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DOI: 10.3791/67451-v
Sophia Sartorius1, Luca Bramè1,2, Jutta Proba1, Anton Gauert1, Nadine Olk1, Juan Lazaro1, Angelika Eggert1, Cornelia Eckert1, Anja H. Hagemann1,2
1Charité-Universitätsmedizin Berlin, Klinik für Pädiatrie m.S. Onkologie/Hämatologie, 2German Cancer Consortium (DKTK), partner site Berlin, and German Cancer Research Center (DKFZ)
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol outlines a rapid seven-day workflow for assessing drug responses in human acute lymphoblastic leukemia (ALL) using zebrafish embryos. It details the generation of xenografts from patient-derived leukemia cells and provides insights into adapting the method for solid tumors.
Questo protocollo fornisce istruzioni dettagliate per la generazione e la risoluzione dei problemi di xenotrapianti di leucemia linfoblastica acuta umana (ALL) da linee cellulari e materiale fresco del paziente in embrioni di zebrafish transitoriamente immunosoppressi, insieme a linee guida per la valutazione della risposta ai farmaci mediante citometria a flusso. La pipeline sperimentale può essere adattata anche per i tumori solidi.
Abbiamo sviluppato un flusso di lavoro rapido di sette giorni per testare come le cellule tumorali rispondono ai farmaci utilizzando embrioni di zebrafish. Essendo vicini all'oncologia pediatrica, abbiamo accesso a campioni di cancro rari e abbiamo iniziato con la leucemia precursore delle cellule B, ma ora stiamo adottando il protocollo per i tumori pediatrici solidi per vedere se il test funzionerebbe anche in ambito clinico. Siamo in grado di far crescere con successo cellule leucemiche derivate da pazienti in embrioni di zebrafish, il che li rende un modello preclinico formidabile.
Tuttavia, la farmacocinetica può essere complicata, poiché alcuni farmaci faticano a superare le barriere biologiche e quindi ci assicuriamo di testare la penetrazione prima di iniziare gli esperimenti. Il nostro approccio è unico perché blocca la differenziazione delle cellule immunitarie innate, che aiuta le cellule del trapianto della leucemia a sopravvivere meglio. Inoltre, stiamo utilizzando la citometria a flusso per misurare la vitalità e la proliferazione di singole cellule in cellule di innesto in pool di 10 pesci ospiti.
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