宿主-病原体相互作用研究のための Streptococcus mitis 培養の調製

まず、病原性細菌である ストレプトコッカス・マイシスの増殖をサポートする栄養豊富な培地である無菌トッド・ヒューイット酵母エキス、またはTHY寒天プレートから始めます。

滅菌ループを使用して、細菌株でプレートを縞模様にします。

接種したプレートをキャンドルジャーに入れ、キャンドルに火をつけ、ジャーを気密に密封し、インキュベートします。

燃えているろうそくは酸素を消費し、二酸化炭素レベルを上昇させ、宿主のような状態を模倣した微好気性環境を作り出します。

培地中の栄養素と瓶の微好気性環境は、細菌の増殖を促進し、病原性表現型の発達を促進します。

インキュベーション後、ジャーの蓋を取り外し、プレートを取り出します。

滅菌ループを使用して、単一の単離コロニーを選択し、THYブロスを含む滅菌円錐形チューブに移します。

静的条件下で培養物をインキュベートし、病原性表現型を維持しながら細菌の増殖をサポートします。

この培養は、宿主と病原体の相互作用を調査するための病原性モデルとして使用できます。

Mitisグループ連鎖球菌を調製する前に、インキュベーターでTHY寒天プレートを摂氏37度に温めます。

その後、滅菌ループを使用して、プレート上に 目的の連鎖球菌 i 株をストリークアウトします。

次に、プレートをキャンドルジャーに入れ、ジャーを摂氏37度で一晩約18時間インキュベートして、微好気性環境を提供します。

翌日、キャンドルジャーからプレートを取り出し、滅菌ループを使用して分離されたコロニーを摘み取ります。

2ミリリットルのTHYブロスを含む15ミリリットルの滅菌コニカルチューブを接種します。

キャップをしっかりと閉め、静的条件下でチューブを摂氏37度でインキュベートします。