方法論記事

RNAまたは特定の脳領域からのタンパク質抽出用のラット脳の微小解剖

DOI：

10.3791/269

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2007年8月30日

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1Laboratory of Neurodegenerative Diseases, Department of Anatomy, LKS Faculty of Medicine, The University of Hong Kong - HKU

この記事について

サマリー

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様々な地域へのラット脳の微小解剖は、さまざまな神経変性疾患の研究のために極めて重要である。このビデオは4つの主要な脳領域の顕微解剖を示すことは新鮮なラット脳組織における嗅球、前頭皮質、線条体と海馬を含む。組織のRNAとタンパク質の分解を避けるために、それぞれの地域の迅速な除去のための有用なヒントが与えられている。

要約

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様々な地域へのラット脳の微小解剖は、さまざまな神経変性疾患の研究のために極めて重要である。このビデオは4つの主要な脳領域の顕微解剖を示すことは新鮮なラット脳組織における嗅球、前頭皮質、線条体と海馬を含む。組織のRNAとタンパク質の分解を避けるために、それぞれの地域の迅速な除去のための有用なヒントが与えられている。

プロトコル

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ステップ1

確立されたプロトコールに従って、ラットを生け贄に捧げる。頭蓋骨から脳を取り出して、表面の血液を除去するために、氷冷DEPC処理ミリQ水ですすいでください。

ステップ2

冷たい金属板の上に置きます。右と左半球に脳双方向の半分をカット。

figure-protocol-1

図1。ラットの半球の内側から見たカット位置

ステップ3

右の最初のカットの後に嗅球を収集する。 Flashは-80液体窒素とストア内の試料を凍結℃を

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図2。嗅球の解剖

ステップ4

ブレードとデュモン5号鉗子を使用して、二番刈り後に前頭皮質の右側を収集する。 Flashは-80液体窒素とストア内の試料を凍結℃を

figure-protocol-3

図3。前頭皮質の解剖

ステップ5

右に2デュモン5号鉗子の助けで3カット後の線条体（尾状核）を収集する。 Flashは-80液体窒素とストア内の試料を凍結℃を

figure-protocol-4

図4。線条体（尾状核）解剖

ステップ6

海馬を収集するには、最高の脳の腹側を配置し、海馬を公開する中脳を取り除く。 twoデュモン5号鉗子を用いて皮質から海馬を解剖。 Flashは-80液体窒素とストア内の試料を凍結℃を

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図5。海馬の解剖

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ディスカッション

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異なる脳の領域は異なる神経変性疾患に関連付ける。海馬はアルツハイマー病と関係しながら例えば、前頭皮質および線条体はパーキンソン病に関係する。脳の精密なマイクロダイセクションでは、私たちはより正確に病気の地域のmRNAと蛋白質の変化を検出することができます。

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開示事項

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動物は、香港の大学の教育と研究の生きた動物の使用（CULATR）に委員会によって承認され、動物用健康ガイドラインの国立研究所によると研究における動物の使用のためのプロトコルに従って処理されていました。

材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
顕微鏡オリンパス株式会社
解剖器具金属プレート、ピンセット、メスなど。RNaseを除去するため、それぞれアルミホイルで包み180oCで8時間加熱。使用前に氷上で冷却した。

参考文献

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Palkovits, M. Maps and guide to micro-dissection of the rat brain. , Elsevier. New York. (c.1988).
  2. Swanson, L. W. Brain maps: structure of the rat brain. 3rd revised edition. , Elsevier Academic Press. (2004).

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タグ

RNA

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