ラットの坐骨神経と疼痛過敏テストの慢性的なくびれ

Summary

手術のシンプルかつ堅牢な行動の結果により、坐骨神経の慢性収縮は、神経因性疼痛の卓越した動物モデルの一つです。手術後24時間以内に、疼痛過敏症は、von Freyの角膜知覚計（機械試験）と足鎮痛メーター（温度試験）を使用して確立されており、定量的に測定することができます。

Abstract

慢性の神経因性疼痛は、中枢または末梢神経系への損傷に起因する、人口の^1,2の7から18パーセントに影響を与え、流行と衰弱状態です。症状は、自発的（のようなうずき、燃焼、電気ショック）の痛み、dysaesthesia、感覚異常、アロディニア（痛みは通常は非痛み刺激に起因する）と痛覚過敏を（痛み刺激に対する応答の増加）が含まれています。感覚症状は、不眠やうつ病などの行動障害との併存である。慢性神経因性疼痛を勉強する末梢神経損傷を模倣するいくつかの動物モデルが開発されている、最も広く使用されているの一つは、ベネットと謝（1988年）一方的な坐骨神経の慢性狭窄損傷^{（CCI）3（} 図1）。ここでは、CCIとテストの疼痛過敏を実行するための手法を提案する。

CCIは、次のようにすることによって公開された一方の側の坐骨神経で、全身麻酔下で行われる親族切開し、中殿浅と大腿二頭筋の筋肉の間に結合組織を切断する。四クロム腸の字だけ閉塞するために、1ミリメートルの間隔で坐骨神経の周りにゆるく結んが神経鞘の血流を逮捕されていません。傷は皮膚の筋肉やステープルで縫合閉鎖しています。疼痛過敏症テストを開始する前に、動物は、その後24時間の手術から回復するために許可されています。

行動テストのために、ラットを試験装置に配置され、テスト手順に慣らすために許可されています。テストエリアは、坐骨神経の分布範囲内に後足の半ばに底表面（ 図2）です。機械的な撤退のしきい値は機械的に電子の動的足底のフォン·フレイ角膜知覚計またはマニュアル·フォン·フレイ毛^4を使用^して負傷し、無傷の後肢の両方を刺激することによって評価されています。機械的な撤退のしきい値は、作用する最大圧力です。（グラム）足の撤退をトリガします。第一ハーグリーブスら （1988）によって記述され、熱回収の遅延の測定については、後足は足鎮痛メーター^5,6を使用^して、透明なガラス表面からの放射熱のビームにさらされている。熱刺激に撤退レイテンシが負傷し、無傷の両方の後肢の足撤退のための時間として記録されます。以下CCI、負傷した足に機械的な撤退のしきい値と同様に、熱回収の遅延は、ベースラインの測定と無傷の足（ 図3）と比較して、両方とも大幅に減少しています。疼痛過敏症テストを組み合わせた末梢神経損傷のCCIモデルでは、慢性の神経因性疼痛を変更するには、潜在的な治療薬の有効性を検討するためのモデルシステムを提供します。私たちの研究室では、病因に神経免疫相互作用の役割を調べるために後肢の熱的、機械的な感度と一緒にCCIを活用神経因性疼痛の治療と。

Protocol

1。坐骨神経の慢性くびれ

無菌テクニックは外科的処置に使用する必要があります。 70％エタノールで手術の作業面を消毒し、オートクレーブで滅菌し、事前の機器（例えば、微細なハサミ、鉗子、およびトラクター）、ガーゼ、ステープルと綿棒で準備します。複数の手術については、70％エタノールまたはラットの間に乾燥したビーズ滅菌器と楽器をきれいにし、resterilise。手術用マスク、ヘアボンネットと滅菌手袋を着用する必要があります。

神経の収縮のために、乾燥を防ぐために、滅菌生理食塩水に浸漬し、約3 cmの長さの小片にそれを切断することによりクロム腸縫合糸を準備します。傷を閉じるため、市販の滅菌絹縫合糸を使用しています。

1. O ₂におけるイソフルランの5％を使用した誘導チャンバ内にラットを麻酔をかけるし、フェイスマスク、カスタムメイドを経由してO ₂にイソフルラン2％を提供し、手順の実行中にanesthetised動物を監視する。一般的な代替麻酔薬はハロタンまたはペントバルビタール腹腔内ナトリウムを吸入されています。これらの受容体は神経因性疼痛の開発において重要であるので、N-メチル-D-アスパラギン酸（NMDA）受容体拮抗薬としてケタミンは、避けるべきである。
2. ラットの左後肢を剃る。その後、37℃の熱安定化された加熱マットの上に動物を配置°Cと目に....

Discussion

CCIは、慢性神経因性疼痛の広く使われている末梢神経損傷モデルです。それは、実行するのは比較的簡単であり、受傷後少なくとも1ヶ月堅牢で安定した疼痛過敏を生成します。 CCIに続いて、ラット（つま先が一緒に開催し、足底、屈曲と足がeverted）負傷した後足の異常な姿勢を示し、同様に、振とう保護したり、自発痛⁹の存在を示唆して負傷した後足をなめることを繰り返す。感覚障害に加えて、いくつかの研究者はCCIがそのような中断社会的相互作用、睡眠障害、うつのようなと行動^10月13日不安などの行動障害を連想させることが示されているが、これはそのような行動の障害を見つけるために失敗とは対照的である他人^14,15によって。 CCIは、したがって、一般的に神経因性疼痛の治療のための病態生理学、および潜在的な治療薬の両方を調査するために使用されています。

我々DESCR左坐骨神経の一方的な収縮をIBE、しかし、それは多くの実験者が同じような痛みと行動の結果で、右側の坐骨神経のCCIを実行したことに留意すべきである。一部の研究者はそれが.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
試薬/装置の名前	会社	カタログ番号	コメント
クロム消化	エチコン	G-211	4から0までの厚さ
イソフルレン	Delvet Pty。株式会社、セブンヒルズ、NSW	N / A
Mersilk	エチコン	W-580	5から0までの厚さ
Autoclip	ベクトン·ディッキンソン	427631	9ミリメートルのステンレス鋼
Riodine	オリオン	R1000802F	の1％w / vのヨウ素
熱足鎮痛機器	ウーゴ·バジーレ	37370
動的足底の角膜知覚計	ウーゴ·バジル電子	37400