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Cancer Research
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JoVE Journal Cancer Research
Rapid in vivo Drug Response Prediction Using Leukemia Cell Grafts in Zebrafish Embryos

Previsione rapida della risposta ai farmaci in vivo utilizzando innesti di cellule leucemiche in embrioni di zebrafish

Full Text
1,029 Views
10:46 min
May 23, 2025

DOI: 10.3791/67451-v

Sophia Sartorius1, Luca Bramè1,2, Jutta Proba1, Anton Gauert1, Nadine Olk1, Juan Lazaro1, Angelika Eggert1, Cornelia Eckert1, Anja H. Hagemann1,2

1Charité-Universitätsmedizin Berlin, Klinik für Pädiatrie m.S. Onkologie/Hämatologie, 2German Cancer Consortium (DKTK), partner site Berlin, and German Cancer Research Center (DKFZ)

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This protocol outlines a rapid seven-day workflow for assessing drug responses in human acute lymphoblastic leukemia (ALL) using zebrafish embryos. It details the generation of xenografts from patient-derived leukemia cells and provides insights into adapting the method for solid tumors.

Key Study Components

Area of Science

  • Oncology
  • Pharmacology
  • Preclinical Models

Background

  • Human acute lymphoblastic leukemia (ALL) is a pediatric cancer.
  • Zebrafish embryos serve as a unique preclinical model for studying cancer.
  • Access to rare cancer samples enhances the relevance of the study.
  • Drug penetration and pharmacokinetics are critical for effective treatment assessment.

Purpose of Study

  • To develop a protocol for generating xenografts from ALL and solid tumors.
  • To evaluate drug responses in a clinically relevant model.
  • To improve the survival of graft cells by blocking immune differentiation.

Methods Used

  • Generation of xenografts from cell lines and fresh patient material.
  • Transient immunosuppression of zebrafish embryos.
  • Flow cytometry for assessing single cell viability and proliferation.
  • Testing drug penetration before experimental trials.

Main Results

  • Successful growth of patient-derived leukemia cells in zebrafish.
  • Adaptation of the protocol for solid pediatric tumors.
  • Effective measurement of drug responses using flow cytometry.
  • Improved graft cell survival through immune cell differentiation blockade.

Conclusions

  • The zebrafish model is a promising tool for pediatric oncology research.
  • Drug response assessment can be effectively conducted in this model.
  • Future studies may expand to other types of pediatric tumors.

Frequently Asked Questions

What types of cancer can be studied using this protocol?
This protocol is designed for human acute lymphoblastic leukemia (ALL) and can be adapted for solid pediatric tumors.
How does the zebrafish model benefit cancer research?
Zebrafish embryos provide a unique preclinical model that allows for the study of drug responses in a living organism.
What is the significance of using flow cytometry in this study?
Flow cytometry allows for precise measurement of single cell viability and proliferation, which is crucial for assessing drug responses.
Why is pharmacokinetics important in this research?
Understanding pharmacokinetics ensures that drugs can effectively penetrate biological barriers to reach the target cells.
What is the duration of the experimental workflow?
The experimental workflow is designed to be completed in seven days.
How does the protocol address immune cell differentiation?
The protocol includes methods to block innate immune cell differentiation, enhancing the survival of graft cells.

Questo protocollo fornisce istruzioni dettagliate per la generazione e la risoluzione dei problemi di xenotrapianti di leucemia linfoblastica acuta umana (ALL) da linee cellulari e materiale fresco del paziente in embrioni di zebrafish transitoriamente immunosoppressi, insieme a linee guida per la valutazione della risposta ai farmaci mediante citometria a flusso. La pipeline sperimentale può essere adattata anche per i tumori solidi.

Abbiamo sviluppato un flusso di lavoro rapido di sette giorni per testare come le cellule tumorali rispondono ai farmaci utilizzando embrioni di zebrafish. Essendo vicini all'oncologia pediatrica, abbiamo accesso a campioni di cancro rari e abbiamo iniziato con la leucemia precursore delle cellule B, ma ora stiamo adottando il protocollo per i tumori pediatrici solidi per vedere se il test funzionerebbe anche in ambito clinico. Siamo in grado di far crescere con successo cellule leucemiche derivate da pazienti in embrioni di zebrafish, il che li rende un modello preclinico formidabile.

Tuttavia, la farmacocinetica può essere complicata, poiché alcuni farmaci faticano a superare le barriere biologiche e quindi ci assicuriamo di testare la penetrazione prima di iniziare gli esperimenti. Il nostro approccio è unico perché blocca la differenziazione delle cellule immunitarie innate, che aiuta le cellule del trapianto della leucemia a sopravvivere meglio. Inoltre, stiamo utilizzando la citometria a flusso per misurare la vitalità e la proliferazione di singole cellule in cellule di innesto in pool di 10 pesci ospiti.

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Cancer Research Numero 219 Leucemia linfoblastica acuta embrione di zebrafish xenotrapianto xenotrapianto modello animale preclinico cancro test farmacologici citometria a flusso

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