宿主細菌によるサッカリバクテリアの二成分培養の確立

宿主特異的増殖培地を含む滅菌チューブから始めます。一晩増殖させた宿主細菌培養物を追加します。

次に、寄生性超小型菌であるサッカリバクテリアを含む濾液を導入して、二成分培養を確立します。

宿主細菌に最適な微好気性条件下でバイナリ培養をインキュベートします。

培地中の栄養素は宿主細菌の増殖と増殖を促進し、培養物を濁らせます。

それらの偏性寄生性のために、サッカリバクテリアは宿主細菌細胞の表面に付着します。

これらの細菌は宿主と密接な膜接触を形成し、宿主の生存と増殖に不可欠な栄養素を抽出します。

感染が進行すると、細菌宿主の増殖が遅くなり、濁りが低下します。

継続的な成長をサポートするために、バイナリ培養物を定期的に新鮮な培地に移します。

これにより、宿主の生存率が維持され、二元培養の長期的な安定性が促進されます。

2ミリリットルの適切な増殖培地をチューブに等分して培養チューブを準備します。

次に、200マイクロリットルの宿主生物の一晩培養と100〜200マイクロリットルの再懸濁ろ過サンプルを各チューブに加えます。結合したサンプルを宿主生物に適した条件下でインキュベートします。200マイクロリットルのバイナリ培養物を新しいチューブ内の2ミリリットルの新鮮な増殖培地に移すことにより、2〜3日ごとに細胞を継代します。

継代培養物が200マイクロリットルの未感染宿主培養で増殖を示さない場合は、細胞を継代するときに、接種したチューブをインキュベーターに戻します。