Name: Test riproducibile di migrazione del glioblastoma 3D con localizzazione sferoide mediata da nanoparticelle magnetiche in condizioni ipossiche (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-05-12T13:10:00.000+00:00
Duration: 7 min 55 s
Description: Scopri un test di migrazione 3D riproducibile per il glioblastoma usando nanoparticelle magnetiche e condizioni ipossiche. Questo metodo consente l'analisi automatizzata dell'invasività tumorale.

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<ol><li>Singh, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glioblastoma+at+the+crossroads%3A+Current+understanding+and+future+therapeutic+horizons%5BTitle%5D)+AND+%22Signal+Transduct+Target+Ther%22%5BJournal%5D)">Glioblastoma at the crossroads: Current understanding and future therapeutic horizons.</a> Signal Transduct Target Ther. 10 (1), 213(2025).</li>
<li>Spitzer, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deciphering+the+longitudinal+trajectories+of+glioblastoma+ecosystems+by+integrative+single-cell+genomics%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Genet%22%5BJournal%5D)">Deciphering the longitudinal trajectories of glioblastoma ecosystems by integrative single-cell genomics.</a> Nat Genet. 57 (5), 1168-1178 (2025).</li>
<li>Dirkse, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+cell-associated+heterogeneity+in+glioblastoma+results+from+intrinsic+tumor+plasticity+shaped+by+the+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Stem cell-associated heterogeneity in glioblastoma results from intrinsic tumor plasticity shaped by the microenvironment.</a> Nat Commun. 10 (1), 1787(2019).</li>
<li>Dejaegher, J., De Vleeschouwer, S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDejaegher%2C+J+%22Glioblastoma%22">Glioblastoma</a>. De Vleeschouwer, S. , Brisbane (AU). (2017).</li>
<li>Restall, I., Bozek, D. A., Chesnelong, C., Weiss, S., Luchman, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live-cell+imaging+assays+to+study+glioblastoma+brain+tumor+stem+cell+migration+and+invasion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Live-cell imaging assays to study glioblastoma brain tumor stem cell migration and invasion.</a> J Vis Exp. (138), e58152(2018).</li>
<li>Xie, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+human+glioblastoma+cell+culture+resource%3A+Validated+cell+models+representing+all+molecular+subtypes%5BTitle%5D)+AND+%22EBioMedicine%22%5BJournal%5D)">The human glioblastoma cell culture resource: Validated cell models representing all molecular subtypes.</a> EBioMedicine. 2 (10), 1351-1363 (2015).</li>
<li>Paolillo, M., Comincini, S., Schinelli, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+glioblastoma+models%3A+A+journey+into+the+third+dimension%5BTitle%5D)+AND+%22Cancers+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">In vitro glioblastoma models: A journey into the third dimension.</a> Cancers (Basel). 13 (10), 2449(2021).</li>
<li>Aye, K. T. N., Ferreira, J. N., Chaweewannakorn, C., Souza, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+the+application+of+iron+oxide+nanoparticles+%28ions+and+spions%29+in+three-dimensional+cell+culture+systems%5BTitle%5D)+AND+%22SLAS+Technol%22%5BJournal%5D)">Advances in the application of iron oxide nanoparticles (ions and spions) in three-dimensional cell culture systems.</a> SLAS Technol. 29 (3), 100132(2024).</li>
<li>Das, V., Furst, T., Gurska, S., Dzubak, P., Hajduch, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproducibility+of+uniform+spheroid+formation+in+384-well+plates%3A+The+effect+of+medium+evaporation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomol+Screen%22%5BJournal%5D)">Reproducibility of uniform spheroid formation in 384-well plates: The effect of medium evaporation.</a> J Biomol Screen. 21 (9), 923-930 (2016).</li>
<li>Das, V., Furst, T., Gurska, S., Dzubak, P., Hajduch, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaporation-reducing+culture+condition+increases+the+reproducibility+of+multicellular+spheroid+formation+in+microtiter+plates%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Evaporation-reducing culture condition increases the reproducibility of multicellular spheroid formation in microtiter plates.</a> J Vis Exp. (121), e55403(2017).</li>
<li>Mansoury, M., Hamed, M., Karmustaji, R., Al Hannan, F., Safrany, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+edge+effect%3A+A+global+problem.+The+trouble+with+culturing+cells+in+96-well+plates%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Rep%22%5BJournal%5D)">The edge effect: A global problem. The trouble with culturing cells in 96-well plates.</a> Biochem Biophys Rep. 26, 100987(2021).</li>
<li>Zanoni, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3d+tumor+spheroid+models+for+in+vitro+therapeutic+screening%3A+A+systematic+approach+to+enhance+the+biological+relevance+of+data+obtained%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">3d tumor spheroid models for in vitro therapeutic screening: A systematic approach to enhance the biological relevance of data obtained.</a> Sci Rep. 6, 19103(2016).</li>
<li>Schindelin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fiji%3A+An+open-source+platform+for+biological-image+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Fiji: An open-source platform for biological-image analysis.</a> Nat Methods. 9 (7), 676-682 (2012).</li>
<li>Arganda-Carreras, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trainable+weka+segmentation%3A+A+machine+learning+tool+for+microscopy+pixel+classification%5BTitle%5D)+AND+%22Bioinformatics%22%5BJournal%5D)">Trainable weka segmentation: A machine learning tool for microscopy pixel classification.</a> Bioinformatics. 33 (15), 2424-2426 (2017).</li>
<li>Sayde, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproducible+3d+culture+of+multicellular+tumor+spheroids+in+supramolecular+hydrogel+from+cancer+stem+cells+sorted+by+sedimentation+field-flow+fractionation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chromatogr+A%22%5BJournal%5D)">Reproducible 3d culture of multicellular tumor spheroids in supramolecular hydrogel from cancer stem cells sorted by sedimentation field-flow fractionation.</a> J Chromatogr A. 1736, 465393(2024).</li>
<li>Lee, S., Lim, J., Kwak, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Factors+of+bias+in+spheroid-based+drug+screening%3A+Fabrication+method%2C+spheroid+size%2C+and+cell+viability%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Factors of bias in spheroid-based drug screening: Fabrication method, spheroid size, and cell viability.</a> Biomed Pharmacother. 192, 118597(2025).</li>
<li>Aisenbrey, E. A., Murphy, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthetic+alternatives+to+matrigel%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mater%22%5BJournal%5D)">Synthetic alternatives to matrigel.</a> Nat Rev Mater. 5 (7), 539-551 (2020).</li>
<li>Barbugian, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioresponsive+hyaluronic+acid-based+hydrogel+inhibits+matrix+metalloproteinase-2+in+glioblastoma+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22ChemMedChem%22%5BJournal%5D)">Bioresponsive hyaluronic acid-based hydrogel inhibits matrix metalloproteinase-2 in glioblastoma microenvironment.</a> ChemMedChem. 20 (15), e202401040(2025).</li>
<li>Carvalho, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Viscoelastic+high-molecular-weight+hyaluronic+acid+hydrogels+support+rapid+glioblastoma+cell+invasion+with+leader-follower+dynamics%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Mater%22%5BJournal%5D)">Viscoelastic high-molecular-weight hyaluronic acid hydrogels support rapid glioblastoma cell invasion with leader-follower dynamics.</a> Adv Mater. 36 (50), e2404885(2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>KIT DI BIOSTAMPA A 96 POZZI, TRASPARENTE</td><td>Greiner</td><td>655840</td><td></td></tr><tr><td>Accutase</td><td>Invitrogen</td><td>00-4555-56</td><td>n/a</td></tr><tr><td>Supplemento B-27 (50X), siero e nbsp; Gratis senza vitamina A</td><td>Gibco</td><td>12587010</td><td>10%</td></tr><tr><td>Fattore di crescita dei fibroblasti di base, umano e nbsp; (bFGF)</td><td>PeproTech</td><td>100-18B</td><td>20&nbsp; ng/ml</td></tr><tr><td>Celldiscoverer&nbsp; 7</td><td>Zeiss</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Micropiastre sferoidi di Corning</td><td>Corning</td><td>CLS4515</td><td></td></tr><tr><td>Matrice di Matrigel di Corning</td><td>Corning</td><td>354234</td><td>Diluizione finale 1:100</td></tr><tr><td>Contatore Automatico delle Celle della Contessa</td><td>Invitrogen</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>DMEM-F12&nbsp; (500ml)</td><td>Termofischer</td><td>11320-074</td><td>n/a</td></tr><tr><td>Fattore di Crescita Epidermica Umana (EGF)</td><td>PeproTech</td><td>AF-100-15</td><td>20&nbsp; ng/ml</td></tr><tr><td>FITC Mouse Anti-Human CD44</td><td>BD Pharmingen</td><td>555478</td><td>1:100</td></tr><tr><td>Micropiastre di coltura cellulare in polistirene a 96 pozzi Greiner CELLSTAR con F-fondo/Camino e micropiastre Trasparente, nero, TC, sterile, con coperchio</td><td>Greiner</td><td>655090</td><td></td></tr><tr><td>Eparina</td><td>Termofischer</td><td>A16198</td><td>5&micro; g/ml</td></tr><tr><td>Hoechst 33258</td><td>&nbsp; Sigma Aldrich (Merck)</td><td>861405</td><td>1&micro; g/ml</td></tr><tr><td>NanoShuttle-PL</td><td>Greiner</td><td>657841</td><td>1,5&nbsp; & micro; 1/10.000 celle</td></tr><tr><td>Penicillina - Streptomycina</td><td>Merck</td><td>P4333</td><td>1%</td></tr></tbody></table>

test riproducibile di migrazione del glioblastoma 3d con localizzazione sferoide mediata da nanoparticelle magnetiche in condizioni ipossiche

Reproducible 3D Glioblastoma Migration Assay with Magnetic Nanoparticle Mediated Spheroid Localization Under Hypoxic Conditions

Test riproducibile di migrazione del glioblastoma 3D con localizzazione sferoide mediata da nanoparticelle magnetiche in condizioni ipossiche

We describe a reproducible 3D migration assay to model the migratory and invasive potential of patient-derived glioblastoma gliomaspheres from newly ...

reproducible-3d-glioblastoma-migration-assay-with-magnetic

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Ricerca sul cancro

Fonte: Guyon, J., et al. Un modello sferoidale 3D per il glioblastoma. J. Vis. Exp. (2020)Il video dimostra la generazione di un modello sferoidale tridimensionale dell'invasione delle cellule tumorali. Gli sferoidi sono formati da cellule tumorali cerebrali umane e incorporati in una matrice di collagene. Le cellule tumorali alla periferia sferoidale adottano un fenotipo invasivo, secernendo proteasi per degradare il collagene e avanzando per invadere la matrice circostante.

Generazione di un modello sferoidale tridimensionale dell'invasione delle cellule tumorali

Fonte: Pericoli, G. et. al., Saggi di immunocitochimica a cellule 3D vive del glioma diffuso della linea mediana pediatrica. J. Vis. Exp. (2021)Questo video mostra l'imaging di cellule vive per osservare la migrazione delle cellule di glioma diffuso della linea mediana pediatrica utilizzando la marcatura immunoistochimica con anticorpi anti-CD44.

Imaging basato sull'immunocitochimica per la visualizzazione della migrazione delle cellule di glioma pediatrico

L'invasione dei tessuti normali circostanti è una caratteristica distintiva dei tumori maligni. Forniamo qui un semplice saggio semi-automatico su micropiastra dell'invasione in una biomatrice 3D naturale che è stata esemplificata con una serie di modelli di tumori umani avanzati.

Tridimensionale (3D) Tumore Spheroid Invasion Assay

Qui, un metodo è descritto per la preparazione di co-coltura 3-dimensionale della sferoide (3D) delle cellule di cancro del pancreas e dei fibroblasti, seguiti dalla misura delle funzioni metaboliche utilizzando un analizzatore di flusso extracellulare.

Preparazione e dosaggio metabolica della sferoide 3-dimensionale co-colture di cellule di cancro del pancreas e dei fibroblasti

Qui, descriviamo le tecniche di imaging di cellule vive per misurare quantitativamente la migrazione e l'invasione delle cellule staminali tumorali di glioblastoma del cervello nel corso del tempo e sotto condizioni multiple di trattamento.

Analisi Live Cell Imaging Studio Glioblastoma cerebrale tumore cellule staminali migrazione e invasione

Gli effetti degli inibitori migrastatici sulla migrazione delle cellule tumorali del glioma nei saggi di invasione tridimensionale (3D) utilizzando un inibitore della deacetylasi istone (HDAC) sono caratterizzati da microscopia confocale ad alta risoluzione.

Caratterizzazione degli effetti degli inibitori espastatici sull'invasione 3D dello spheroid del tumore mediante microscopia confocale ad alta risoluzione

La microdissezione laser (LMD) è una tecnica sensibile e altamente riproducibile che può essere utilizzata per scoprire percorsi che mediano l'eterogeneità e l'invasione del glioma. Qui, descriviamo un protocollo ottimizzato per isolare le aree discrete dal tessuto glioma utilizzando LMD laser seguito da analisi trascrittomica.

Microdissezione di cattura laser delle sottoregioni del Glioma per la caratterizzazione spaziale e molecolare dell'eterogeneità intratutuale, dell'Oncoflusso e dell'invasione

Qui, descriviamo un assaggio di invasione facile da usare per il glioblastoma. Questo test è adatto per cellule staminali del glioblastoma. Viene descritta anche una macro Fiji per una facile quantificazione dell'invasione, della migrazione e della proliferazione.

Un modello spheroid 3D per Glioblastoma

Qui presentiamo un saggio di co-coltura facile da usare per analizzare la migrazione del glioblastoma (GBM) sui neuroni modellati. Abbiamo sviluppato una macro nel software FiJi per una facile quantificazione della migrazione cellulare GBM sui neuroni, e abbiamo osservato che i neuroni modificano la capacità invasiva delle cellule GBM.

Co-coltura di cellule simili a staminali di glioblastoma su neuroni modellati per studiare la migrazione e le interazioni cellulari

Qui, stabiliamo una piattaforma di profilazione metabolica che integra gliomi sferoidi tridimensionali (3D) e normalizzazione basata sull'imaging tramite analisi del flusso extracellulare. Questo approccio consente una valutazione più accurata delle risposte metaboliche dei tumori ai trattamenti farmacologici e fornisce informazioni sui potenziali meccanismi di resistenza.

Progressi nella profilazione metabolica degli sferoidi tridimensionali dei tumori cerebrali per lo screening dei farmaci

Scopri un test di migrazione 3D riproducibile per il glioblastoma usando nanoparticelle magnetiche e condizioni ipossiche. Questo metodo consente l'analisi automatizzata dell'invasività tumorale.

Test riproducibile di migrazione del glioblastoma 3D con localizzazione sferoide mediata da nanoparticelle magnetiche in condizioni ipossiche (Video) | JoVE Journal

Test riproducibile di migrazione del glioblastoma 3D con localizzazione sferoide mediata da nanoparticelle magnetiche in condizioni ipossiche

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