罹患ヒト脳組織切片におけるレビー小体の免疫組織化学的検出

レビー小体(LB)を含む病気のヒト脳組織の再水和切片を取ります。

過酸化水素溶液とインキュベートして、内因性ペルオキシダーゼを阻害し、非特異的な染色を防止します。

クエン酸バッファーで切片を加熱して、LBのα-シヌクレインエピトープをアンマスクします。

ブロッキング剤を塗布して、非特異的抗体の結合を防ぎます。

余分なブロッキング剤を除去し、切片をα-シヌクレインを標的とする一次抗体とインキュベートします。

結合していない抗体を洗い流します。

一次抗体に結合するビオチン化二次抗体を塗布します。

余分な抗体を取り除きます。

ビオチン化二次抗体に結合するストレプトアビジン-ビオチン-ペルオキシダーゼ複合体を添加します。

結合していない複合体を洗い流します。

ペルオキシダーゼと反応して茶色の沈殿物を形成する着色基質を適用します。

余分な基板を取り除きます。

対比染色で処理して核を青色に着色し、顕微鏡下でニューロン細胞質のLB内の褐色に染色されたα-シヌクレインに対するコントラストを高めます。