マウス脊髄断面における脱髄の超微細構造解析

疾患進行中の定義された時点で自己免疫性脱髄を誘発したマウスから化学的に固定された脊髄組織を取得します。

この疾患は、自己反応性免疫細胞がミエリンタンパク質を攻撃する引き金となり、ニューロンの軸索を囲むミエリン鞘を分解します。

オリゴデンドロサイト前駆細胞は、患部に動員され、オリゴデンドロサイトに成熟し、ミエリン鞘を改質します。

組織をバッファーですすいで余分な固定剤を取り除き、その後、ミエリン脂質に結合してイメージングのコントラストを高めるオスミウムで処理します。

高分子に結合してコントラストを高める重金属染色剤を塗布します。

アルコール濃度を上げて組織を脱水します。樹脂に埋め込まれた組織を採取し、極薄切片を取得します。

電子顕微鏡を使用してミエリン鞘の厚さを測定し、軸索を膨らんだ厚い鞘で脱髄する、鞘がない状態で脱髄する、または薄い鞘で再髄鞘を分類します。

ニューロフィラメント間の間隔の減少とミトコンドリアの腫脹または完全な変性を特徴とする軸索損傷を特定します。

軸索損傷の進行と修復の経時的な分析を行い、疾患の進行を評価します。