OP-IVM: Combinazione della maturazione in vitro dopo il prelievo di ovociti con la chirurgia ginecologica
9 maggio 2021
La maturazione in vitro (IVM) prima dell'operazione ginecologica (OP-IVM) combina l'IVM dopo il prelievo degli ovociti con la chirurgia ginecologica di routine e funge da estensione delle applicazioni IVM convenzionali per la conservazione della fertilità.
La tecnologia, OP-IVM, è un'estensione del protocollo IVM convenzionale che combina IVM dopo il recupero degli ovociti con la chirurgia ginecologica di routine. È adatto per donne infertili o subfertili che hanno bisogno di ricevere un intervento chirurgico ginecologico prima del trattamento ART o della conservazione della fertilità, pazienti con sindrome dell'ovaio policistico con resistenza al clomifene che necessitano di un intervento chirurgico di perforazione ovarica laparoscopica, pazienti infertili che necessitano di interventi chirurgici ginecologici benigni come miomectomia isteroscopica, polipectomia, resezione transtoracica del setto e chirurgia del tubo laparoscopico, e l'ovariocistectomia prima del trattamento ART, e anche i pazienti con cancro e malattie ematologiche che ricevono chemioradioterapia o radioterapia, possono fare questo intervento chirurgico per la conservazione della fertilità. Posizionare la sonda ad ultrasuoni all'interno della vagina per scansionare e registrare il numero di follicoli in entrambe le ovaie.
Trova la posizione più vicina all'ovaio come sito di puntura, evitando l'intestino, la vescica e i grandi vasi sanguigni. Lavare l'ago di aspirazione a singolo lumen calibro 19 con un mezzo di manipolazione stabile a pH, quindi iniettare l'ago nelle ovaie sotto la guida degli ultrasuoni. Aspirare il fluido follicolare con l'ago sotto una pressione da 80 a 90 millimetri di mercurio, ruotando leggermente l'ago per aspirare più liquido follicolare possibile.
Utilizzare l'eparina per ridurre la viscosità del fluido follicolare durante l'aspirazione. Regolare la posizione della sonda per mantenerla il più vicino possibile alle ovaie in ogni momento e premere il fornice vaginale con la forza adeguata per ridurre lesioni e sanguinamento. Assicurarsi di completare l'aspirazione del fluido follicolare entro 25-30 minuti.
Estrarre l'ago dopo aver finito in un'ovaia, lavare l'ago con il mezzo di manipolazione e perforare l'altro lato con lo stesso metodo. Lavorando in un piatto omotermico a 37 gradi Celsius, preparare il mezzo di manipolazione, la capsula di Petri e il filtro cellulare. Risciacquare il tubo di coltura e il colino con un mezzo di manipolazione preriscaldato a pH stabile.
Filtrare il fluido follicolare aspirato con un filtro a celle di nylon da 70 micrometri, risciacquando ripetutamente il tubo di coltura e il filtro con un mezzo di manipolazione stabile a pH preriscaldato. Assicurarsi che tutti i COC immaturi siano completamente trasferiti al piatto di coltura. Trasferire il sangue in mezzi di manipolazione puliti.
Quindi, trasferire il colino cellulare in un nuovo piatto e lavarlo. Aspirare e trasferire il mezzo di manipolazione con i COC, le cellule della granulosa e i tessuti in un nuovo piatto. Esaminare i COC sotto lo stereoscopio con ingrandimento 40 volte.
Trasferire rapidamente gli immaturi in un mezzo ovocitario IVM preriscaldato. Quindi, esaminare i COC nel coagulo di sangue e nel colino cellulare. Trasferire i COC e i mezzi di manipolazione in un mezzo ovocitario IVM preriscaldato.
Coltivate i COC immaturi per 28-32 ore a 37 gradi Celsius in aria umidificata contenente il 5% di anidride carbonica e il 5% di ossigeno. A dicembre 2019, OP-IVM era stato utilizzato per la conservazione della fertilità di 274 pazienti. Un esempio è stato un paziente di 28 anni a cui è stata diagnosticata infertilità primaria, cisti annessiale sinistra e PCOS.
Ha ricevuto cistectomia laparoscopica e OP-IVM nel settembre 2016 e sono stati ottenuti 27 COC immaturi. Dopo 28 ore in coltura, sette ovociti nella fase MII sono stati selezionati e fecondati dall'ICSI. Dopo cinque giorni, due blastocisti sono state congelate.
Uno è stato scongelato nel febbraio 2017 e trasferito nell'utero. Il paziente ha partorito una ragazza sana a novembre. OP-IVM è stato applicato per la prima volta al recupero di ovociti di donne infertili con PCOS che sono sottoposte a operazioni di perforazione ovarica, e ora le sue applicazioni possono essere estese alle donne subfertili che hanno bisogno di ricevere un'operazione ginecologica benigna, anche le donne cancro per la conservazione della fertilità.
Indica che il campo di applicazione di IVM può essere ampliato combinandolo con altre operazioni ginecologiche tradizionali per la conservazione della fertilità femminile.
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Panoramica
OP-IVM è un approccio innovativo che combina la maturazione in vitro (IVM) degli ovociti con interventi chirurgici ginecologici di routine. Questo metodo è particolarmente vantaggioso per le donne che presentano infertilità o subfertilità e che necessitano di un intervento chirurgico prima del trattamento con tecniche di procreazione medicalmente assistita.
Componenti Chiave dello Studio
Area della Scienza
- Medicina della Riproduzione
- Ginecologia
- Preservazione della Fertilità
Sfondo
- La MVO è una tecnica utilizzata per maturare gli ovociti al di fuori del corpo.
- La MVO-PF estende le applicazioni della MVO a includere procedure chirurgiche.
- Questo metodo risponde alle esigenze di donne con diverse patologie legate alla salute riproduttiva.
- È particolarmente rilevante per pazienti sottoposte a trattamenti che potrebbero compromettere la fertilità.
Scopo dello studio
- Fornire un'opzione di preservazione della fertilità per donne che necessitano di interventi chirurgici ginecologici.
- Migliorare gli esiti per pazienti con condizioni come la sindrome dell'ovaio policistico.
- Facilitare i trattamenti di procreazione medicalmente assistita dopo l'intervento chirurgico.
Metodi Utilizzati
- Prelevamento ecoguidato di ovociti dalle ovaie.
- Utilizzo di un ago per aspirazione monolume da 19 gauge per l'aspirazione del liquido follicolare.
- Monitoraggio del numero e della salute dei follicoli prima dell'intervento chirurgico.
- Valutazione dell'idoneità del paziente in base all'anamnesi e alle esigenze chirurgiche.
Risultati principali
- Recupero con successo di ovociti in pazienti sottoposte a procedure ginecologiche.
- Miglioramento degli esiti nella conservazione della fertilità per pazienti con cancro o altre condizioni che compromettono la fertilità.
- Dimostrata fattibilità della combinazione tra maturazione in vitro (IVM) e interventi chirurgici.
- Feedback positivo da parte delle pazienti riguardo all'approccio doppio.
Conclusioni
- La IVM-OP rappresenta un notevole progresso nelle strategie di preservazione della fertilità.
- Questo metodo può essere un'opzione praticabile per le donne che richiedono un intervento chirurgico ginecologico.
- Sono necessarie ulteriori ricerche per ottimizzare protocolli e risultati.
Domande frequenti
Rilevanza Industriale del Progetto
OP-IVM estende la maturazione in vitro (IVM) integrandola con interventi chirurgici ginecologici di routine, consentendo la preservazione della fertilità nei pazienti sottoposti a procedure chirurgiche benigne. Questo approccio colma una lacuna fondamentale nella medicina riproduttiva, recuperando ovociti immaturi che altrimenti verrebbero scartati durante l'intervento chirurgico, ampliando così il numero di gameti vitali disponibili per le tecnologie di riproduzione medicalmente assistita (ART). Combinando il recupero degli ovociti con interventi ginecologici già programmati, l'OP-IVM migliora l'efficienza clinica e sostiene strategie di preservazione della fertilità centrate sul paziente, sia in ambito oncologico che nelle patologie benigne.
Applicazioni Strategiche nella Ricerca e Sviluppo in Biopharma
Scoperta Precoce e Validazione del Target
- Valore scientifico: Consente l'analisi dei percorsi di maturazione degli oociti in condizioni fisiologicamente rilevanti successive a uno stress chirurgico.
- Valore operativo: Fornisce un modello riproducibile per studiare il recupero del complesso cumulo-oocitario (COC) e l'efficienza di maturazione dopo l'aspirazione.
Sviluppo di screening e saggi
- Valore scientifico: Supporta lo sviluppo di saggi standardizzati per la valutazione della qualità degli ovociti mediante selezione morfonucleare dopo la coltura in vitro (IVM).
- Valore operativo: Facilita flussi di lavoro scalabili per la criopreservazione di ovociti maturi (stadio MII) ottenuti in contesti chirurgici.
Ricerca Translazionale e Preclinica
- Valore scientifico: Offre un sistema rilevante per la patologia per valutare l'efficacia della preservazione della fertilità in condizioni come la sindrome dell'ovaio policistico (PCOS) e le terapie oncologiche.
- Valore operativo: Dimostra una continuità traslazionale dal prelievo degli ovociti attraverso la maturazione in vitro (IVM), la criopreservazione e i successivi esiti delle tecniche di riproduzione assistita (ART).
Integrazione di Pipeline e Flusso di Lavoro
L'OP-IVM colloca la maturazione degli ovociti come un ponte tra le procedure ginecologiche diagnostiche e i flussi di lavoro successivi di tecniche di riproduzione assistita (ART), consentendo un'integrazione fluida della preservazione della fertilità nei percorsi assistenziali chirurgici.
- Biologia della scoperta: Supporta la verifica di ipotesi sulla risposta follicolare a stimoli ormonali e chirurgici mediante la resa di COC immaturi e i tassi di maturazione.
- Screening: Permette la predisposizione del saggio per la valutazione della competenza degli ovociti attraverso una coltura IVM standardizzata (28–32 ore) e la selezione allo stadio MII.
- Analisi: Produce dati quantitativi, inclusi resa degli ovociti, percentuale di maturazione e tassi di sopravvivenza dopo criopreservazione, per il confronto tra diverse condizioni.
- Ricerca traslazionale: Collega l'intervento chirurgico alla continuità preclinica validando l'usabilità degli ovociti in modelli di fecondazione eterologa con trasferimento embrionale post-scongelamento.
- Riutilizzo aziendale: Stabilisce una piattaforma riutilizzabile per la preservazione della fertilità in diverse indicazioni ginecologiche, riducendo la ridondanza delle procedure.
Impatto Operativo ed Aziendale
- Valore scientifico: Aumenta la fiducia predittiva nella preservazione della fertilità sfruttando ovociti immaturi altrimenti scartati.
- Valore operativo: Standardizza i protocolli di recupero e maturazione degli ovociti in ambito chirurgico e di laboratorio.
- Valore strategico: Migliora le decisioni di proseguimento o interruzione nella pianificazione dei trattamenti per la fertilità, ampliando le riserve di ovociti disponibili prima della fecondazione assistita (pre-ART).
- Impatto sul portafoglio: Permette una priorizzazione degli interventi di preservazione della fertilità adeguata al rischio, in coorti di pazienti oncologiche e con malattie benigne.
Considerazioni sull'implementazione
- Richiede competenze specifiche in endocrinologia della riproduzione, aspirazione guidata da ultrasuoni e tecniche di laboratorio in embriologia.
- Presuppone l'accesso a incubatrici idonee alla maturazione in vitro (IVM), mezzi di manipolazione e strumenti per la valutazione stereoscopica.
- Necessita di una coordinazione tra i team chirurgico, anestesiologico e di laboratorio per la fecondazione in vitro (IVF) al fine di garantire un trasferimento temporizzato degli ovociti.
- Richiede l'adattamento dei protocolli relativi ai mezzi di manipolazione e ai filtri in base ai diversi volumi e viscosità del liquido follicolare.
- È limitato da fattori specifici del paziente, come la accessibilità ovarica, il numero di follicoli e i vincoli relativi alla durata dell'intervento chirurgico.
