JoVE 実験百科事典
神経科学
0 回視聴 • 3:47 分 • August 29th, 2025
移植された神経膠芽腫スフェロイドを含む外科的に露出した脳を備えた定位フレームにマウスを固定します。
露出した脳に生理食塩水を塗布して、組織の水分補給を維持します。
フレキシブルプローブを生理食塩水層の上に置き、接触パッドがマウスの背中に置かれ、電極が神経膠芽腫の上に位置に並ぶようにします。
このプローブは、生体適合性導電性ポリマーでコーティングされたパターン化された金電極を備えた薄くて柔軟なポリマー基板で構成されており、最適な電気的性能と組織適合性を保証します。
余分な生理食塩水を吸収し、薄い層だけを残します。
シリコーン接着剤を塗布して電極を安定させ、カバーガラスを置きます。
カバーガラスの周りに歯科用セメントを塗布し、コンタクトパッドをマウスの背中に固定します。
流体挿入用のセメント井戸を建設します。
その後、術後鎮痛剤を投与し、マウスの回復のための温サポートを維持します。
埋め込まれた電極は、神経膠芽腫の上に電気パルスを供給し、神経治療用途における標的パルス電場療法を行います。
開頭術を覆うためにDPBSを一滴垂らします。柔軟な電極をDPBSのドロップに置き、コンタクトパッド付きのプローブの背面をマウスの背面にそっと置きます。プローブが硬膜に平らに置かれ、脳の曲率に追従できるようになるまで、小さな紙でDPBS滴を吸収し、生理食塩水の小さな層が電極の下に残り、接着剤のこぼれに対するバリアとして機能するようにします。
プローブにシリコン接着剤を少量垂らし、5 mm の丸いカバー ガラスで覆います。シリコンが均一に分散し、カバーガラスとプローブの間の距離が最小になるまで、カバーガラスを押し下げます。次に、シリコンが固まるまで 30 秒待ちます。
カバーガラスを固定するには、側面に瞬間接着剤をすばやく塗布し、接着剤が固まるまで押し下げます。つまようじを使用してプローブの首に瞬間接着剤を塗布し、瞬間接着剤が首の下に引き込まれるように注意して、安定したサポートを提供します。頭蓋骨を歯科用セメントで覆って慢性的なキャップを作り、カバーガラスの端のみを覆うように特別な注意を払ってください。
プローブの背面を持ち上げ、プローブの首の下にセメントを塗布します。プローブの残りの部分は、硬化する前にセメントに貼り付けます。プローブの首をそっと押し下げて、実験中は顕微鏡の対物レンズの邪魔にならないように、表面をカバーガラスと同じ高さに置きます。
プローブネックの上部を1.5ミリメートル以下の歯科用セメント層で覆い、プローブをしっかりと保持します。カバーガラスの周囲1〜2ミリメートルに1.5ミリメートルの隆起を提示するセメント井戸を構築し、2つの光子イメージング用の浸漬液用の洗面器を作成します。セメントが硬化したら、術後鎮痛剤を投与し、ペーパータオルで包み、赤外線電球の近くに置いて、回復するまで動物を暖かく保ちます。