雌マウスにおける尿路感染症モデルの確立

麻酔をかけた雌マウスを仰臥位にすることから始めて、膀胱を空にします。

尿路病原性大腸菌の懸濁液を含むカテーテルが取り付けられた組み立て済みの注射器を取ります。

尿

道口から膀胱にカテーテルを挿入し、細菌懸濁液をゆっくりと送達します。

注射後、マウスを仰臥位で回復させます。

細菌の線毛は膀胱上皮細胞上の特定の受容体に結合し、下にある上皮細胞内での内在化を引き起こします。

膀胱上皮細胞内で細菌が増殖し、一部は糸状の形態を採用し、密な細胞内細菌群集またはIBCを形成します。

これらの IBC はバイオフィルムのような特性を示し、マウスの免疫防御システムから細菌を保護し、持続的な感染に寄与します。

時間が経つにつれて、IBCは破裂し、細菌を膀胱内腔に放出します。糸状の形態を持つ細菌は、隣接する上皮細胞に付着します。

これは感染の拡大につながり、雌マウスに尿路感染症を確立します。

雌マウスを麻酔した後、承認されたプロトコルに従って、動物を仰臥位に置き、下腹部に中程度の圧力を加えて膀胱から尿を空にします。膀胱がいっぱいになると、腸骨稜の間の皮膚の下のエンドウ豆のように感じられます。

膀胱が空になったら、利き手ではない手を使って、親指をマウスの尻尾に置き、同じ手の指をマウスの腹部に置き、反対方向に穏やかな圧力を加えてマウスを所定の位置にしっかりと保持します。次に、カテーテルの先端をマウスに対して垂直に尿道口に置きます。次に、穏やかな圧力で、ハブが尿道口に接触するまでカテーテルを尿道にスライドさせ、同時に注射器を下げて作業面と平行になるようにします。

カテーテルを所定の位置に配置したら、マウスの腹部に置いている利き手ではない手の指を使用して、腹部の皮膚をマウスの頭に向かって非常に穏やかに引っ張ります。尿道口は動かないことに注意してください。ただし、カテーテルが膣内にある場合、組織は上に移動してカテーテルから離れます。カテーテルのハブを尿道口に当てて、50マイクロリットルの細菌接種物をゆっくりと分配します。

取り付け速度が遅いため、腎臓への膀胱尿管の逆流が最小限に抑えられます。漏れを防ぐためにカテーテルをゆっくりと取り外し、仰臥位で動物をケージに入れます。