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脳梗塞のラットから、血流が制限されると患部で細胞死を引き起こす、化学的に固定されたパラフィン包埋脳片を採取します。
組織をキシレンに浸してパラフィンを溶解します。
組織を無水アルコールに浸して、残留キシレンを除去します。
アルコール濃度の低下に組織を通すことにより、組織を水分補給します。
ティッシュを水ですすいで、残留アルコールを取り除きます。
DNAに結合する塩基性色素であるヘマトキシリンを塗布し、核を紫色に染色します。
水と酸性アルコールですすいで、余分なヘマトキシリンを取り除きます。.
アルカリ溶液ですすいで、核の汚れを青くします。
正に帯電した細胞質および細胞外マトリックスタンパク質をピンク色に染色する酸性染料であるエオシンを塗布します。
アルコール濃度を上げて組織を脱水します。
組織をキシレンに浸して透明にし、顕微鏡でマウントして視覚化します。
対照領域は青色の核でピンク色に見えますが、梗塞領域は細胞死による染色が不十分なため、薄く見えます。