創傷による真菌接種によるイネ葉感染の確立

小さな

傷のある稲の葉を入れた培養皿から始めて、下にある表皮を露出させます。

Tween-20 を含む湿潤溶液を塗布し、真菌の増殖に適した環境を作り出します。

分

生子(生殖真菌胞子)を持つ分生子からなるMagnaporthe griseaの菌糸体プラグを負傷部位の上に置きます。

真菌の増殖を促進するために、光周期条件下で湿ったチャンバーで葉をインキュベートします。

インキュベーション中、分生子胞は露出した表皮に付着する胞子を放出し、生殖管を発達させます。

胚管はドーム型のアプレッソリウムに分化し、高い膨圧を生成し、鋭い菌糸、または浸透ペグを形成します。

浸透ペグは細胞壁分解酵素を分泌し、表皮細胞への侵入と栄養素獲得のための浸潤性菌糸への分化

を促進します。

これらの菌糸は、細胞間のチャネルを接続し、感染を確立する原形質を介して表皮細胞内で成長および広がります。

真菌は毒素を分泌し、葉の傷ついた部位の近くに細胞壊死と病変形成を引き起こし、真菌感染を示します。

解剖学的針を使用して、剥がれた稲の葉の主脈にある長さ2〜3センチメートルの傷を3つこすります。こすった葉をつまようじの上に置き、トゥイーン-20溶液をスプレーします。次に、各Mグリセウス株を含むOTAプレートから1/2 x 1/2センチメートルの菌糸プラグを切り取ります。傷ついた葉にプラグを置き、摂氏25度の湿ったチャンバーで3〜8日間インキュベートします。

潜伏期間が経過した後、国際稲研究所が提供するスコアリングシステムに従って病変を検査および評価します。最後に、病気の葉を写真に収めて、テストされた株の感染力を評価します。