左心房狭窄 (LAS) はグループ 2 肺高血圧症 (PH) と肺静脈の本来のメカニズムを研究するために使用される外科的手法です。ここでは、肺静脈動脈化術を引き起こすし、PH をラットに適度なチタン クリップを使用して左心房を収縮するプロトコルを提案します。
このコンテンツを表示するには、JoVEへの購読が必要です。 または、無料トライアルをお申し込みください。
方法論記事
左心房狭窄による肺静脈動脈化術とグループ 2 肺高血圧症ラット
* These authors contributed equally
この記事について
サマリー
要約
僧帽弁狭窄症による肺静脈動脈化術とグループ 2 肺高血圧症 (PH) のメカニズムは明確ではありません。グループ 2 の齧歯動物モデルがない PH、僧帽弁狭窄症 (MS)、疾患のメカニズムや潜在的な治療戦略の検討を容易にするため。肺静脈うっ血による肺静脈本来、グループ 2 の新規ラット モデル左心房狭窄 (LAS) による PH。ラスは、半分閉じたチタン クリップを使用して左心房の収縮によって実現されます。ラス術後後僧帽弁流入速度のより大きいモデルまたは心エコー上 2.0 m/s と等しいラット徐々 に肺静脈動脈化術とグループ 2 を開発 8-10 週間の期間で PH。このプロトコルではラスベガス手術を実行する方法のステップバイ ステップの手順を提供します。ラスの示されたラット モデル人間の MS を模倣し、肺静脈動脈化術の基盤となる分子機構の研究やグループ 2 の治療法の臨床評価のために役立ちます PH。
概要
この資料の目的は、ラットでラス手術を実行する方法のステップバイ ステップの手順をデモンストレーションすることです。手術によるラスは、密接に MS を模倣と cor1左心房の機械的閉塞の作成を含む人間の三。左心室 (LV) 流入の多い閉塞肺静脈循環の渋滞が発生し、患者は徐々 に PH を開発します。世界保健機関は、PH2,3,4の最も一般的なグループであるグループ 2、左心疾患により PH を分類します。左心疾患患者における PH の診断に関連付けられて 1 年標準化された死亡率4の 7 倍増加より大きいを。現在、グループ 2 の承認された治療がない基になる治療から離れて PH 左心疾患 (例えば、僧帽弁狭窄の外科的交換)。ただし、有効な僧帽弁置換術は MS5症例の半分までで完全に PH を解決しません。この永続的な PH は改造のために不利な肺血管、不十分と理解されています。したがって、動物モデル、グループ 2 で不利な肺血管のリモデリングの分子メカニズムの私達の理解を高めることに重要な PH です。
横大動脈バンド
アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。
プロトコル
ラスの実験的プロトコルは、東京慈恵会医科大学大学院の医学動物ケア委員会と大学研究倫理委員会 (プロトコル #2015-118) によって承認されています。
1. 術前準備
- 動物実験施設に到着後、5 週齢雄スプレイグ ラット操作の前に彼らの新しい家に順応するまでの 1 週間で 150 に 200 g の間を提供します。
- オートクレーブに入れることによって手術前に次の機器を準備: 1) の小動物人工呼吸器、2) 麻酔器、3) 挿管キット (止血鉗子、舌圧子、18 G 血管カテーテルのペアの構成)、4) 手術器具 (カーブタイプ鉗子のペアなどストレート ピンセットのペア、針ドライバー、胸リトラクター、はさみのペア、5-0 のモノフィラメント縫合糸、クリップ アプリケータ、中型大型クリップ 23 G 胸管)。
- 滅菌綿棒、ガーゼ出血に対処する準備ができているあります。
- 手術中に動物体の温度 37 ° C 前後を維持するために加熱パッドを使用します。
2. 麻酔、気管内挿管
- 2 L/分部屋の空気と混合 5% イソフルランと部屋に誘導ラットを麻酔します。
- 挿管前に毛シェーバーとラットの胸毛を剃るし、細い髪を削除する脱毛クリームを適用します。
- 挿管前に十分な麻酔を確認するペダルの反射を確....
アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。
結果
心エコー検査、術後 2 週間を使用して、ラスベガスの有効性を確認します。LV の流入速度が 2.0 m/s、4 室表示と測定を超えるとラットは有意な狭窄症 (図 1) を開発し、適度な PH および肺静脈動脈化術 8-10 週間後ラスベガス手術を確実に開発すると見なされます。
10 週間後ラスベガス外科ラス群ラット表示左心房拡大 (図 2 b)、肺うっ血 (図 2 e)、右心室 (RV) 圧負荷 (図 2 f)、および増加の肺静脈血流 (図 2 階、G) SOC グループ (図 2 .......
アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。
ディスカッション
ラスのラットは、既にフィールド12,13の研究者から大きな関心を受けた新規グループ 2 PH モデルです。2 つの既存グループ 2 モデル、すなわち、肺静脈狭窄 (PVS) モデル14豚と supracoronary 大動脈バンディング (SAB) ラット モデル8,を使用すると比較する9,10、ラス ラット モデルにはいくつか利点。PVS ピグレット モデルと比較して、ラスベガスのラットモデルを生成する以下のコストし、ラットの手術は子豚でないほど複雑です。最もよく使用されるグループ 2 PH 動物モデル、グループ 2 の病態である SAB ラット モデルに比べて PH ラスベガス モデルでは以下の SAB モデルのより複雑な大動脈バンディングまず肺を開発する前の左心室障害を原因として渋滞.......
アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。
開示事項
著者が明らかに何もありません。
謝辞
著者は、科学振興 (JSPS) サマー プログラム Mitacs 日本社会を認めます。熊イク Ping は、東京慈恵会医科大学医学部を訪問する、Mitacs JSPS サマー ・ プログラムからの資金によって支えられました。博士南沢は、日本の技術 (スウェン) 戦略研究財団でプライベート大学 (スウェン)、自動車レースの記念のための MEXT-Supported プログラム科学の一部サポートされて財団 (スウェン) し、東京慈恵会医科大学大学院研究基金 (スウェン) このプロジェクトを支援します。アーチャー博士は米国国立衛生研究の健康 (NIH) の助成金 NIH 1R01HL113003 01A1 (S.L.A.) と NIH は革新のためのカナダの基盤、層 1 カナダ ミトコンドリア動態と臨床リサーチ チェア (S.L.A.) を 2R01HL071115-08 で一部サポートされて医学 (S.L.A.)、ウィリアム j. ヘンダーソン財団、カナダの血管ネットワーク、および女王の心肺装置 (QCPU)。
著者は、氏忠小久保、チーフの学術情報センター、東京慈恵会医科大学医学部、ビデオの撮影のための写真サービスをご了承ください。
....アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。
材料
| 名前 | 会社 | カタログ番号 | コメント |
|---|---|---|---|
| 5-0 プロレン縫合糸 | ジョンソン &ジョンソン - Ethicon | 8725H | ポリプロピレン縫合糸 HEMO-SEAL テクノロジー |
| 麻酔器 | Wakenyaku Co., Ltd. | BRTK-100A | エアポンプ・麻酔器 |
| 血管カテーテルガイドワイヤー | 自作 | 10cmガイドワイヤーを1ccシリンジに接着 | |
| 胸部リトラクター | 夏目製作所(株) | F-2 | |
| 胸部チューブ 23G 23G | プラスプラスチックチューブに装着した自作 | ||
| 湾曲鉗子 | 夏目製作所 | A-14 | |
| ヒーティングパッド | ビヴァリア | MP-916-NV | 体温を37°Cに保つ |
| ホライゾン ライゲーティングクリップ | テレフレックス | REF 003200 | サイズ 中・ |
| 大型 ホライゾン 手動式ライゲーションクリップ アプライヤー 中・大型用 テレ | フレックス | REF 337085 | ライゲーションクリップ アングルジョー (20cm) |
| ニードルホルダー | 夏目製作所 | MC-40 | |
| げっ歯類用呼吸器 | CWE Inc | SAR-830/P | 小動物用人工呼吸器 |
| さみ | 夏目製作所 | B-12 | 先端が丸いストレートハサミ ストレート |
| 鉗子 | 夏目製作所 | A-7 | |
| 舌圧子 | 内田洋行(株) | 8-615-2417 | ワイドエンドを使用 |
参考文献
- McGuire, L. B., Nolan, T. B., Reeve, R., Dammann Jr, J. F. Cor Triatriatum as a Problem of Adult Heart Disease. Circulation. 31, 263-272 (1965).
- Strange, G., et al. Pulmonary hypertension: prevalence and mortality in the Armadale echocardiography cohort. Heart. ....
アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。
再版と許可
