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神経幹細胞(NSC)と脳微小血管内皮細胞(BMEC)を希望の比率で摂取します。
細胞混合物を細胞外マトリックスまたはECM溶液に懸濁します。
混合物を共焦点皿の底に広げ、インキュベートします。
ECMは重合し、細胞接着を可能にする3次元の足場を形成します。
ECM溶液中のNSCの層を固化した層の上に広げます。
インキュベートしてECMを重合します。これは、層状になった脳組織を模倣し、細胞間相互作用を促進します。
培地を添加してインキュベートします。
培地中の成長因子は、細胞増殖を促進しながら、BMECが血管様ネットワークに組織化し、神経血管ユニットまたはNVUを形成します。
培地をビタミンAを含む培地に交換することで、NSCのニューロンやグリア細胞への分化を促進します。
NVU内の細胞は、脳のような微小環境を再現するモジュール式組織に自発的に組み立てられます。