銀染色を用いたマウス脳切片の神経変性の評価

まず、ニューロンの変性を示す固定マウス脳組織切片を含む染色トレイから始めます。

二重蒸留水を加えて切片を洗います。

切片を硝酸銀溶液に入れ、インキュベートします。

銀イオンは、縮退したニューロンに選択的に結合します。

切片をアセトンに浸して脱水し、アルカリ銀溶液で処理して銀の堆積物を安定させます。

切片を還元性混合物溶液中でインキュベートし、結合した銀イオンを金属銀堆積物に変換します。

酢酸ですすいで反応を止めます。

これは、染色されていない健康なニューロンに対するニューロンの変性を浮き彫りにしています。

切片をマイルドな漂白剤に入れて背景の銀を取り除き、次に二重蒸留水ですすいでください。

次に、強力な漂白剤に短時間浸して、背景からしつこい銀の堆積物を取り除きます。

安定化試薬を添加してニューロン上の銀沈着物を安定化させ、その後、二度蒸留水ですすいでください。最後に、固定剤で処理して、汚れを恒久的に固定します。

暗い染色領域は、ニューロンの変性を示しています。