0 閲覧数 • 4:06 分 • July 8th, 2025
ケージに入れられたマウスに、炎症性腸疾患である大腸炎を誘発することが知られている合成硫酸化多糖類を混合した飲料水を摂取させます。
この多糖類は腸管腔に浸透して上皮バリアを破壊し、共生微生物が組織に侵入
して炎症を引き起こします。単球は組織に浸潤し、マクロファージに分化します。
蛍光色素結合抗体をマウスの尾に静脈内注射します。
抗体は結腸に到達し、マクロファージの標的糖タンパク質に結合し、細胞を標識します。
マウスを麻酔します。腹部の毛皮を剃って、イメージング中の光の反射と吸収を最小限に抑えます。
マウスを検査カセットに入れ、蛍光媒介断層撮影またはFMTスキャナーに挿入します。
励起されると、蛍光色素は蛍光を発します。蛍光反射率画像をキャプチャして、蛍光色素の空間分布を示す3次元マップを再構築します。
蛍光強度の上昇は、マクロファージ浸潤の増加を示します。
大腸炎を誘発するには、実験マウスの飲料供給に100ミリリットルのオートクレーブ滅菌飲料水に溶解した2グラムのデキストラン硫酸ナトリウム(DSS)を満たし、マウス1匹あたり1日あたり5ミリリットルの水を推定します。スキャンの24時間前に、目的の抗体カクテルを光から保護された滅菌注射器にロードし、抗体を実験動物の尾静脈に静脈内注射します。
実験当日は、電気カミソリを使って実験動物の腹部の毛皮を剃り、光の反射と吸収を最小限に抑えます。定義された厚さと吸収特性の組織模倣ファントムを使用して、ファントムに特定の量の目的の抗体溶液を充填し、FMTデバイスで蛍光を測定します。
次に、動物用蛍光媒介断層撮影法、または小動物用のFMTデバイスで、[新しい研究]をクリックし、画像パラメータや線量を含む関連するトレーサーを研究の説明に含めます。実験研究デザインに従って研究グループを作成し、各グループに適切な数の動物を装備します。
システムがトレーサーコンストラクト用に校正されたら、最初の麻酔マウスを仰臥位に置き、摂氏42度の加熱可能な検査カセットに入れます。カセットをイメージングシステムに挿入し、対応する研究グループから適切なサンプルを選択します。投与されたトレーサーを選択して、トレーサー濃度の値が適切に計算されていることを確認し、スキャンに適した波長の蛍光反射率画像を取得します。
[画像取得]をクリックしてスキャンフィールドの輪郭を描き、スキャンフィールドが蛍光反射率画像にオーバーレイとして表示されることを確認します。スキャンフィールドが関心領域を囲むまで調整し、空気や毛皮が残っている領域を避けるように注意します。
画像ターゲットに応じて、スキャンフィールドの解像度を選択して、スキャンフィールド内の画像データポイントの数を設定します。次に、[スキャン] をクリックして、選択した波長で画像取得を開始します。スキャンの最後に、動物をカセットから取り出し、ケージに戻る前に動物がモニタリングで完全に回復できるようにします。FMTは、実験的に適切であれば、さまざまな時点で繰り返すことができます。
本研究では、合成硫酸多糖を用いてマウスに大腸炎を誘発し、蛍光分子断層撮影(FMT)を通じてマクロファージの浸潤を検討します。手法には、デキストラン硫酸ナトリウムの投与、および結腸内のマクロファージを可視化するための蛍光標識抗体の使用が含まれます。
蛍光分子断層撮影(FMT)により、マウスモデルにおけるマクロファージ主導の腸管炎症を非侵襲的かつ定量的に評価することが可能となり、炎症性腸疾患研究における初期段階のターゲット検証を支援します。このイメージングワークフローは、免疫細胞浸潤に関する空間的および強度的なデータを提供し、メカニズムの低リスク化および前臨床探索における予測精度を向上させます。FMTを探索パイプラインに統合することで、免疫学に特化したプログラムにおけるトランスレーショナルな連続性とポートフォリオの意思決定が強化されます。
FMTベースのイメージングは、炎症性疾患モデルにおける初期のメカニズム研究とトランスレーショナルなバイオマーカー検証を橋渡しし、創薬から前臨床段階に至る一連の流れへと統合されます。
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最終更新:22 8月 2026