Name: Misure di sicurezza e procedure operative in un (A) BSL-4 di laboratorio: 4. procedure di imaging medico (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-10-03T11:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 36 s
Description: Impara le procedure di imaging medico sicuro in laboratorio ABSL-4 utilizzando tomografia computerizzata su cavie infette. Questo metodo consente di valutare la progressione patologica in modo non invasivo e identificare biomarcatori utili per terapie e vaccini.

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Il contenuto di questa pubblicazione non riflette necessariamente le opinioni o le politiche del Dipartimento della Salute e dei Servizi Umani degli Stati Uniti (DHHS) o delle istituzioni e delle aziende affiliate agli autori. Questo lavoro è stato finanziato in parte attraverso il contratto principale del Battelle Memorial Institute con il National Institute of Allergy and Infectious Diseases (NIAID) degli Stati Uniti nell'ambito del contratto n. HHSN272200700016I. M.R.H., K.J., D.P., L.B. e J.W. hanno svolto questo lavoro come dipendenti del Battelle Memorial Institute. I subappaltatori del Battelle Memorial Institute che hanno svolto questo lavoro sono: R.B., un dipendente di Charles River Laboratories - Insourcing Solutions; L.K. e M.R.L., dipendenti di MEDRelief Staffing Inc.; M.G.L. come dipendente del Lovelace Respiratory Research Institute, Inc.; e J.H.K. come dipendente di Tunnell Government Services, Inc.

Questo protocollo aderisce alle seguenti linee guida per la cura degli animali. Gli animali sono stati alloggiati in una struttura accreditata dall&#39;Associazione per la valutazione e l&#39;accreditamento degli animali da laboratorio Care International. Tutte le procedure sperimentali sono state approvate dal National Institute of Allergy e Malattie infettive, Divisione di Ricerca Clinica, cura degli animali e del Comitato Usa ed erano in conformità con le normative Animal Welfare Act, la politica Public Health Service, e la Guida per la cura e l&#39;uso di animali da laboratorio raccomandazioni. 1. Preparare la TAC (il &quot;Cold Side&quot;) <ol><li> Condizionare la tubo a raggi X <ol><li> Verificare che nessun membro del personale è nella sala di scansione e la tabella soggetto è vuota. </li><li> Eseguire la procedura di tubo di condizionamento in conformità con le specifiche del produttore dello scanner. </li></ol></li><li> Eseguire Air Calibration <ol><li> Assicurarsi che nessun oggetto sono nel campo di scansione. </li&gt; <li> Eseguire la procedura di calibrazione in aria in conformità con le specifiche del produttore dello scanner. Su molte piattaforme, questa calibrazione è automatica o semi-automatica. </li></ol></li><li> Esecuzione del controllo di qualità di scansione (su &quot;Hot Side&quot;) <ol><li> Completare le procedure di ingresso di laboratorio ABSL-4 suit (descritto in dettaglio in riferimento 5) con l&#39;aggiunta di un ulteriore passaggio. Se le procedure comportano l&#39;esposizione a materiali radioattivi, clip di un dosimetro per gli scrub sotto la tuta protettiva. Ruotare nella dosimetro ogni 2 mesi per il calcolo della esposizione alle radiazioni. </li><li> Posizionare la testa e il corpo phantom CT, che è fatto di aria, acqua e Teflon, nel supporto appropriato nella tabella di scansione. </li></ol></li><li> Esecuzione del controllo di qualità di scansione (in &quot;Cold Side&quot;) <ol><li> Dal lato freddo, far avanzare il fantasma al centro del foro 6. </li><li> Acquisire una scansione utilizzando il controllo di laboratorio di qualità standardizzato parametri (QC) per l&#39;enteure lo scanner sia conforme alle specifiche del costruttore. </li><li> Eseguire l&#39;analisi computerizzata di controllo di qualità delle immagini per calcolare le deviazioni media e degli standard di intensità del segnale all&#39;interno delle regioni di interesse centrato su ogni tipo di materiale (aria, acqua o Teflon) secondo il protocollo del produttore. </li><li> Notifica personale CM che lo scanner TC è pronto per l&#39;uso. </li><li> Verificare le informazioni degli animali (numero di identificazione, il peso, data di nascita) con il personale CM. </li></ol></li><li> Registrati Soggetto informazioni nel database del paziente. <ol><li> Alla console scanner TC (sul lato &quot;freddo&quot;), accedere Radiology Information System dello scanner (RIS). Controllare che il RIS è popolata con i dettagli del programma di scansione. </li><li> Selezionare il soggetto e la demografia, come il numero di identificazione, età, data di nascita, e la data esame in corso; poi, il tipo di esame dovrebbe compilare automaticamente. </li><li> Immettere manualmente peso soggetto. </li><li> Seleziona corretta suorientamento bject in CT portale (ad esempio, la testa prima, i piedi prima, prona, supina). </li></ol></li></ol> 2. Preparare Aree lavoro in laboratorio vestito ABSL-4 <ol><li> Preparare la classe II biosicurezza Cabinet (BSC) o Downdraft tabella nella Procedura camera animali. Accendere BSC (o Downdraft tabella) almeno 10 minuti prima dell&#39;uso. <ol><li> soluzione disinfettante Pulire e disinfettare superfici interne della BSC o la superficie superiore della tabella cappa utilizzando un disinfettante approvato come 5% dual ammonio quaternario (cloruro di ammonio cloruro di ammonio dimetil benzil n-alchil-, n-alchil dimetil benzil etile). Spruzzare superfici interne del BSC o la superficie superiore della tabella cappa e pulire superfici asciutte dopo 10 min di tempo di contatto. Spruzzare e pulire le superfici con il 70% di etanolo per rimuovere disinfettante residuo. </li><li> usate Inserire e forniture necessarie nella tabella BSC o downdraft, compresi i guanti di manipolazione della scatola di induzione dell&#39;anestesia e animali. </li></<html> ol&gt; </li><li> Preparare il letto la TAC. <ol><li> Set-up del dispositivo animale tenuta sul letto CT. </li><li> Set-up i segni vitali monitoraggio per rilevare la frequenza cardiaca e la saturazione di ossigeno. Se sessione di scansione è più lungo di 10 min, monitoraggio della temperatura. </li></ol></li><li> Preparare la macchina di anestesia. <ol><li> Controllare il volume isoflurano nel vaporizzatore e aggiungere più isoflurano, se necessario. </li><li> Eseguire un test di tenuta dalla pressione il circuito di respirazione anestetico con l&#39;ossigeno, il controllo per il gas sfuggito, e ispezionare visivamente la macchina anestesia per perdite 1. <ol><li> Se viene rilevata una perdita, determinare l&#39;origine, correggere il problema, ed eseguire una prova di tenuta di follow-up per verificare le correzioni sono state applicate correttamente. </li></ol></li><li> Pesare il contenitore di lavaggio e getta in grado di catturare gas anestetico rifiuti. Se il filtro è ≥50 g il peso iniziale del filtro, sostituire contenitore 7. </li></ol></li></ol>title &quot;&gt; 3. trasporto degli animali da Animal Camera procedura e preparazione di Anestesia induzione in CT Scanner camera (su&quot; Hot Side &quot;) <ol><li> Trasferire la gabbia di alloggiamento della Guinea Pig da uno dei roditori della tenuta locali attigui alla Imaging Suite nella BSC Classe II. <ol><li> Verificare l&#39;ID animale. </li><li> Rimuovere la scheda gabbia e tenere con l&#39;animale. </li></ol></li><li> Aprire il coperchio alla gabbia e indossare guanti di pelle animale protettivo sopra i guanti tuta positivo pressione. Delicatamente raccogliere la cavia, animale inserire nella casella di induzione dell&#39;anestesia, e coprire il contenitore con il coperchio. </li><li> Rimuovere la scatola di induzione dell&#39;anestesia contenente l&#39;animale dal BSC Classe II e posizionarlo su un carrello di trasporto. </li><li> Usando il carro, prendere l&#39;animale alla sala CT scanner. </li><li> Nella sala CT scanner, collegare immediatamente il contenitore di lavaggio e la macchina di anestesia alla casella di induzione. Accendere il gas ossigeno per la casella di induzione e impostare il vaporizzatore a DelivER 4% isoflurano per l&#39;induzione dell&#39;anestesia iniziale di 8. </li><li> Monitorare l&#39;animale durante l&#39;induzione dell&#39;anestesia per un&#39;adeguata profondità dell&#39;anestesia (ad esempio, non risponde agli stimoli esterni, tono muscolare, respiratorio stabile e frequenza cardiaca) 8. </li><li> Spegnere l&#39;anestesia per la casella di induzione quando la cavia è completamente anestetizzato. </li></ol> 4. Disporre Soggetto on Imaging Letto in scanner CT (il &quot;lato caldo&quot;) <ol><li> Rimuovere il anestetizzati Guinea Pig dal Box di induzione e posto su Imaging letto. <ol><li> Posizionare la cavia sul cuscino tenuta in posizione prona. </li><li> Applicare una pomata oftalmica in entrambi gli occhi per proteggere l&#39;epitelio corneale si secchi. </li></ol></li><li> Somministrare Manutenzione isoflurano anestesia. <ol><li> Posizionare il cono di naso sulla cavia e accendere il gas per fornire 1 L / min di ossigeno al cono 8. </li><li> Impostare il vaporizzatore per fornire il 2-3% dellaisoflurano per la cavia attraverso il cono di naso. </li><li> Una volta che il soggetto ha raggiunto il piano desiderato di anestesia (nessun movimento, ~ 60 respiri al minuto), ridurre l&#39;impostazione di consegnare 1,0-1,5% di isoflurano per il mantenimento dell&#39;anestesia vaporizzatore. </li><li> Monitorare i segni vitali, tra cui la temperatura corporea, la frequenza cardiaca e la frequenza respiratoria. Se la frequenza respiratoria inizia ad accelerare o rallentare, aumentare o diminuire la percentuale di isoflurano rispettivamente 9. </li></ol></li><li> Fornire un&#39;ulteriore fonte di calore per mantenere la temperatura corporea cavia tra 37 e 39 ° C, se necessario, a seconda della durata prevista di acquisizione dati e profondità dell&#39;anestesia mantenuto 8,9. </li><li> Fissare un coperchio di plastica sopra la parte superiore del cuscino azienda. </li><li> Advance letto di imaging nel tubo di contenimento. </li></ol> 5. Impostazione della Campo visivo <ol><li> Attivare il sistema laser (il personale di imaging) sul &quot;lato freddo&quot; della sc CTAnner spazio per posizionare la cavia per la scansione CT. Utilizzare la tabella &quot;a&quot; pulsanti e &quot;out&quot; per coprire l&#39;anatomia di interesse sotto il mirino laser. </li><li> Per impostare il campo di vista, utilizzare il pulsante del laser per impostare il punto di partenza sopra l&#39;anatomia di interesse. </li><li> il personale di contatto CM sul &quot;lato caldo&quot; per posizionare uno scudo di piombo tra di loro e lo scanner CT. </li></ol> 6. Immagini Acquisire <ol><li> Acquisire scansione sondaggio per il posizionamento fetta di immagini dello studio TC secondo il protocollo del produttore. </li><li> Prescrivere posizionamento fetta di immagini dello studio TC sulle immagini di indagine. </li><li> Coordinare con personale &quot;hot-side&quot;, se l&#39;iniezione di contrasto deve essere utilizzato. </li><li> Acquisire scansione studio secondo il protocollo del produttore. </li><li> Ricostruire immagini TC nella console dello scanner secondo il protocollo del produttore. </li><li> Invia le immagini ad un picture archiving and communication system. Eseguire ulteriormente qualitativa e quantitative analizza da questo sistema di archiviazione secondo il protocollo del produttore. </li></ol> Recupero 7. Post-scan <ol><li> Trasferire cavia da letto dello scanner a una gabbia microisolator pulito con cibo e tratta. </li><li> Usando il carro, trasportare la gabbia con l&#39;animale torna alla sua area abitativa. </li><li> Monitorare l&#39;animale fino alla completa guarigione dall&#39;anestesia. </li><li> Una volta pienamente recuperato, riportare la gabbia per l&#39;high-efficiency particulate air (HEPA) -filtered rack ventilati. </li></ol> 8. Disinfezione di scanner Bay e attrezzature <ol><li> Disinfettare la baia scanner (ad esempio, superfici che erano in contatto diretto con l&#39;animale, bed scanner, pavimento della sala scanner, maniglie) con una soluzione di ammonio quaternario 5% duale per un tempo di contatto di 10 min. </li><li> Sciacquare le superfici con una soluzione di etanolo al 70% dopo 10 minuti di esposizione alla soluzione dual ammonio quaternario. </li><li> Pulire gli elementi che non possono essere spruzzati direttamentecon soluzione dual ammonio quaternario (apparecchiature elettroniche sensibili) con un panno dual-quaternario-ammonio satura seguito da un panno etanolo saturo. </li></ol>

<ol><li>Jahrling, P. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+NIAID+Integrated+Research+Facility+at+Frederick%2C+Maryland%3A+a+unique+international+resource+to+facilitate+medical+countermeasure+development+for+BSL-4+pathogens%5BTitle%5D)+AND+%22Pathog+Dis%22%5BJournal%5D)">The NIAID Integrated Research Facility at Frederick, Maryland: a unique international resource to facilitate medical countermeasure development for BSL-4 pathogens.</a> Pathog Dis. , (2014).</li>
<li>de Kok-Mercado, F., Kutlak, F. M., Jahrling, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+NIAID+Integrated+Research+Facility+at+Fort+Detrick%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Biosafety%22%5BJournal%5D)">The NIAID Integrated Research Facility at Fort Detrick.</a> Appl Biosafety. 16, 58-66 (2011).</li>
<li>Keith, L., et al. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKeith%2C+L+%22Preclinical+imaging+in+BSL-3+and+BSL-4+envrionments%3A+imaging+pathophysiology+of+highly+pathogenic+infectious+diseases%22">Preclinical imaging in BSL-3 and BSL-4 envrionments: imaging pathophysiology of highly pathogenic infectious diseases</a>. Moyer, B. R., Cheruvu, N. P. S., Hu, T. , Springer-Verlag. New York, NY. (2014).</li>
<li>Chosewood, L. C., Wilson, D. E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aChosewood%2C+LC+%22Biosafety+in+microbiological+and+biomedical+laboratories%22">Biosafety in microbiological and biomedical laboratories</a>. , 5th, U.S. Dept. of Health and Human Services. Washington, D.C. . Accessed Sept. 4, 2014 (2009)
 <a target="_blank" href="http://www.cdc.gov/biosafety/publications/bmbl5/.">http://www.cdc.gov/biosafety/publications/bmbl5/.</a> (2009).</li>
<li>Janosko, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safety+precautions+and+operating+procedures+in+an+%28A%29BSL-4+laboratory%3A+1.+Laboratory+suite+entry+and+exit+procedures%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Safety precautions and operating procedures in an (A)BSL-4 laboratory: 1. Laboratory suite entry and exit procedures.</a> J Vis Exp. , (2016).</li>
<li>Diagnostic Radiology Committee Task Force on CT Scanner Phantoms. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Phantoms+for+evaluation+and+quality+assurance+of+CT+scanners%22">Phantoms for evaluation and quality assurance of CT scanners</a>. , American Association of Physicists in Medicine. Chicago, IL. (1977).</li>
<li>Collins, B. ACUP 712.01 Waste anesthetic gas scavenging systems. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCollins%2C+B+%22Institutional+Animal+Care+and+Use+Committee%22">Institutional Animal Care and Use Committee</a>. , Cornell University. Ithaca, NY. Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.research.cornell.edu/care/documents/ACUPs/ACUP712.pdf">http://www.research.cornell.edu/care/documents/ACUPs/ACUP712.pdf</a> (2013).</li>
<li>Gargiulo, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mice+anesthesia%2C+analgesia%2C+and+care%2C+Part+I%3A+anesthetic+considerations+in+preclinical+research%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+J%22%5BJournal%5D)">Mice anesthesia, analgesia, and care, Part I: anesthetic considerations in preclinical research.</a> ILAR J. 53, E55-E69 (2012).</li>
<li>Office of the Press Secretary. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Executive+order+13546.+Optimizing+the+security+of+Biological+Select+Agents+and+Toxins+in+the+United+States.+The+White+House%22">Executive order 13546. Optimizing the security of Biological Select Agents and Toxins in the United States. The White House</a>. , Washington, DC. Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.whitehouse.gov/the-press-office/executive-order-optimizing-security-biological-select-agents-and-toxins-united-stat">http://www.whitehouse.gov/the-press-office/executive-order-optimizing-security-biological-select-agents-and-toxins-united-stat</a> (2010).</li>
<li>Escaffre, O., Borisevich, V., Rockx, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogenesis+of+Hendra+and+Nipah+virus+infection+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22J+Infect+Dev+Ctries%22%5BJournal%5D)">Pathogenesis of Hendra and Nipah virus infection in humans.</a> J Infect Dev Ctries. 7, 308-311 (2013).</li>
<li>Sueblinvong, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Critical+care+for+multiple+organ+failure+secondary+to+Ebola+virus+disease+in+the+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Critical care for multiple organ failure secondary to Ebola virus disease in the United States.</a> Crit Care Med. , (2015).</li>
<li>Mazur, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safety+precautions+and+operating+procedures+in+an+%28A%29BSL-4+laboratory%3A+2.+General+practices%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Safety precautions and operating procedures in an (A)BSL-4 laboratory: 2. General practices.</a> J Vis Exp. , (2016).</li>
<li>Bohannon, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safety+precautions+and+operating+procedures+in+an+%28A%29BSL-4+laboratory%3A+3.+Aerobiology%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Safety precautions and operating procedures in an (A)BSL-4 laboratory: 3. Aerobiology.</a> J Vis Exp. , (2016).</li>
</ol>

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Precedenti articoli di questa serie hanno sottolineato l&#39;una formazione completa, l&#39;attenzione al dettaglio, le procedure di sicurezza e controlli tecnici aggiuntivi necessari per lavorare in sicurezza in un laboratorio di 12,13 massimo contenimento. Esecuzione di lavori in sicurezza è la massima priorità in questi laboratori. Questa filosofia è ancora più importante quando si lavora con gli animali vivi a causa di rischi aggiuntivi, come il potenziale di animali infetti per infliggere morsi o graffi ...

La missione del National Institute of Allergy e Malattie infettive (NIAID) La ricerca di Integrated Facility a Fort Detrick a Frederick MD (IRF-Frederick) è quello di eseguire emerge la ricerca sulle malattie infettive per comprendere i processi di malattia clinici che correlano con la gravità della microbica indotta malattia. L&#39;IRF-Federico ha una capacità unica di eseguire l&#39;imaging medico in modelli animali di agenti patogeni ad alto conseguenza in un ABSL-4 di laboratorio 1. Le modalità di imaging disponibili agli investigatori comprendono: la tomografia computerizzata (TC), risonanza magnetica (MRI), tomografia ad emissione di positroni (PET), singolo fotone SPECT (tomografia computerizzata), ultrasuoni, raggi X e fluoroscopia. I ricercatori usano capacità di imaging disponibili per monitorare la progressione della malattia e valutare l&#39;efficacia degli interventi, come il trattamento farmacologico e la vaccinazione, in studi longitudinali. Le modalità di imaging a IRF-Federico erano specificamenteprogettato per mantenere i componenti di base delle apparecchiature di fuori di alto contenimento 2,3 e accessibili per la manutenzione e la riparazione. Questo design separa la suite di imaging in &quot;caldo&quot; (contenente patogeno) e &quot;lati freddi.&quot; Per realizzare questa separazione, tubi appositamente progettati sono stati costruiti per estendere spazio ad alta contenimento nei fori di ciascuna modalità di imaging (Figura 1). Oltre a fornire contenimento biologico, questi tubi proteggono l&#39;apparecchiatura di riproduzione dal gas e sostanze chimiche usate per decontaminare laboratorio high-contenimento. scienziati e tecnologi di imaging operano gli scanner dal &quot;lato freddo&quot;, mentre Medicina comparativa (CM) maniglia personale e monitorare gli animali sul &quot;lato caldo&quot;. Dal momento che il personale CM deve lavorare a stretto contatto con gli scienziati di imaging per coordinare questi esperimenti, questa separazione può portare a problemi di comunicazione. Dopo aver valutato le opzioni disponibili, il personale CM erano fuoridotato di auricolari Bluetooth che trasmettono onde radio ad altissima frequenza di breve lunghezza d&#39;onda di cellulari usati per chiamare il personale per immagini al di fuori di contenimento. Grazie al design della struttura, punti di accesso wireless dovevano essere installati in ciascuna delle camere per superare l&#39;interferenza del segnale causato dagli strati di cemento e acciaio tra il &quot;caldo&quot; e &quot;freddo&quot; lati. Così, la comunicazione tra il personale CM indossare abiti positivo-pressione rumorosi e del personale delle immagini al di fuori di alta contenimento è ora affidabile. Telecamere sono stati installati sul lato caldo delle camere di imaging per l&#39;imaging personale per vedere l&#39;attività sul &quot;lato caldo&quot;. Con le telecamere, il personale di imaging in grado di guidare i tecnici cm con posizionamento degli animali o alcun cambiamenti dell&#39;ultimo minuto al protocollo di imaging. Tutti i lavori in IRF-Federico ABSL-4 laboratorio tuta richiede personale per portare a pressione positiva incapsulare tute 4. Indossare questi abiti riduce la mobilità, e il pesante ritardox guanti in dotazione al completo e fino a tre ulteriori livelli di guanti compromette destrezza. Il risultato è che le procedure richiedono più tempo per completare e attività che richiedono abilità motoria fine sono molto più difficili. Mentre il livello di biosicurezza aumenta, la movimentazione degli animali e manipolazioni diventato più impegnativo e richiede tempo, in particolare con i piccoli animali. Procedure in un laboratorio ABSL-4 può richiedere fino a 2-3 volte più lungo di un laboratorio ABSL-2. Lo scopo di questo articolo è quello di dimostrare visivamente le sfide connesse con modelli di imaging animali in un ambiente ABSL-4 utilizzando CT procedura di scansione di un porcellino d&#39;India come un esempio.

<table><tbody><tr><td>Micro-Chem Plus</td><td>National Chemical Laboratories</td><td>255</td><td></td></tr><tr><td>CT scanner</td><td>Philips Healthcare</td><td></td><td></td></tr><tr><td>CT phantom</td><td>Philips Healthcare</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isovue-300 (reagente di contrasto CT)</td><td>Bracco Diagnostics</td><td>NDC 0270-1315-30</td><td></td></tr><tr><td>Rack ventilato</td><td>Prodotti</td><td></td><td></td>da laboratorio</tr><tr><td>Gabbia per microisolatori</td><td>Prodotti di</td><td></td><td></td>laboratorio</tr><tr><td>Cabina di biosicurezza</td><td>Nuaire</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Macchina per anestesia</td><td>SurgiVet</td><td>WWV9000</td><td></td></tr><tr><td>Scatola di induzione per anestesia</td><td>VetEquip</td><td></td><td></td>Maschera</tr> per <tr><td>anestesia</td><td>Henry Schein</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Henry Schein</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Contenitore</td> <td>per lo smaltimento dei gas di scaricoFisher</td><td>F/AIR</td><td></td></tr><tr><td>Cuscino</td><td></td><td></td><td></td>di tenuta</tr><tr><td>Unguento</td><td></td><td></td><td></td>oftalmico</tr><tr><td>Monitor dei segni vitali</td><td>Bionet</td><td>BM3Vet</td><td></td></tr><tr><td>Telefono cellulare</td><td>Spectralink</td><td>8440</td><td></td></tr><tr><td>Auricolare</td><td></td><td></td><td></td>Blue Tooth</tr><tr><td>Punti</td><td></td><td></td><td></td>di accesso wireless</tr><tr><td>Sperian tuta a pressione positiva</td><td>Honeywell Safety Products</td><td>BSL 4-2</td><td></td></tr><tr><td>Guanti per tuta esterna (lattice, Ansell Canners e Handlers)</td><td>Fisher</td><td>19-019-601</td><td></td></tr><tr><td>Guanti per tuta esterna (nitrile/gomma, MAPA)</td><td>Fisher</td><td>2MYU1</td><td></td></tr><tr><td>Scrubs</td><td>Cintas</td><td>60975/60976</td><td></td></tr><tr><td>Calzini</td><td>Cintas</td><td>944</td><td></td></tr><tr><td>Nastro adesivo</td><td>Pack-N-Tape</td><td></td><td></td>51131069695</tr><tr><td>Asciugamani</td><td>Cintas</td><td>2720</td><td></td></tr><tr><td>Zip Lube</td><td>Amazon</td><td>B000GKBEJA</td><td></td></tr></tbody></table>

misure di sicurezza e procedure operative in un (a) bsl-4 di laboratorio: 4. procedure di imaging medico

Safety Precautions and Operating Procedures in an (A)BSL-4 Laboratory: 4. Medical Imaging Procedures

L'imaging medico utilizzando modelli animali per malattie umane è stato utilizzato per decenni; tuttavia, fino a poco tempo fa, l'imaging medico di malattie indotte da agenti patogeni ad alta conseguenza non era possibile. Nel 2014, il National Institutes of Health, il National Institute of Allergy and Infectious Diseases, Integrated Research Facility di Fort Detrick hanno aperto una struttura di biosicurezza animale di livello 4 (ABSL-4) per valutare il decorso clinico e la patologia delle malattie infettive negli animali infettati sperimentalmente. Per queste valutazioni sono disponibili diverse modalità di imaging, tra cui la tomografia computerizzata (TC), la risonanza magnetica, la tomografia a emissione di positroni e la tomografia computerizzata a emissione di fotoni singoli. L'obiettivo di questo articolo è quello di descrivere il flusso di lavoro per ottenere in sicurezza un'immagine TC di un porcellino d'India vivo in una struttura ABSL-4. Queste procedure includono la manipolazione degli animali, l'anestesia e la preparazione e il monitoraggio dell'animale fino al recupero dalla sedazione. Discuteremo anche della preparazione dell'apparecchiatura di imaging, dell'esecuzione dei controlli di qualità, dei metodi di comunicazione dal "lato caldo" (contenente agenti patogeni) al "lato freddo" e dello spostamento dell'animale dalla sala di attesa alla suite di imaging.

La stretta osservanza di tutte le procedure di sicurezza e le procedure operative standard per la manipolazione degli animali è essenziale per lavorare in sicurezza in un laboratorio ABSL-4. Trasferimento animali infetti all&#39;interno della scatola di induzione dall&#39;animale procedimento camera alla suite di imaging minimizza il rischio di contaminazione dei corridoi comuni. Seguendo le procedure richieste, non infezioni acquisite in laboratorio o la contaminazione incrociata dei so...

Qui, presentiamo una panoramica delle procedure di preparazione e manipolazione degli animali necessarie per eseguire in sicurezza l'imaging medico in un laboratorio di biosicurezza animale di livello 4. La tomografia computerizzata di un porcellino d'India finto infetto illustra queste procedure che possono essere utilizzate per valutare la malattia causata da un patogeno ad alta conseguenza.

Misure di sicurezza e procedure operative in un (A) BSL-4 di laboratorio: 4. procedure di imaging medico

Medical imaging using animal models for human diseases has been utilized for decades; however, until recently, medical imaging of diseases induced by ...

L'obiettivo generale di questa procedura di imaging è illustrare le procedure di sicurezza necessarie per eseguire l'imaging medico di animali in un impianto con livello di biosicurezza animale 4. Mediante l'imaging effettuato nell'ambiente con livello di biosicurezza animale 4, l'evoluzione della malattia viene valutata in modo non invasivo e vengono identificati biomarcatori utili per la valutazione di potenziali terapie e vaccini. Poiché le aree dedicate all'imaging sono suddivise in zona calda e zona fredda, gli animali infetti vengono sottoposti a imaging in sicurezza nella zona calda, mentre la maggior parte dell'apparecchiatura per l'imaging rimane all'esterno, nella zona fredda, consentendo una manutenzione agevole.Il nostro scopo è dimostrare che possiamo ottenere immagini di questi modelli animali di malattie virali letali in modo sicuro, affrontando al contempo le limitazioni legate al lavoro in un ambiente del genere. Le procedure sugli animali saranno illustrate da Russ Byrum, responsabile della struttura per animali presso l'istituto di ricerca integrato. Il nostro tecnico dell'imaging, Chris Bartos, collabora con il personale di medicina comparativa per coordinare il posizionamento dell'animale nello scanner e per acquisire le immagini.Le procedure che coinvolgono soggetti animali sono state approvate dal Comitato per la Cura e l'Uso degli Animali e dal Comitato Istituzionale per la Biosicurezza. Per preparare lo scanner di tomografia computerizzata, verificare che nessun membro del personale si trovi né nel lato caldo né in quello freddo della stanza di scansione e che il tavolo del soggetto sia vuoto. Assicurarsi che un oggetto rappresentativo della densità della testa e del corpo di un soggetto, denominato fantoccio, costituito da aria, acqua e Teflon, sia posizionato nel supporto appropriato sul tavolo di scansione, dal lato caldo.Dal lato freddo, verificare che il fantoccio sia correttamente fissato al lettino. Inserire il fantoccio al centro del foro. Acquisire una scansione del fantoccio, utilizzando i parametri standardizzati di controllo qualità del laboratorio per assicurare che lo scanner sia entro le specifiche del produttore.Informare il personale della medicina comparativa che la tomografia computerizzata, o scanner TC, è pronto per l'uso. Accendere il tavolo a depressione nella stanza delle procedure sugli animali almeno dieci minuti prima dell'uso. Pulire e disinfettare le superfici del tavolo a depressione utilizzando un disinfettante approvato, come una soluzione di disinfettante al 5% a base di ammonio quaternario doppio.Spruzzare le superfici interne e asciugarle dopo 10 minuti di tempo di contatto, quindi spruzzare nuovamente le superfici e asciugarle con etanolo al 70% per rimuovere il disinfettante residuo. Posizionare sull'apparecchio a flusso laminare discendente l'equipaggiamento e le forniture necessarie, inclusa la scatola per l'induzione dell'anestesia e i guanti per la manipolazione degli animali. Montare il dispositivo di contenimento animale sul lettino dello scanner di tomografia computerizzata, quindi configurare il monitor dei segni vitali.Verificare il volume di isoflurano nel vaporizzatore ed aggiungere altro isoflurano se necessario. Ispezionare visivamente la macchina per anestesia alla ricerca di perdite e, se necessario, correggere qualsiasi problema che causi una perdita. Pesare il contenitore di captazione che raccoglie i gas anestetici di scarto.Trasferire la gabbia contenente il porcellino d'India da una delle stanze per roditori adiacenti all'area di imaging al tavolo a flusso laminare. Verificare il numero di identificazione dell'animale sulla scheda della gabbia. Aprire il coperchio della gabbia e indossare guanti protettivi in pelle sopra i guanti della tuta a pressione positiva.Prendere delicatamente il criceto. Posizionare l'animale nella scatola di induzione all'anestesia e coprire la scatola con il coperchio. Rimuovere i guanti per la manipolazione degli animali e i guanti del camice monouso con soluzione disinfettante al 5% a base di ammonio quaternario doppio.Rimuovere la scatola di induzione dell'anestesia contenente l'animale e la gabbia dal tavolo con aspirazione verticale, e posizionarle su un carrello di trasporto. Utilizzando il carrello, portare l'animale nella stanza di scansione della tomografia computerizzata. Nella stanza dello scanner TC, collegare immediatamente il contenitore di aspirazione e il macchinario per l'anestesia alla scatola di induzione.Dopo aver iniziato l'anestesia come indicato nel protocollo, nel lato caldo della stanza del tomografo TC, monitorare l'animale durante l'induzione anestetica per verificare un'adeguata profondità di anestesia, controllando che l'animale non risponda a stimoli esterni e valutando il tono muscolare. Rimuovere il porcellino d'India anestetizzato dalla scatola di induzione e posizionarlo sul cuscinetto di sostegno in posizione prona sul lettino di imaging. Per un'ulteriore anestesia di mantenimento, posizionare il cono nasale sul porcellino d'India e accendere il gas per erogare ossigeno a un litro al minuto.Somministrare isoflurano come indicato nel protocollo testuale. Verificare la stabilità della frequenza respiratoria e cardiaca. Spegnere l'anestesia nella scatola di induzione quando il porcellino d'India è completamente anestetizzato.Applicare un unguento oftalmico in entrambi gli occhi per proteggere l'epitelio corneale dall'essiccamento. Attivare il sistema laser sul lato freddo della stanza della TAC per posizionare il porcellino d'India per la scansione TC. Utilizzare i pulsanti di entrata e uscita del tavolo per posizionare l'anatomia di interesse sotto i mirini laser.Per impostare il campo visivo, utilizzare il pulsante del laser per posizionare il punto iniziale sull'anatomia di interesse. Contattare il personale di medicina comparativa sul lato caldo per posizionare uno schermo di piombo tra loro e la tomografia computerizzata. Acquisire una scansione preliminare per la definizione della posizione delle sezioni per le immagini dello studio TC secondo il protocollo del produttore.Prescrivere il posizionamento delle sezioni per le immagini TC sulle immagini di riferimento. Coordinarsi con il personale presente sul lato caldo qualora si utilizzi un'iniezione di mezzo di contrasto. Acquisire la scansione secondo il protocollo del produttore, quindi ricostruire le immagini di tomografia computerizzata alla consolle dello scanner, seguendo anch'esse il protocollo del produttore.Invia le immagini a un sistema di archiviazione e comunicazione delle immagini. Se necessario, esegui ulteriori analisi qualitative e quantitative su questi dati salvati nel sistema di archiviazione. Trasferisci il criceto dalla lettiga dello scanner a una gabbia microisolante con cibo nella stanza dello scanner TC.Pulire i guanti in nitrile dopo aver manipolato l'animale. Utilizzando il carrello, riportare la gabbia nell'area di alloggio all'interno della stanza per procedure sugli animali. Monitorare l'animale fino a quando non si sarà completamente ripreso dall'anestesia, prima di riconsegnare la gabbia nei rack ventilati con filtro HEPA.Disinfettare sia il tavolo a flusso laminare discendente nella stanza delle procedure sugli animali sia l'area del vano dello scanner con una soluzione al 5% di ammonio quaternario doppio. Pulire le superfici con una soluzione al 70% di etanolo dopo un'esposizione di 10 minuti alla soluzione di ammonio quaternario doppio. Pulire oggetti come apparecchiature elettroniche sensibili, ad esempio il monitor e la macchina per anestesia, che non possono essere spruzzati direttamente, con un panno saturo di ammonio quaternario doppio, seguito da un panno saturo di etanolo.È fondamentale seguire scrupolosamente tutte le procedure di sicurezza e le procedure operative standard per la manipolazione degli animali per lavorare in modo sicuro in un laboratorio ABSL4. Il trasferimento di animali infetti all'interno della scatola di induzione dalla stanza delle procedure animali al reparto di imaging riduce al minimo il rischio di contaminazione dei corridoi comuni. L'adozione di sistemi di comunicazione che prevedono l'uso di telefoni Bluetooth con auricolari, che consentono al personale addetto all'imaging presente nel lato freddo di contattare il personale della medicina comparativa situato nel lato caldo, unita alla comunicazione visiva, riduce la possibilità di errori di comunicazione tra il personale separato.Seguendo le procedure corrette, non sono state registrate infezioni acquisite in laboratorio né contaminazioni incrociate di soggetti animali durante la ricerca di livello di sicurezza biologica animale 4 condotta presso l'IRF Frederic. I patogeni virali ABSL4 possono indurre patologie a carico del polmone, e la TC è uno strumento prezioso per monitorare l'evoluzione della malattia in modelli animali di infezione. Le immagini TC vengono create a partire dall'assorbimento della radiazione a raggi X nei tessuti.In TC, maggiore è la densità dell'oggetto immaginato, come l'osso, più luminoso appare l'oggetto. I tessuti organici densi come cuore e fegato tendono ad avere un'intensità intermedia, mentre i tessuti pieni d'aria, come i polmoni sani, appaiono neri. La TC acquisisce molteplici radiografie lungo una visione di 360 gradi che viene ricostruita in una vista tridimensionale del corpo.Una volta padroneggiata, questa tecnica può essere eseguita in circa 30 minuti se effettuata correttamente. Seguendo procedure analoghe, altre modalità di imaging, come PET, SPECT e MRI, possono essere utilizzate per rispondere ad ulteriori quesiti riguardanti la patogenesi delle malattie, e forse persino per effettuare l'imaging del virus stesso. Dopo aver visto questo video, si dovrebbe avere una buona comprensione della complessità della procedura e delle risorse necessarie per eseguire l'imaging medico negli animali da laboratorio all'interno di una struttura con livello di biosicurezza animale 4.

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Research

Ricerca

JoVE Journal

Immunology and Infection

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