JoVE 実験百科事典
免疫学
0 回視聴 • 4:28 分 • July 8th, 2025
仰臥位で麻酔をかけたラットを準備します。
気管の解剖学的左側面の上の皮膚を縦方向に切開します。
皮下結合組織を解剖します。首の筋肉を引っ込めて、左頸動脈を露出させます。
動脈部分を分離し、両端にシルク縫合糸を配置します。
心臓から遠位に配置された縫合糸を結紮して、頭部への血流を防ぎます。
動脈セクションを通る血流を妨げます。動脈の上面を切開します。
抗凝固剤を充填した注射器に接続された抗凝固剤充填カニューレを切開部分に挿入します。
カニューレを所定の深さまで進め、抗凝固液をカニューレに注入します。
カニューレを通して少量の血液を引き戻して、流れが妨げられていないことを確認します。
抗凝固液で洗い流し、血液漏れを防ぐためにカニューレの端を密閉します。
カニューレを動脈内に固定します。外科的切開部を閉じます。
カニューレラットモデルは実験の準備ができています。
頸動脈をカニューレ挿入するには、まず、面取りされた先端から 2.5 センチメートルのところに頸動脈カニューレに印を付け、動脈に挿入するチューブの部分を特定します。次に、カニューレの面取りされていない端を 25 ゲージの針に接続し、抗凝固剤溶液で満たされた注射器に取り付け、エアギャップがないことを確認しながらカニューレに溶液を満たします。
次に、矢状面の気管の左上の皮膚層を1〜1.5センチメートル縦方向に切開し、鈍い先端鉗子を使用して皮下結合組織を解剖し、下にある対の首の筋肉を露出させます。
首の筋肉を引っ込めて、皮膚表面から約1センチメートル下にある脈動する左頸動脈を明らかにします。次に、鈍的解剖によって動脈から上にある結合組織を洗浄し、鈍的組織鉗子を使用して動脈の約1センチメートルのセクションを分離します。
次に、先端の細い鉗子を使用して頸動脈の下に 2 本の絹縫合糸を通し、孤立した動脈部分の両端に配置します。次に、ラットの心臓と鎖骨から最も遠い縫合糸を結び、頸動脈の下に一対の真っ直ぐな先端の細い鉗子を置き、動脈を通る血流を閉塞します。
次に、先端の細い虹彩はさみを使用して、孤立した領域の上部から約3分の1下の動脈の上面に小さな切開を行います。カニューレの先端を湾曲した鉗子で動脈に挿入します。
挿入したら、血流を塞いでいる先端の細いまっすぐな鉗子を取り外し、2組の鉗子を使用してカニューレを動脈内に2.5センチメートル進めます-1つはカニューレを動脈内に保持して血液が逆流するのを防ぎ、もう1つはカニューレを挿入します。次に、小さな動脈クランプを使用してカニューレを動脈内に保持します。
抗凝固液をカニューレに注入し、続いて少量の血液を採取してチューブの開存性を確認します。次に、カニューレを抗凝固液で洗い流し、ライターの炎で端を密閉します。
最後に、縫合糸を使用してカニューレを所定の位置に結び付け、動脈クラン
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