Imaging multiplexato di cellule vive per le risposte ai farmaci in modelli di organoidi derivati da pazienti
January 5th, 2024
Gli organoidi tumorali derivati da pazienti sono un sofisticato sistema modello per la ricerca di base e traslazionale. Questo articolo sui metodi descrive in dettaglio l'uso dell'imaging fluorescente multiplexato di cellule vive per la valutazione cinetica simultanea di diversi fenotipi organoidi.
Applichiamo modelli di organoidi derivati dal paziente, che vengono creati da campioni tumorali reali del paziente per esaminare come i tumori rispondono ai farmaci. Possiamo anche definire le caratteristiche molecolari che correlano con la risposta. Questi risultati vengono poi utilizzati per dare priorità alle migliori nuove terapie per avanzare negli studi clinici in futuro.
Una delle principali sfide nell'utilizzo di modelli di organoidi derivati da pazienti è che si tratta di una risorsa limitata. Inoltre, ci sono pochissimi kit pronti all'uso per valutare la risposta ai farmaci in modelli di organoidi che conservano il campione in un formato che consente altre analisi a valle, come la profilazione trascrittomica. Abbiamo sviluppato un approccio multiplexato per monitorare cineticamente la risposta terapeutica in modelli di organoidi.
Utilizziamo coloranti fluorescenti specifici per diversi processi cellulari, che forniscono informazioni sul meccanismo dell'attività dei farmaci in ciascun modello di organoide. In un singolo esperimento raccogliamo dati sia funzionali che di decorso temporale e i campioni sono disponibili per altri saggi. Questo metodo può essere applicato per valutare la risposta a un'ampia gamma di modalità terapeutiche oltre agli inibitori di piccole molecole, compresa la sensibilità alle radiazioni.
Stiamo anche continuando a innovare sviluppando strumenti per altri fenotipi cellulari che possono essere misurati cineticamente, come la senescenza.
Panoramica
Questo articolo discute l'uso degli organuli tumorali derivati dai pazienti come sistema modello per la valutazione della risposta ai farmaci. Evidenzia un approccio di imaging fluorescente multiplex delle cellule vive per valutare i fenotipi degli organuli.
Componenti chiave dello studio
Area della scienza
- Neuroscienze
- Oncologia
- Ricerca traslazionale
Sfondo
- Gli organuli derivati dai pazienti sono creati da campioni tumorali reali dei pazienti.
- Sono usati per studiare le risposte tumorali a varie terapie.
- Le sfide includono risorse limitate e la necessità di kit compatibili per la valutazione della risposta ai farmaci.
- Le analisi downstream, come il profilaggio trascrittomico, sono essenziali per una ricerca completa.
Scopo dello studio
- Valutare come i tumori rispondono ai farmaci utilizzando modelli di organuli.
- Definire le caratteristiche molecolari che correlano con le risposte terapeutiche.
- Prioritizzare nuove terapie per studi clinici basate sulle risposte degli organuli.
Metodi utilizzati
- Imaging fluorescente multiplex delle cellule vive.
- Monitoraggio genetico delle risposte terapeutiche nei modelli di organuli.
- Valutazione simultanea di diversi fenotipi di organuli.
- Integrazione dei dati di risposta ai farmaci con il profilaggio molecolare.
Principali risultati
- Applicazione di successo dell'imaging multiplex per valutare le risposte degli organuli.
- Identificazione di caratteristiche molecolari legate all'efficacia dei farmaci.
- Stabilimento di un quadro per la prioritizzazione delle terapie per studi clinici.
- Dimostrazione del potenziale dei modelli di organuli nella ricerca traslazionale.
Conclusioni
- Gli organuli derivati dai pazienti sono preziosi per comprendere le risposte ai farmaci.
- L'approccio multiplex migliora la valutazione dei fenotipi degli organuli.
- I risultati possono influenzare i futuri disegni di studi clinici e le strategie terapeutiche.
Domande frequenti
Chapters in this video
0:00
Introduction
1:24
Plating Intact Patient‐Derived Organoids and Setting Up Imaging Parameters for Multiplexed Live‐Cell Imaging
6:34
Image Analysis in Gen5 Software to Analyze Drug Response in Patient‐Derived Organoids Using Multiplexed Live‐Cell Imaging
