Imaging multiplex a immunofluorescenza basato su codice a barre del DNA per analizzare campioni FFPE da melanoma murino geneticamente riprogrammato

Presentiamo un protocollo per lo sviluppo e la validazione di un pannello di immunofluorescenza multiplex per studiare i tessuti FFPE di topo e dimostriamo la sua utilità studiando campioni da un modello di melanoma trattato con nanoparticelle che rilasciano DNA plasmatico, codificando segnali immunologici per la riprogrammazione del microambiente tumorale. Nel campo mancavano protocolli di immunofluorescenza multiplex rigorosamente sviluppati e convalidati compatibili con i tessuti FFPE di topo fissati in formalina e inclusi in paraffina.

L'inclusione di paraffina fissata in formalina preserva la morfologia dei tessuti a lungo termine, è facile da maneggiare e conservare e consente la creazione di microarray di tessuti per la visualizzazione di più campioni su un singolo vetrino.