同所性膵臓腫瘍異種移植片のDCE-MRI:標的腫瘍組織の微小血管系を評価する方法

- 高度に無秩序で異常な血管の広範なネットワークが、腫瘍の成長と転移をサポートします。この微小血管系を評価するには、麻酔をかけた担腫瘍マウスを採取し、ヒートランプの下で尾静脈を拡張します。適切なMRI造影剤が入ったシリンジに取り付けられた医療グレードのマイクロチューブアセンブリを静脈内に挿入します。テールをプラスチックボードに固定します。

マウスを温かいベッドに置いて体温を調節します。直交して曲げたプラスチックボードを腹部に貼り付け、引き下げて腫瘍を捕まえて固定します。バイタルサインを監視するためのプローブを固定します。腫瘍領域に表面コイルを置き、動物をDynamic Contrast-Enhanced Magnetic Resonance Imaging(DCE-MRI)スキャナーにスライドさせます。造影剤を注入し、スキャンを開始します。

腫瘍血管系の過透過性形態のため、造影剤の導入により、腫瘍組織の細胞外空間内での急速な漏出と蓄積がもたらされます。表面コイルは、造影剤の分布に応じて組織から放出されるMR信号強度の変動を捉え、腫瘍血管系の程度を定量化するのに役立ちます。次のプロトコルでは、同所性膵臓腫瘍異種移植片を持つマウスの DCE-MRI を実施します。

- 腫瘍の直径が5〜7ミリメートルに達したら、鋭利な30ゲージの針をマイクロポリエチレンチューブの一方の端に挿入し、鈍い30ゲージの針先をもう一方の端に挿入します。作りたてのMRI造影剤が入った1ミリリットルのシリンジを鈍い針先に接続し、プランジャーをゆっくりと押し下げてチューブ全体に充填します。次に、ヒートランプの下で動物の尾静脈を拡張し、ケリー鉗子を使用して鋭い30ゲージの針のシャフトをつかみます。拡張した尾静脈の1つに針を慎重に挿入し、尾とチューブの両方を10 x 100ミリメートルのプラスチックにテープで固定して、尾をまっすぐに保ちます。

次に、マウスを仰臥位にして、循環する温水を備えた動物用ベッドに置き、イメージング中に動物の体温を調節します。このとき、直腸温プローブも挿入します。動物が所定の位置にあるとき、腫瘍がボードの上端の後ろにあることを確認しながら、直交的に曲げられたプラスチックボードを腹部に貼り付け、次にボードを約2ミリメートル引き下げて腫瘍が捕捉されるようにします。

ボードを動物のベッドにしっかりとテープで固定し、呼吸パッドトランスデューサーを胸部にテープで固定して、イメージング中の動物の呼吸を監視します。次に、表面コイルを腫瘍領域の上部に置き、動物のベッドにしっかりとテープで固定します。次に、腫瘍領域がボリュームコイルの中心に来るまで、動物用ベッドをMRスキャナーに押し込みます。T2 強調 MRI を適用して腫瘍を特定し、続いて T1 マッピング用にさまざまなフリップ角度で T