脳低灌流マウス脳組織におけるアミロイドβ凝集体のチオフラビン-S染色

軽度の慢性脳低灌流(MCCH)を受けたマウスの脳組織切片を採取し、アミロイドベータペプチドを注射します。

MCCHは、脳への血流が減少することを特徴としています。これにより、脳血管の内皮細胞層への酸素と栄養素の供給が制限され、細胞が損傷を受けます。

損傷により血管壁の透過性が増し、注入されたアミロイドベータペプチドが壁に蓄積してプラークを形成することができます。

切片をバッファーで洗浄して、残留化学物質を取り除きます。

アミロイドプラークに結合する蛍光色素であるチオフラビンSとインキュベートします。

アルコール濃度を下げて染色した部分を洗浄し、結合していない色素を取り除き、組織を再水和します。

水分補給を維持するために、セクションをバッファーに入れます。

色素の蛍光強度を保持する封入剤を使用して切片をマウントします。

蛍光顕微鏡下で、蛍光標識されたアミロイド沈着物の存在を調べて、MCCHによって誘発されるアミロイド-β凝集を確認します。