脳脊髄液からの加齢性新生を検出するためのイムノアッセイ

さまざまな年齢の個人から採取した脳脊髄液(CSF)から始めます。

サンプルを遠心分離して細胞の破片をペレット化し、上清を回収します。

上清には、ニューロンの生成またはニューロン新生に関与するタンパク質が含まれています。

ストレプトアビジンでコーティングしたマルチウェルプレートを取ります。ブロッキング剤を追加して、非特異的結合を防止します。

ビオチン標識捕捉抗体を特異的な神経新生関連タンパク質に選択的に添加します。

攪拌しながらインキュベートし、抗体をストレプトアビジンに結合させ、次いでプレートを洗浄する。

CSFサンプルをルテニウム標識検出抗体とともにウェルに加え、撹拌しながらインキュベー

トします。

特定の神経新生関連タンパク質は、捕捉抗体に結合し、同時に検出抗体と相互作用します。

プレートをよく洗浄し、検出バッファーを追加します。

プレートをイメージングシステムに配置します。

検出バッファーは、ルテニウムからの発光をトリガーします。

サンプル全体の光強度の低下は、神経新生に関連するタンパク質レベルの加齢に伴う減少を示しており、神経新生の低下が確認されています。