光パターンヒドロゲル分解を用いた標的細菌コロニー単離

0 views • 3:07 min • September 26th, 2025

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蛍光を発するように遺伝子組み換えされた閉じ込められた細菌コロニーを含む光分解性ヒドロゲル層を備えたカバーガラスを取ります。

カバーガラスをホルダーに入れます。

サンプルの脱水を防ぐために培地を追加します。

明視野顕微鏡下で、目的の単一のコロニーに焦点を合わせます。

適切なソフトウェアを使用して、コロニー周辺で細胞抽出用の光パターンを設計し、ヒドロゲルの構造結合を破壊し、細胞への紫外線曝露を最小限に抑えます。

UV光の強度と露光時間を調整します。

UV光への曝露を開始して、標的コロニーの放出を促進する露出領域のヒドロゲルの構造結合を切断します。

蛍光フィルターを使用して、コロニーを識別します。

チューブの先端をその場所に置き、もう一方の端を注射器に接続します。

明視野モードに切り替え、シリンジを使用して、放出されたコロニーを吸引します。

コロニーをチューブに移して、さらに分析します。

サンプルをPDMSホルダーに入れ、サンプルの上に定義された培地を追加して、サンプルの脱水を防ぎ、放出された細胞にキャリア溶液を提供します。キャリブレーションミラーを所定の位置に置いた後、顕微鏡の焦点を調整して、ヒドロゲルまたはマイクロウェルアレイ内のコロニーの鮮明な画像を取得し、目的のコロニーまたはウェルを特定するために検査します。

ここでは、カメラビューがサンプル内のコロニーを示している間に光のパターンを設計し、細胞抽出のためのさまざまなパターンをテストし、定義されたパターンを保存します。次に、セッション制御セクションを選択し、パターン化された照明ツールの製品名でタイトルのタブの下に保存したシーケンスを追加します。パターンを刺激するオプションを選択して、希望の露光位置を表示および調整します。

次に、LED コントロール タブで光の強度を 60%、露光時間を 40 秒に調整し、露光プロセスを開始します。ヒドロゲルの分解をリアルタイムおよび明視野モードで監視して、細胞の放出を確認します。放出された細胞を採取するには、顕微鏡フィルターを明視野からTRITCに変更し、サンプルの露出領域を肉眼で視覚化します。

露出領域が特定されたら、チューブの端を照射されたスポットに置き、顕微鏡フィルターを明視野に戻して、細胞の回収をリアルタイムで監視します。チューブのもう一方の端に取り付けられたシリンジを使用して、放出された細胞を含む200マイクロリットルの溶液を慎重に引き出し、DNA分析またはプレーティングのために溶液を1.5ミリメートルの遠心分離管に移します

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細胞培養アプリケーションのためのヒドロゲルの光媒介形成とパターニング

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Last updated: 18 July 2026