JoVE 実験百科事典
免疫学
0 回視聴 • 2:39 分 • July 8th, 2025
前立腺がん細胞を採取し、麻酔をかけた免疫不全のヌードマウスに皮下注射します。
免疫応答がないため、注射された細胞は生き残って増殖し、腫瘍を形成することができます。
腫瘍細胞は、前立腺特異的膜抗原またはPSMA(細胞表面タンパク質)を過剰発現します。
放射性トレーサーに結合したPSMA特異的抗体を採取し、担腫瘍マウスの尾に静脈内注射します。
抗体は腫瘍細胞に到達し、PSMAに結合し、腫瘍を標識します。
麻酔をかけたマウスを陽電子放出断層撮影法またはPETスキャナーに入れ、スキャンを取得します。
生成された画像は放射性トレーサーの分布を示し、腫瘍の位置に対応する抗体取り込みの高い領域を強調しています。
雄の無胸腺ヌードマウスでは、5 x 106 LNCaP前立腺癌細胞を皮下移植し、これらを100〜150ミリメートル立方体の異種移植片に増殖させます。接種後3〜4週間で、腫瘍の準備が整うはずです。
イメージングのために、89Zr-DFO-J591放射性免疫複合体を0.9%滅菌生理食塩水で1ミリリットルあたり1ミリキュリーの濃度に希釈します。次に、200マイクロリットルの89Zr-DFO-J591溶液を異種移植片を持つマウスの外側尾静脈に注入します。
所望のイメージング時点で、2%イソフルラン:酸素ガス混合物でマウスを麻酔します。マウスを小動物のPETスキャナーベッドに置きます。つま先つまみ法を使用して麻酔を確認し、マウスの目に動物用軟膏を塗布して、麻酔中の乾燥を防ぎます。
1%イソフルラン:酸素混合ガスを使用して、スキャン中は麻酔を維持します。これに続いて、350〜700キロ電子ボルトのエネルギーウィンドウと6ナノ秒の一致タイミングウィンドウを使用して、最低4,000万の一致イベントで静的スキャンを介してマウスのPETデータを取得します。