細菌の代謝活性を監視するための等温マイクロカロリメトリー

細菌培養物を連続希釈し、増殖培地を含む熱量測定バイアルにアリコートを加えます。

密閉されたバイアルを等温マイクロカロリメーターのマルチウェルプレートにロードして、代謝熱の生成を測定します。

この装置は一定の温度に保たれ、検出された熱が細菌の代謝のみに由来することを保証します。

細菌が栄養素を代謝して増殖すると、センサーがリアルタイムで検出する熱を放出します。

並行して、同一のバイアルをインキュベーターでインキュベートします。分光光度計を使用して、光学密度 (OD) を測定し、細菌の増殖を監視します。

希釈液からの熱量測定信号を使用して、熱活性曲線を作成し、それをOD値と相関させます。

鋭い最初のピークは、指数関数的成長中の好気性呼吸を示します。

酸素が制限されると、細胞は嫌気性発酵に移行し、2番目の鋭いピークを生成します。

静止期に入ると、細菌は酵素を分泌して細胞外タンパク質を分解し、代謝を維持し、広いピークを生成します。