電気刺激による神経幹細胞と前駆細胞の分化

まず

、電源に接続されたMOEマイクロ流体チップから始めます。

このチップには、入口ポートと出口ポートに接続されたポリ-L-リジンでコーティングされた培養領域と、電気接続用のマウントされたAg/AgCl電極が含まれています。

最適な成長条件を得るために、マイクロ流体チップをヒーターの上に置きます。

神経幹細胞および前駆細胞またはNPCを、出口を介してコーティングされた培養領域にフローインします。

細胞はポリ-L-リジンと静電的に相互作用し、マイクロ流体デバイスに付着します。

次に、接着した細胞の増殖を促進する成長因子を含む増殖培地を導入します。

Ag/AgCl電極を介して電流を長時間印加し、細胞生存率のための培地を連続的に供給します。

電流は NPC を興奮させて活性化し、細胞体からのニューロンプロセスの拡張を促進します。

さらに、電気刺激はさまざまな細胞内シグナル伝達経路を引き起こします。

これらの経路は、NPC がニューロン、星状細胞、オリゴデンドロサイトなどのさまざまな神経細胞に特異的に分化することを促進します。

まず

、適切なソフトウェアを使用して、個々のPMMA層と両面テープのパターンを描画します。炭酸ガスレーザースクライバーの電源を入れ、パソコンに接続します。ソフトウェアを使用してデザインパターンファイルを開きます。

PMMAシートまたは両面テープをレーザースクライバーのプラットフォームに置きます。次に、オートフォーカス ツールを使用して、PMMA シートまたは両面テープの表面にレーザーを焦点を合わせます。プリンターとしてレーザースクライバーを選択します。次に、レーザースクライバーを使用して、PMMAシートまたは両面テープの直接アブレーションを開始します。

PMMAシートから保護フィルムを剥がし、窒素ガスで表面を洗浄します。PMMAシートを複数層接着する場合は、1mmのPMMAシートを3枚積み重ね、サーマルボンダーで1平方センチメートルあたり5キログラムの圧力で110°Cで30分間接着し、フローまたは電気刺激チャネルアセンブリを形成します。12個のアダプターを、速効性シアノアクリレート接着剤を使用して、MOEチップアセンブリのレイヤー1の個々の開口部に接着します。

1mmのPMMA基板、両面テープ、3mmの光学グレードのPMMAを30分間紫外線照射して消毒してから、チップを組み立てます。1mmのPMMA基板を3mmの光学グレードPMMAに両面テープで接着し、PMMAアセンブリを完成させます。洗浄したカバーガラスを両面テープでPMMAアセンブリに貼り付けます。

寒天ブリッジアダプターの開口部を白い指締めプラグで密閉します。平底コネクタを、媒体のインレットおよびアウトレットアダプタを介してMOEチップアセンブリに接続します。次に、コーンルアーアダプターを