げっ歯類で心的外傷後てんかん原のアンダーカットモデルを準備

サマリー

部分的に分離された皮質が（"アンダーカット"）外傷後てんかんの効率的な動物モデルである。ここでは、新たな外科手術デバイスを作成し、このモデルを生成するために、より正確で一貫性のある病変を作ってそれを使用する方法を示します。

要約

部分的に分離された皮質が（"アンダーカット"）外傷後てんかんの動物モデルである。外科手術は大脳皮質の特定領域は、主に隣接する皮質と^1-3皮質下の領域から分離されるように（アンダーカット）の白質の下に感覚運動皮質を切開して行います。手術後2週間以上の待ち時間の後に、てんかん様放電は、げっ歯類¹からの脳切片に記録することができ、電気的または行動発作は、ネコやサル^4-6と他の種からin vivoで観察することができます。この確立された動物モデルは、生成するために効率的ですし、外傷性脳損傷のいくつかの重要な特徴を模倣しています。しかし、それは技術的にフリーハンドを持つ小型の齧歯類の脳で正確な皮質病変を作るしようと挑戦している。最初にスタンフォード大学¹でデビッドプリンスの研究室で確立された手順に基づいて、ここで我々はマウスおよびラットにおけるこのモデルの準備のための手術を実行するための改良手法を提案。我々は単純な手術装置を作ると、より正確で一貫性のある結果を生成するために深さと角度を切るのよりよい制御を得るためにそれを使用する方法を示します。デバイスは、作るのは簡単です、と手順を学ぶために迅速です。この動物モデルの生成は、外傷後てんかん発生のメカニズムに関する研究のための効率的なシステムを提供します。

プロトコル

1。アンダーカット手術のためのシンプルなデバイスを作る

1. 我々が作成したアンダーカット装置は三つの部分（図1）で構成されています：誘導管の添付ファイルと針を可能にし、手術中に頭蓋窓を介して座っているステンレススチールまたはプラスチック製（1）支持板（2）位置および許可の針の回転で針を保持する誘導管、および先端から約3 mmに90度曲がっている（3）針、および回転および挿入によって移動可能である。
2. 支持板を作るために厚さ1〜1.5ミリメートルの一部、7〜10 × 30ミリメートルの長方形ステンレス製または透明プラスチック（1）カット。 1.5インチ22ゲージ（BD会社、＃305156）と1.5インチの25ゲージ（BD会社、＃305127）シリンジの針を準備します。誘導管を作るために、プラスチックの端とその合計の長さが31〜32ミリメートル（2）についてになるように22ゲージの注射針の下針の先端を切断。砂、金属の端を、それが平らで滑らかにする。この誘導管の最後の長さは25ゲージの注射針に比べ約5〜6ミリメートル短くしてください。
3. 針は、金属のエッジに対して垂直であることを確認し、支持板の上に誘導管を固定するシアノアクリレート接着剤を使用してください。
4. 誘導管に25ゲージ注射針を挿入し、先端（図1）2.5〜3ミリメートルで針を90度曲げる。
5. 針の上の端（図1、針の停止）に接着する小さなプラスチック製のチューブで針の垂直方向の移動範囲を調整します。針....

ディスカッション

アンダーカットモデルは、心的外傷後てんかんを研究するための非常に効率的なシステムです。典型的な手術が終了するのは約20〜30分かかり、誘発または自発的なてんかん様活動二週間手術^1月2日後にほとんどの動物からのスライスに記録することができます。さらに重要なことは、このモデルでは、出血、炎症、浮腫、軸索切断や神経細胞死⁷などの外傷性脳損傷後の変化の側面を模倣している。だけでなく、てんかん様活動は、げっ歯類や他の動物で観察されているだけでなく、てんかん発作は、同等の皮質病変^8に苦しむヒトで報告されている。大きな進展は近年の基礎となるメカニズムを解明するためになされている。自発、誘発発作てんかん様放電は、> 2週間病変後の脳切片に記録されており、これらの活動は、ラット皮質層V ¹に由来することが見出された。回路の再編成、GABA作動性介在ニューロンと脱抑制の喪失、神経細胞の膜興奮性の増加、および興奮性シナプス結合の増加の証拠はまた、特に皮質層V ^2,9-13で、実証されている。

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
材料名	タイプ	会社	カタログ番号
Foredomマイクロモータキット	機器の	Foredom	K.1070
1.5インチ22ゲージの注射針	材	BDの会社	305156
1.5インチ25ゲージの注射針	材	BDの会社	305127
シアノアクリレート接着剤	材	テッドペラ	14450