ニューロンにおけるリポフスチン顆粒の透過型電子顕微鏡

ニューロンがリポフスチン顆粒を含む接頭辞付き皮質組織から始めます。これらの脂質が豊富な顆粒は、加齢とともに蓄積し、神経病理学的状態に関連しています。

組織を四酸化オスミウムで処理し、リポフスチンを含む細胞構造を安定させます。

エタノールの濃度を上げて組織を処理し、脱水します。次に、それを樹脂に埋め込み、極薄切片を切断して神経細胞の構造を明らかにします。

セクションをコーティングされていない銅グリッドに取り付けます。

重金属の汚れである酢酸ウラニルで切片を染色します。

ウラニルイオンは、脂質、タンパク質、DNAなどの細胞生体分子と相互作用します。

次に、事前に結合したウラニルイオンと弱く相互作用するクエン酸鉛で組織を染色し、背景に対するコントラストを高めます。

染色したスライスを透過型電子顕微鏡の下に置き、集束電子ビームにさらします。

重金属の汚れが豊富な染色された生体分子は、背景に比べて電子を強く散乱させます。

リポフスチン顆粒は、軽い細胞質の背景に対して不規則で密集したクラスターとして現れ、ニューロンにおけるそれらの存在を確認します。