ex vivoイメージングのためのマウス膝窩ドレナージリンパ節を採取するための解剖法

リンパ節は、体全体に存在する卵形の二次リンパ器官であり、免疫細胞間の相互作用を可能にすることにより、自然免疫応答と適応免疫応答を橋渡しする役割を果たします。

マウス膝窩ドレナージリンパ節(後ろ足からリンパ液を受け取るリンパ節)を分離するには、腹臥位でステージに固定された安楽死マウスを採取することから始めます。

後ろ足のふくらはぎ部分に鉱物油を塗布してマウスを準備します。このオイルは、皮膚除去時の手術切開部位の周囲に毛皮が沈着するのを防ぎます。

ふくらはぎ領域のかかとから膝まで正中線を切開します。皮膚を下にある筋肉組織から切り離し、膝窩(膝関節の後ろの浅いくぼみ)を露出させます。

膝窩ドレナージリンパ節は、窩内の半透明の球として現れ、窩の脂肪組織内に埋め込まれています。リンパ節を取り除き、培養皿に入れます。

次に、顕微鏡イメージングを支援するために、リンパ節の周囲の脂肪組織を慎重に除去します。適切な緩衝液に浸した吸収シートで臓器を覆います。バッファーは、組織の生存率を維持するために水和レベルを維持するのに役立ちます。

膝窩ドレナージリンパ節は、下流のex vivoイメージングアッセイの準備ができています。

膝窩ドレナージリンパ節の採取には、動物の注射側のふくらはぎと膝にミネラルオイルを塗布します。次に、ふくらはぎのかかとから膝まで正中線を切開し、ふくらはぎの筋肉組織を皮膚から解離させます。

膝窩を露出させます。膝窩リンパ節は、窩内に半透明の球として現れます。次に、顕微手術の湾曲鉗子でリンパ節を切除します。