatoi, togliere il camice e i calzini, quindi entrare nella doccia personale.
Dopo la doccia personale, registrare l'orario di uscita e l'uscita del personale sul registro di ingresso e indicare l'uscita dal laboratorio sulla bacheca di localizzazione. Il personale è stato accuratamente e completamente addestrato su queste tecniche per garantire pratiche sicure e coerenti all'interno di un impianto di livello di sicurezza biologica quattro. Verificando che l'impianto funzioni correttamente, come indicato nel modulo di controllo giornaliero, tutti i controlli amministrativi e ingegneristici necessari sono stati attuati per mantenere un ambiente sicuro.
La tuta a pressione positiva fornisce uno strato aggiuntivo di protezione per il membro del personale. Una corretta manutenzione e l'uso appropriato di queste tute sono essenziali per garantire tale protezione. L'adesione rigorosa a queste procedure e pratiche, insieme all'uso corretto dei dispositivi di controllo ingegneristico, contribuisce a prevenire infezioni acquisite in laboratorio e a garantire il contenimento di materiali infettivi.
L'Integrated Research Facility del NIH NIAID presso Fort Detrick non ha registrato fino ad oggi alcuna infezione da laboratorio segnalata. Dopo aver visto questo video, si dovrebbe avere una buona comprensione di come indossare e rimuovere una tuta a pressione positiva ed entrare e uscire da un laboratorio di livello di biosicurezza quattro con tuta. Queste procedure illustrano quelle generalmente adottate presso l'IRF e potrebbero non essere rappresentative delle procedure in uso in altri laboratori BSL-4.
Quando si lavora in altri laboratori di biosicurezza di livello quattro, è necessario rispettare il protocollo specifico di tale laboratorio.
Questo articolo fornisce una dimostrazione visiva dettagliata delle procedure per entrare e uscire da un laboratorio con tuta a Livello di BioSicurezza 4 (BSL-4). Illustra i passaggi necessari per indossare e rimuovere una tuta a pressione positiva, garantendo la sicurezza del personale durante la ricerca in condizioni di massima contenzione.
Le procedure di laboratorio con tuta BSL-4 sono fondamentali per consentire ricerche sicure su agenti patogeni ad alto rischio per i quali non esistono misure profilattiche o trattamenti disponibili. Questi protocolli supportano la validazione degli obiettivi e la riduzione dei rischi meccanicistici, garantendo la sicurezza del personale durante gli studi sulle malattie infettive. L'adesione a procedure standardizzate di ingresso e uscita mantiene l'integrità del contenimento e riduce i rischi operativi nei flussi di lavoro della fase iniziale della scoperta.
Il processo del laboratorio con tuta BSL-4 si integra nel percorso della scoperta consentendo la manipolazione sicura di agenti patogeni durante le fasi di verifica delle ipotesi e di identificazione dei candidati promettenti.