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DOI: 10.3791/65735-v
Christina B. Schroeter*1, Antonia Henes*1, Anna Vogelsang1, Alexander M. Herrmann1, Stefanie Lichtenberg1, Derya Cengiz1, Vera Dobelmann1, Niklas Huntemann1, Christopher Nelke1, Susann Eichler2, Philipp Albrecht1, Sven G. Meuth*1, Tobias Ruck1
1Department of Neurology, Medical Faculty,Heinrich Heine University Duesseldorf, 2Department of Neurology, Institute of Translational Neurology,University Hospital Muenster
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study presents a novel protocol for the simultaneous isolation of all principal central nervous system (CNS) resident cell types from a single mouse, applicable in both naïve and experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) models. This method aims to address the limitations of current cell isolation technologies, allowing researchers to investigate complex cellular interactions during neuroinflammation while minimizing the number of mice used.
Ad oggi, i protocolli per l'isolamento simultaneo di tutti i principali tipi di cellule residenti nel sistema nervoso centrale dallo stesso topo sono una richiesta insoddisfatta. Il protocollo mostra una procedura applicabile nei topi con encefalomielite autoimmune naïve e sperimentale per studiare reti cellulari complesse durante la neuroinfiammazione e contemporaneamente ridurre il numero di topi richiesti.
Per studiare i meccanismi molecolari e cellulari nelle malattie autoimmuni come la sclerosi multipla, la generazione di protocolli di isolamento cellulare riproducibili e sofisticati è un'esigenza insoddisfatta. La maggior parte delle attuali tecnologie per isolare e analizzare le cellule residenti nel SNC mostrano gravi carenze, come concentrarsi su un solo tipo di cellula o solo sui topi postnatali. L'attuale protocollo per l'isolamento simultaneo di tutti i principali tipi di cellule residenti nel SNC da una replica del SNC offre la possibilità di analizzare reti neuronali complesse e nuove vie infiammatorie, ex vivo da una singola sospensione cellulare, applicabili a topi sani e a quelli con encefalomielite autoimmune sperimentale.
Inoltre, il numero di topi è diminuito Il nostro protocollo per l'isolamento simultaneo di tutti e quattro i principali tipi di cellule residenti nel SNC in topi sani e EAE potrebbe essere utilizzato come strumento utile per i gruppi di ricerca che studiano nuove vie infiammatorie, consentendo un'analisi molto più accurata di meccanismi biomolecolari complessi e reti cellulari ex vivo. Le nuove domande scientifiche a cui si potrebbe rispondere con l'aiuto del nostro protocollo sono le indagini dinamiche nell'EAE durante le diverse fasi del decorso della malattia, come la neuroinfiammazione, la neurodegenerazione e la remissione. Inoltre, le interazioni cellula-cellula e i percorsi biochimici potrebbero essere studiati a livello individuale.
Allo stesso modo, i saggi funzionali potrebbero essere eseguiti con cellule coltivate. Intendiamo concentrarci sugli studi dinamici del corso EAE per l'analisi multi-omica da un singolo omogenato del SNC per punto temporale EAE.
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