脳損傷マウスの視神経における軸索損傷の電子顕微鏡的解析

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脳損傷を受けたトランスジェニックマウスから視神経を、損傷後一定の間隔で分離します。神経には、蛍光タンパク質を発現するニューロンが含まれています。

蛍光顕微鏡を使用して、軸索の腫れと切断が徐々に増加している損傷した神経を視覚化します。

細胞構造を保持するために組織を固定します。

組織をすすぎ、余分な固定剤を取り除きます。

ミエリン鞘脂質に結合し、イメージングのためのコントラストを高めるオスミウム-フェロシアン化物溶液で処理します。

組織をすすぎ、次に高分子に結合してコントラストを高める重金属化合物でインキュベートします。

アルコール濃度を上げて組織を脱水し、樹脂に埋め込みます。

横方向と縦方向のセクションを取得し、それらを重金属化合物で処理して、コントラストを改善します。

電子顕微鏡下では、縦切片は、ミトコンドリアの腫脹、小胞、膜の漂白、および細胞骨格構造の破壊を伴った軸索腫脹の進行性の発生を明らかにします。

横断面は、ミエリン鞘の進行性の破壊を示しており、軸索変性を示しています。

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最終更新:22 8月 2026