ストレスマウスにおけるミエリン減少を可視化する金染色法

慢性的なストレスにさらされたマウスから化学的に固定された脳を採取します。

ストレスはオリゴデンドロサイトの機能を損ない、感情を調節する脳領域である内側前頭前皮質のニューロン軸索を囲む脂質に富むミエリン鞘を破壊します。

組織構造を維持するために、固定剤を再塗布してください。組織を凍結保護剤に浸して水と交換し、凍結中の氷晶の形成を防ぎます。

脳を凍結し、冠状スライスに切片にします。

スライスをスライドに取り付け、水で再水和して汚れの浸透を高めます。

金イオンを含む溶液でスライスを加熱します。これらのイオンは、ミエリン鞘内の脂質に選択的に結合して金属金沈着物を形成し、有髄ニューロンを標識します。

還元剤で加熱して余分な金イオンを減らし、すすぎて金イオンを取り除き、アルコール濃度を上げて組織を脱水します。

キシレンを使用して組織の透明性を高め、スライドをマウントします。

顕微鏡を使用して、金色に染色された有髄ニューロンを視覚化し、ストレス誘発性の変化を評価します。