免疫適格げっ歯類モデルにおける肺炎連鎖球菌の気管支内点滴

金属針に接続されたポリエチレンチューブを備えた金属カニューレで構成される滅菌挿管装置を入手します。

肺炎連鎖球菌を含む注射器を針に取り付け、チューブに充填します。

次に、麻酔をかけた免疫能力のあるラットを仰臥位に配置します。

金属カニューレの自由端をラットの口に挿入します。気管内の左気管支に向かって、左肺を適切な深さまで

進めます。

チューブをカニューレの端まで進め、細菌懸濁液を左肺葉に点滴します。

細菌カプセルと表面関連酵素は、粘液への細菌の閉じ込めを防ぎます。さらに、肺炎連鎖球菌は気管支上皮細胞の表面受容体に付着し、エンドサイトーシスを促進し、基底外側表面への放出

を促進します。

細菌は上皮細胞やバリアに損傷を与える毒素を分泌し、免疫反応を引き起こします。

しかし、肺炎連鎖球菌は、宿主の免疫応答を回避し、肺感染症を確立するための戦略を開発しました。

清潔な使い捨てマットを作業面の近く、ウォーターバスの近くに置きます。

作業面と挿管装置を準備するには、まず、テキストプロトコルに従って金属カニューレとポリエチレンチューブを滅菌し、次にガラス製の保存チューブに入れて作業面に移します。次に、保存チューブからキャップを取り外し、カニューレのハンドルの端をチューブの開いた端にスライドさせます。滅菌鉗子を使用して、ビーカーからポリエチレンチューブの長さを1本取り除き、滅菌金属カニューレの内側に挿入し、自由に動くようにします。消えないペンで所定の位置にガイドマークを置きます。

次に、針をチューブに数ミリメートルスライドさせて、滅菌済みの使い捨て 25 ゲージ針をポリエチレン チューブの自由端に取り付けます。次に、滅菌生理食塩水を使い果たして、新しい使い捨ての1ミリリットル注射器を満たします。ポリエチレンチューブに取り付けられた針に注射器を取り付け、チューブを通して生理食塩水の全量を洗い流します。

使用済みの注射器は鋭利物容器に捨ててください。次に、新しい滅菌使い捨て1ミリリットル注射器に、ウォーターバスからの寒天ベースの接種物を入れます。25ゲージの針とチューブを再取り付けし、チューブが寒天で完全に満たされるまでプランジャーを押して、チューブを通して寒天を洗い流します。

テキストプロトコルに従ってラットを麻酔した後、動物を使い捨てマットの上に仰臥位に置き、頭を右に、尾を左に向けます。次に、金属カニューレの自由端を動物の口に挿入します。自由端が上向きになるようにカニューレを回し、わずかにひねる動きで喉頭構造を慎重に迂回しながら、気管にゆっくりと進めます。

カニューレをわずかに前後に数回ゆっくりとスライドさせ、左手人差し指を使用して気管リングを触診し、食道ではなく気管への挿入を確認します。

食道ではなく気管に挿管されるようにするには、カニューレを少し前後に動かし、隆起を感じます