寒天培養からの亜硫酸塩還元嫌気性細菌の継代培養

食品サンプルを事前に接種し、増殖した細菌コロニーを含む分画寒天プレートから始めます。

好気性細菌は表面で増殖し、嫌気性細菌は寒天の奥深くで発生し、亜硫酸塩還元細菌が亜硫酸塩を硫化水素に還元します。

次に、硫化水素は培地中のクエン酸第二鉄アンモニウムと反応し、黒い沈殿物を形成します。

寒天プレートに亜硫酸塩還元細菌を示す黒い斑点がないか観察します。

これらの細菌を継代培養するには、滅菌細胞スクレーパーを使用して好気性細菌の不要な層を優しく除去し、きれいな侵入点を作成します。

嫌気性状態を維持するために、空気を導入せずに滅菌スポイトを培地に挿入します。

埋め込まれた黒いコロニーを慎重に抽出します。

コロニーを新鮮な増殖培地を含む滅菌チューブに移します。

最後に、チューブをしっかりと密閉し、嫌気性条件下でインキュベートして、亜硫酸塩還元細菌のさらなる増殖を促進します。

インキュベーション後、プレートの細菌増殖を調べます。

好気性細菌は寒天の表面に存在する場合がありますが、嫌気性細菌は寒天に埋め込まれます。亜硫酸塩還元細菌は周囲の寒天を黒くし、 C パーフリンゲンスコ ロニーの可能性は黒くなり、寒天に埋め込まれます。プレートの表面に好気性細菌の増殖が密集している場合は、セルスクレーパーを使用して、選択した領域からコロニーを除去します。

滅菌済みの使い捨てスポイトを使用して、寒天から パーフリンゲンス菌の 疑いのあるコロニーを摘み取り、寒天に穴を開ける前に必ず空気を排出します。コロニーを15ミリリットルの円錐形チューブ内の10ミリリットルの新鮮なRPMに移します。複数のコロニーを同じプレートから別々のRPM培養物にサンプリングすることができます。

円錐形のチューブの蓋をしっかりと固定し、パラフィンフィルムで包み、摂氏37度で一晩インキュベートします。