Sporosarcina pasteuriiによる微生物学的誘発方解石沈殿

栄養豊富な培地での Sporosarcina pasteurii の液体培養から始めます。

尿素、塩化カルシウム、塩化アンモニウム、重炭酸ナトリウムを含む濃縮原液を取ります。

濃縮培地の一部を細菌培養チューブに加えます。

チューブをボルテックスして、細菌細胞と栄養素を均一に混合します。

濃縮した培養物を振とうしないインキュベーターでインキュベートします。

グラム陽性土壌細菌であるスポロサルシナ・パスツリは、尿素の存在下で酵素ウレアーゼを産生します。

ウレアーゼは尿素をアンモニウムイオンと炭酸イオンに分解します。

塩化アンモニウムと重炭酸ナトリウムは、ミネラルの沈殿をサポートするアルカリ性のpHを維持するのに役立ちます。

炭酸イオンは塩化カルシウムのカルシウムイオンと反応して不溶性炭酸カルシウムを形成します。

この沈殿物は細菌細胞の周囲で形成され始め、安定した結晶形である方解石に結晶化します。

これらの結晶はチューブの底に白い堆積物として沈殿し、微生物学的に誘発された方解石沈殿(MICP)を示しています。

調製した液体培養物9ミリリットルを、滅菌した10ミリリットルの遠心分離管に数本移します。分析天びんを使用して、尿素1リットルあたり2グラム、塩化アンモニウム1リットルあたり1グラム、重炭酸ナトリウム1リットルあたり212ミリグラム、および塩化カルシウム1リットルあたり280ミリグラムを注意深く測定することにより、100ミリリットルの外部濃縮原液を調製します。

新鮮な培地を入れたビーカーに入れ、尿素を除くすべての材料を混ぜ合わせ、オートクレーブします。オートクレーブ滅菌後、尿素を1ミリリットルの新鮮な培地と混合し、濃縮培地に加える前に、0.2マイクロメートルフィルターを備えたシリンジに溶液を通します。9ミリリットルの調製培養物を含む滅菌遠心分離管に、添加剤を含む濃縮培地1ミリリットルを加えます。

各チューブをボルテックスし、摂氏30度の非振とうインキュベーターでインキュベートします。降水の開始についてすべてのユニットを定期的に監視します。