JoVE 実験百科事典
神経科学
0 回視聴 • 1:17 分 • March 4th, 2025
グリコサミノグリカンであるヘパラン硫酸は、アルツハイマー病に関連するアミロイド斑に存在します。
ヘパラン硫酸を視覚化するには、まず、アミロイドプラークを含む罹患したヒト海馬組織切片から始めます。
細胞構造を保存するために、固定剤を使用して組織切片を固定します。
次に、非特異的抗体の結合を防ぐために、組織をブロッキング剤で処理します。
非イオン性界面活性剤を添加して、細胞膜を透過化します。
アミロイドプラーク内のヘパラン硫酸を特異的に標的とする一次抗体と組織をインキュベートします。
結合していない一次抗体を洗い流してください。
次に、ヘパラン硫酸に結合した一次抗体に結合する蛍光色素標識二次抗体を添加します。
結合していない抗体をすべて除去します。
蛍光色素を使用して核を染色します。
最後に、蛍光顕微鏡を使用して、アミロイドプラーク内の蛍光標識されたヘパラン硫酸と、疾患組織切片の青色の核を視覚化します。