Name: Previsione rapida della risposta ai farmaci in vivo utilizzando innesti di cellule leucemiche in embrioni di zebrafish (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-23T12:40:00.000+00:00
Duration: 10 min 46 s
Description: Scopri un protocollo rapido di sette giorni per valutare la risposta ai farmaci nella leucemia linfoblastica acuta utilizzando xenotrapianti in embrioni di zebrafish. Questo metodo offre un modello preclinico efficace per la ricerca oncologica pediatrica.

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<ol><li>Fontana, C. M., Van Doan, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+xenograft+as+a+tool+for+the+study+of+colorectal+cancer%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Dis%22%5BJournal%5D)">Zebrafish xenograft as a tool for the study of colorectal cancer: a review.</a> Cell Death Dis. 15, 1-12 (2024).</li>
<li>Sturtzel, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Refined+high-content+imaging-based+phenotypic+drug+screening+in+zebrafish+xenografts%5BTitle%5D)+AND+%22NPJ+Precis+Oncol%22%5BJournal%5D)">Refined high-content imaging-based phenotypic drug screening in zebrafish xenografts.</a> NPJ Precis Oncol. 7 (1), 1-16 (2023).</li>
<li>Al-Hamaly, M. A., Turner, L. T., Rivera-Martinez, A., Rodriguez, A., Blackburn, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+cancer+avatars%3A+A+translational+platform+for+analyzing+tumor+heterogeneity+and+predicting+patient+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Zebrafish cancer avatars: A translational platform for analyzing tumor heterogeneity and predicting patient outcomes.</a> Int J Mol Sci. 24, 2288(2023).</li>
<li>Gamble, J. T., Elson, D. J., Greenwood, J. A., Tanguay, R. L., Kolluri, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+zebrafish+xenograft+models+for+investigating+cancer+and+cancer+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Biology%22%5BJournal%5D)">The zebrafish xenograft models for investigating cancer and cancer therapeutics.</a> Biology. 10 (4), 252(2021).</li>
<li>Costa, B., Estrada, M. F., Mendes, R. V., Fior, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+avatars+towards+personalized+medicine-A+comparative+review+between+avatar+models%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Zebrafish avatars towards personalized medicine-A comparative review between avatar models.</a> Cells. 9 (2), 293(2020).</li>
<li>Wang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progress+in+building+clinically+relevant+patient-derived+tumor+xenograft+models+for+cancer+research%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Model+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Progress in building clinically relevant patient-derived tumor xenograft models for cancer research.</a> Animal Model Exp Med. 6 (5), 381-398 (2023).</li>
<li>Xiao, J., Glasgow, E., Agarwal, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+xenografts+for+drug+discovery+and+personalized+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Trend+Cancer%22%5BJournal%5D)">Zebrafish xenografts for drug discovery and personalized medicine.</a> Trend Cancer. 6 (7), 569-579 (2020).</li>
<li>Fazio, M., Ablain, J., Chuan, Y., Langenau, D. M., Zon, L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+patient+avatars+in+cancer+biology+and+precision+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Zebrafish patient avatars in cancer biology and precision cancer therapy.</a> Nat Rev Cancer. 20 (5), 263-273 (2020).</li>
<li>Costa, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+avatar-test+forecasts+clinical+response+to+chemotherapy+in+patients+with+colorectal+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Comm%22%5BJournal%5D)">Zebrafish avatar-test forecasts clinical response to chemotherapy in patients with colorectal cancer.</a> Nat Comm. 15 (1), 4771(2024).</li>
<li>Grissenberger, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chapter+8+-+Preclinical+testing+of+CAR+T+cells+in+zebrafish+xenografts%5BTitle%5D)+AND+%22Method+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Chapter 8 - Preclinical testing of CAR T cells in zebrafish xenografts.</a> Method Cell Biol. 167, 133-147 (2022).</li>
<li>Yan, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+imaging+of+T+cell+immunotherapy+responses+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Single-cell imaging of T cell immunotherapy responses in vivo.</a> J Exp Med. 218 (10), 20210314(2021).</li>
<li>Pascoal, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+preclinical+embryonic+zebrafish+xenograft+model+to+investigate+CAR+T+cells+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Cancers%22%5BJournal%5D)">A preclinical embryonic zebrafish xenograft model to investigate CAR T cells in vivo.</a> Cancers. 12 (3), 567(2020).</li>
<li>Pal, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+in+vitro+maintenance+of+clonal+abundance+and+leukaemia-initiating+potential+in+acute+lymphoblastic+leukaemia%5BTitle%5D)+AND+%22Leukemia%22%5BJournal%5D)">Long-term in vitro maintenance of clonal abundance and leukaemia-initiating potential in acute lymphoblastic leukaemia.</a> Leukemia. 30 (8), 1691-1700 (2016).</li>
<li>Beneduce, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blinatumomab+in+children+and+adolescents+with+relapsed%2Frefractory+B+cell+precursor+acute+lymphoblastic+leukemia%3A+A+real-life+multicenter+retrospective+study+in+seven+AIEOP+%28Associazione+Italiana+di+Ematologia+e+Oncologia+Pediatrica%29+Centers%5BTitle%5D)+AND+%22Cancers%22%5BJournal%5D)">Blinatumomab in children and adolescents with relapsed/refractory B cell precursor acute lymphoblastic leukemia: A real-life multicenter retrospective study in seven AIEOP (Associazione Italiana di Ematologia e Oncologia Pediatrica) Centers.</a> Cancers. 14 (2), 426(2022).</li>
<li>Xie, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short-course+blinatumomab+for+refractory%2Frelapse+precursor+B+acute+lymphoblastic+leukemia+in+children%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Pediatr%22%5BJournal%5D)">Short-course blinatumomab for refractory/relapse precursor B acute lymphoblastic leukemia in children.</a> Front Pediatr. 11, 1187607(2023).</li>
<li>Mengxuan, S., Fen, Z., Runming, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+treatments+for+pediatric+relapsed+or+refractory+acute+B-cell+lineage+lymphoblastic+leukemia%3A+Precision+medicine+era%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Pediatr%22%5BJournal%5D)">Novel treatments for pediatric relapsed or refractory acute B-cell lineage lymphoblastic leukemia: Precision medicine era.</a> Front Pediatr. 10, 923419(2022).</li>
<li>Howe, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+zebrafish+reference+genome+sequence+and+its+relationship+to+the+human+genome%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">The zebrafish reference genome sequence and its relationship to the human genome.</a> Nature. 496 (7446), 498-503 (2013).</li>
<li>Lee, H. C., Lin, C. Y., Tsai, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish%2C+an+in+vivo+platform+to+screen+drugs+and+proteins+for+biomedical+use%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceuticals%22%5BJournal%5D)">Zebrafish, an in vivo platform to screen drugs and proteins for biomedical use.</a> Pharmaceuticals. 14 (6), 500(2021).</li>
<li>Santoriello, C., Zon, L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hooked%21+Modeling+human+disease+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Investigation%22%5BJournal%5D)">Hooked! Modeling human disease in zebrafish.</a> J Clin Investigation. 122 (7), 2337-2343 (2012).</li>
<li>Miao, K. Z., Kim, G. Y., Meara, G. K., Qin, X., Feng, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tipping+the+scales+with+zebrafish+to+understand+adaptive+tumor+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Tipping the scales with zebrafish to understand adaptive tumor immunity.</a> Front Cell Dev Biol. 9, 660969(2021).</li>
<li>Gauert, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fast%2C+in+vivo+model+for+drug-response+prediction+in+patients+with+B-cell+precursor+acute+lymphoblastic+leukemia%5BTitle%5D)+AND+%22Cancers%22%5BJournal%5D)">Fast, in vivo model for drug-response prediction in patients with B-cell precursor acute lymphoblastic leukemia.</a> Cancers. 12 (7), 1883(2020).</li>
<li>Ellett, F., Pase, L., Hayman, J. W., Andrianopoulos, A., Lieschke, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mpeg1+promoter+transgenes+direct+macrophage-lineage+expression+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Mpeg1 promoter transgenes direct macrophage-lineage expression in zebrafish.</a> Blood. 117 (4), e49-e56 (2011).</li>
<li>Pase, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil-delivered+myeloperoxidase+dampens+the+hydrogen+peroxide+burst+after+tissue+wounding+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biol%22%5BJournal%5D)">Neutrophil-delivered myeloperoxidase dampens the hydrogen peroxide burst after tissue wounding in zebrafish.</a> Current Biol. 22 (19), 1818-1824 (2012).</li>
<li>Wijk, R. C. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanistic+and+quantitative+understanding+of+pharmacokinetics+in+Zebrafish+larvae+through+nanoscale+blood+sampling+and+metabolite+modeling+of+paracetamol%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Exp+Ther%22%5BJournal%5D)">Mechanistic and quantitative understanding of pharmacokinetics in Zebrafish larvae through nanoscale blood sampling and metabolite modeling of paracetamol.</a> J Pharmacol Exp Ther. 371 (1), 15-24 (2019).</li>
<li>Lázaro-Navarro, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibiting+casein+kinase+2+sensitizes+acute+lymphoblastic+leukemia+cells+to+venetoclax+via+MCL1+degradation%5BTitle%5D)+AND+%22Blood+Advances%22%5BJournal%5D)">Inhibiting casein kinase 2 sensitizes acute lymphoblastic leukemia cells to venetoclax via MCL1 degradation.</a> Blood Advances. 5 (24), 5501(2021).</li>
<li>Rhodes, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interplay+of+pu.1+and+gata1+determines+myelo-erythroid+progenitor+cell+fate+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Developmental+Cell%22%5BJournal%5D)">Interplay of pu.1 and gata1 determines myelo-erythroid progenitor cell fate in zebrafish.</a> Developmental Cell. 8 (1), 97-108 (2005).</li>
<li>Zakaria, Z. Z., Eisa-Beygi, S., Benslimane, F. M., Ramchandran, R., Yalcin, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Design+and+microinjection+of+Morpholino+antisense+oligonucleotides+and+mRNA+into+zebrafish+embryos+to+elucidate+specific+gene+function+in+heart+dvelopment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Design and microinjection of Morpholino antisense oligonucleotides and mRNA into zebrafish embryos to elucidate specific gene function in heart dvelopment.</a> J Vis Exp. (186), e63324(2022).</li>
<li>ZFIN: Zebrafish Book: Contents. , 
 <a target="_blank" href="https://zfin.org/zf_info/zfbook/cont.html">https://zfin.org/zf_info/zfbook/cont.html</a> (2025).</li>
<li>Kimmel, C. B., Ballard, W. W., Kimmel, S. R., Ullmann, B., Schilling, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stages+of+embryonic+development+of+the+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Dyn%22%5BJournal%5D)">Stages of embryonic development of the zebrafish.</a> Dev Dyn. 203 (3), 253-310 (1995).</li>
<li>Hasegawa, E. H., Gist H Farr, I. I. I., Maves, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+pronase+versus+manual+dechorionation+of+zebrafish+embryos+for+small+molecule+treatments%5BTitle%5D)+AND+%22J+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Comparison of pronase versus manual dechorionation of zebrafish embryos for small molecule treatments.</a> J Dev Biol. 11 (2), 16(2023).</li>
<li>Wattrus, S. J., Zon, L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+cell+safe+harbor%3A+the+hematopoietic+stem+cell+niche+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Blood+Adv%22%5BJournal%5D)">Stem cell safe harbor: the hematopoietic stem cell niche in zebrafish.</a> Blood Adv. 2 (21), 3063-3069 (2018).</li>
<li>Harvie, E. A., Huttenlocher, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophils+in+host+defense%3A+new+insights+from+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22J+Leukocyte+Biol%22%5BJournal%5D)">Neutrophils in host defense: new insights from zebrafish.</a> J Leukocyte Biol. 98 (4), 523-537 (2015).</li>
<li>Page, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+evolutionarily+conserved+program+of+B-cell+development+and+activation+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">An evolutionarily conserved program of B-cell development and activation in zebrafish.</a> Blood. 122 (8), e1-e11 (2013).</li>
<li>Nguyen-Chi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TNF+signaling+and+macrophages+govern+fin+regeneration+in+zebrafish+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Dis%22%5BJournal%5D)">TNF signaling and macrophages govern fin regeneration in zebrafish larvae.</a> Cell Death Dis. 8 (8), e2979-e2979 (2017).</li>
<li>Rosowski, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determining+macrophage+versus+neutrophil+contributions+to+innate+immunity+using+larval+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Dis+Models+Mech%22%5BJournal%5D)">Determining macrophage versus neutrophil contributions to innate immunity using larval zebrafish.</a> Dis Models Mech. 13 (1), dmm041889(2020).</li>
<li>Rebelo de Almeida, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+xenografts+as+a+fast+screening+platform+for+bevacizumab+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Comm+Biol%22%5BJournal%5D)">Zebrafish xenografts as a fast screening platform for bevacizumab cancer therapy.</a> Comm Biol. 3 (1), 1-13 (2020).</li>
<li>Pringle, E. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+zebrafish+xenograft+platform-A+novel+tool+for+modeling+KSHV-associated+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Viruses%22%5BJournal%5D)">The zebrafish xenograft platform-A novel tool for modeling KSHV-associated diseases.</a> Viruses. 12 (1), 12(2020).</li>
<li>Pype, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incubation+at+32.5+%C2%B0C+and+above+causes+malformations+in+the+zebrafish+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Incubation at 32.5 °C and above causes malformations in the zebrafish embryo.</a> Reprod Toxicol. 56, 56-63 (2015).</li>
<li>Xu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adeno-associated+virus+%28AAV%29-based+gene+therapy+for+glioblastoma%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell+Int%22%5BJournal%5D)">Adeno-associated virus (AAV)-based gene therapy for glioblastoma.</a> Cancer Cell Int. 21 (1), 76(2021).</li>
<li>Siebert, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rhabdomyosarcoma+xenotransplants+in+zebrafish+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Pediat+Blood+Cancer%22%5BJournal%5D)">Rhabdomyosarcoma xenotransplants in zebrafish embryos.</a> Pediat Blood Cancer. 70 (1), e30053(2023).</li>
<li>van Bree, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+an+orthotopic+medulloblastoma+zebrafish+model+for+rapid+drug+testing%5BTitle%5D)+AND+%22Neuro-Oncol%22%5BJournal%5D)">Development of an orthotopic medulloblastoma zebrafish model for rapid drug testing.</a> Neuro-Oncol. noae210, (2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Piastra di Petri&nbsp; (10 cm)</td><td>Greiner</td><td>P7237</td><td></td></tr><tr><td>7-AAD soluzione colorante di vitalità&nbsp;</td><td>Invitrogen</td><td>00-6993-50</td><td></td></tr><tr><td>Agarosio (LE, grado analitico)</td><td>Biozym&nbsp;</td><td></td><td></td>840004</tr><tr><td>Iniettore di pressione dell'aria</td><td>Narishige</td><td>IM400</td><td>&nbsp; con alimentazione esterna del gas</td></tr><tr><td>Alexa Fluor&nbsp; 488 anticorpi CD19 anti-umani&nbsp;</td><td>Biolegend</td><td>302219</td><td></td></tr><tr><td>Tampone legante l'annessina</td><td>Biolegend</td><td>422201</td><td>Oppure vedere le soluzioni per la preparazione</td></tr><tr><td>APC annexin V&nbsp;</td><td>Biolegend</td><td>640941</td><td></td></tr><tr><td>Capillari (10 cm, OD 1,0 mm, con filamenti)</td><td>WPIINC</td><td>TW100F-4</td><td>1,0 OD; 0,75 ID</td></tr><tr><td>Pallone per colture cellulari (T-175)</td><td>Sarstedt</td><td>83,39,12,002</td><td></td></tr><tr><td>CellTrace Violet&nbsp;</td><td>Invitrogen</td><td>C34557</td><td></td></tr><tr><td>Dimetilsolfossido (DMSO)</td> <td>Roth</td><td>A994.1</td><td></td></tr><tr><td>Dispasi II</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D4693-1g</td><td></td></tr><tr><td>DNase I</td><td>AppliChem GmbH</td><td>A3778</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorf tubes (1,5 ml)</td><td>Eppendorf</td><td>30120086</td><td></td></tr><tr><td>FACS tube (Polistirene bottone rotondo Tube with Cell strainer Cap, 5 ml)</td><td>Falcon</td><td>352235</td><td></td></tr><tr><td>Falcon tubes (50 ml)</td><td>Falcon</td><td>352070</td><td></td></tr><tr><td>Siero fetale di vitello (FCS)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>C8056</td><td></td></tr><tr><td>Filtro a maglia fine&nbsp;( 10 &micro; m)</td><td>PluriStrainer</td><td>435001050</td><td></td></tr><tr><td>Filtro a maglia fine&nbsp;( 20 &micro; m)</td><td>PluriStrainer</td><td>431002040</td><td></td></tr><tr><td>Citometro a flusso&nbsp;</td><td>Becton Dickinson</td><td>BD LSRFortessa X-20</td><td></td></tr><tr><td>Stereomicroscopio fluorescente</td><td>Leica</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stereomicroscopio fluorescente con fotocamera</td><td>Leica</td><td>M165 FC</td><td>Fotocamera: DFC7000 T</td></tr><tr><td>Hank' s Soluzione salina bilanciata (HBSS, senza calcio e magnesio</td>) Stampo ad iniezione <td>Sigma Aldrich</td><td>88284</td><td></td></tr><tr><td>(Zebrafish MI / Transplant KIT)</td> <td>World Precision Instruments&nbsp;</td><td>Z-MOLDS</td><td></td></tr><tr><td>Aghi per iniezione (senza filamento)</td><td>Strumenti biomedici</td><td>VZIPbl-20-10-55</td><td>Pipetta per iniezione di pesce zebra, smussata, OD: 20&mu; m &plusmn; 1, TL:~10mm, PL: 55mm, Vetro: BM100T-10P</td></tr><tr><td>Macro-centrifuga</td><td>Eppendorf</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Micro-centrifuga</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Morpholino (csf3r)</td><td>Gene Tools LLC</td><td>csf3r (GAAGCACAAGCGA GACGGATGCCA)</td><td></td></tr><tr><td>Morpholino (spi1)</td><td>Gene Tools LLC</td><td>spi1(GATATACTGATAC TCCATTGGTGGT)</td><td></td></tr><tr><td>Papaina</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P3125</td><td></td></tr><tr><td>Penicillina-Streptomicina (Penstrep; 10.000&nbsp; U/ml)</td>Piastre <td>15140122</td><td></td> <td>Gibco</td></tr><tr><td>(4 pozzetti)</td><td>Greiner Bio one&nbsp;</td><td>657160</td><td></td></tr><tr><td>Piastre (96 pozzetti)</td><td>Greiner Bio one</td><td>657180</td><td></td></tr><tr><td>Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640</td><td>Gibco</td> medio <td>21875-034</td><td></td></tr><tr><td>Tricaina&nbsp; (MS-222)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>E10521-50G</td><td>Ethy-3 aminobenzoato metansolfenato</td></tr></tbody></table>

previsione rapida della risposta ai farmaci in vivo utilizzando innesti di cellule leucemiche in embrioni di zebrafish

Rapid in vivo Drug Response Prediction Using Leukemia Cell Grafts in Zebrafish Embryos

Per una valutazione scientifica dettagliata del protocollo ZefiX, compreso lo xenotrapianto e il trattamento farmacologico di campioni di cellule primarie BCP-ALL appena congelate, fare riferimento al manoscritto21 precedentemente pubblicato. L'approvazione per l'uso di campioni di pazienti nella ricerca per la sperimentazione preclinica di farmaci è stata concessa nell'ambito di studi aggiuntivi allo studio ALL-REZ BFM 2002 (NCT00114348) e al registro e alla biobanca ALL-REZ BFM (EA2/055/12) dai ...

Previsione rapida della risposta ai farmaci in vivo utilizzando innesti di cellule leucemiche in embrioni di zebrafish

Zebrafish xenotransplantation is a pivotal technique for investigating human cancer pathogenesis and predicting individual drug responses. This document ...

rapid-vivo-drug-response-prediction-using-leukemia-cell-grafts

Research

Ricerca

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Ricerca sul cancro

Limitare i test di diluizione trapianto di cellule vengono utilizzati per determinare la frequenza di tumore di moltiplicazione delle cellule. Questo protocollo descrive un metodo per la generazione di zebrafish singenici che sviluppano leucemia fluorescenza-etichettati e dettagli su come isolare e trapianto di queste cellule di leucemia a limitare la diluizione nella cavità peritoneale di zebrafish adulti.

Quantificare la frequenza di tumori di moltiplicazione celle usando Limitare trapianto di cellule Diluizione in Singenico Zebrafish

Qui, presentiamo un protocollo per il trapianto cellulare del muscolo scheletrico del pesce zebra e del rabdomiosarcoma embrionale (ERMS) in un pesce zebra adulto immune compromesso rag2E450fs omozigote mutante. Questo protocollo consente l'analisi efficiente della rigenerazione e della trasformazione maligna delle cellule muscolari.

Normali e maligne trapianto muscolare cellulare in immunitario compromesso Zebrafish adulti

Questo metodo utilizza zebrafish embrioni per testare efficacemente la capacità invasiva vascolare delle cellule tumorali. le cellule tumorali fluorescenti sono iniettati nel precardiac seno o il sacco vitellino di embrioni in via di sviluppo. invasione vascolare delle cellule tumorali e stravaso è valutata mediante microscopia a fluorescenza della regione di coda 24-96 ore più tardi.

Testare la capacità vascolare invasiva delle cellule tumorali in Zebrafish (<em&gt; Danio Rerio</em&gt;)

Il trapianto di cellule tumorali è un importante strumento per l'identificazione dei meccanismi del cancro e delle risposte terapeutiche. Le tecniche correnti dipendono dagli animali immuno-incompetenti. Qui descriviamo un metodo per il trapianto di cellule tumorali di zebrafish in embrioni immuni-competenti per l'analisi a lungo termine del comportamento delle cellule tumorali e delle risposte in vivo .

Il trapianto di tumori del cervello pediatrico di Zebrafish in ospedali immunitario-competenti per uno studio a lungo termine del comportamento della cellula tumorale e della risposta ai farmaci

Gli embrioni di pesce zebra vengono utilizzati per valutare la tossicità dei composti chimici. Si sviluppano esternamente e sono sensibili alle sostanze chimiche, consentendo il rilevamento di sottili cambiamenti fenotipici. L'esperimento richiede solo una piccola quantità di composto, che viene aggiunto direttamente alla piastra contenente embrioni, rendendo il sistema di test efficiente e conveniente.

Rapida valutazione della tossicità dei composti chimici utilizzando gli embrioni di pesce zebra

Questo protocollo descrive le procedure di ottimizzazione in un modello di xenotrapianto tumorale a doppia fluorescenza basato su virus utilizzando il pesce zebra larva come ospiti. Questo modello xenotrapianto eterogeneo imita la composizione tissutale del microambiente del cancro al pancreas in vivo e funge da strumento più preciso per valutare le risposte ai farmaci in modelli personalizzati zPDX (zebrafish patient-derived xenogrft).

Modello Xenotrapianto eterogeneo derivato dal paziente del cancro pancreatico utilizzando larve di pesce zebra come ospiti per la valutazione comparativa del farmaco

Lo scopo di questo metodo è quello di generare un modello in vivo di angiogenesi tumorale xenotrapianto di cellule tumorali dei mammiferi in un embrione di pesce zebra che ha vasi sanguigni etichettati fluorescentmente. Esaminando lo xenotrapianto e i vasi associati, è possibile ottenere una misurazione quantitativa della risposta angiogenica.

Imaging in vivo e quantitazione dell'ospite risposta angiogenica in Xenogrfts tumore zebrati

I modelli di xenotrapianto di pesce zebra consentono lo screening farmacologico ad alto consumo e l'imaging fluorescente delle cellule tumorali umane in un microambiente in vivo. Abbiamo sviluppato un flusso di lavoro per lo screening automatizzato dei farmaci su su larga scala su campioni di leucemia derivati dal paziente nel pesce zebra utilizzando un'unità di imaging dotata di microscopio a fluorescenza automatizzata.

Screening farmacologico del paziente primario - Tumore derivato Xenotrapianto nel pesce zebra

Qui, forniamo un protocollo passo-passo, con suggerimenti per generare xenografti e linee guida per l'analisi del comportamento tumorale, l'immunofluorescenza a montaggio intero e la quantificazione dell'imaging confocale.

Generazione di xenografti larvali zebrafish e analisi del comportamento tumorale

Descriviamo un protocollo per lo xenotrapianto nel tuorlo di embrioni trasparenti di zebrafish ottimizzato con un metodo di stadiazione semplice e rapido. Le analisi post-iniezione includono la sopravvivenza e la valutazione del carico di malattia delle cellule xenotrapiantate mediante citometria a flusso.

Un metodo semplice, rapido ed efficace per l'analisi dello xenotrapianto tumorale in embrioni trasparenti di zebrafish

Abbiamo utilizzato la colorazione della proliferazione cellulare per identificare le cellule quiescenti nel modello di leucemia linfoblastica acuta T di zebrafish. La colorazione viene trattenuta nelle cellule non in divisione e ridotta durante la proliferazione cellulare, consentendo la selezione delle cellule dormienti per ulteriori interrogatori. Questo protocollo fornisce uno strumento funzionale allo studio dell'autorinnovamento nel contesto della quiescenza cellulare.

Identificazione di cellule quiescenti in un modello di leucemia linfoblastica acuta a cellule T di pesce zebra mediante colorazione della proliferazione cellulare 

Scopri un protocollo rapido di sette giorni per valutare la risposta ai farmaci nella leucemia linfoblastica acuta utilizzando xenotrapianti in embrioni di zebrafish. Questo metodo offre un modello preclinico efficace per la ricerca oncologica pediatrica.

Previsione rapida della risposta ai farmaci in vivo utilizzando innesti di cellule leucemiche in embrioni di zebrafish

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