冷気プラズマ処理による神経幹細胞分化の促進

適切な

分化培地中の細胞外マトリックスコーティングされたカバーガラス上で培養した神経幹細胞から始めます。

紫外線や荷電粒子など、さまざまな反応成分を含む物質の状態である冷たいプラズマを含む注射器を取ります。

血漿シリンジのノズルを神経細胞培養物の上の特定の高さに配置します。

プラズマジェットを開始します。

血漿は神経幹細胞と相互作用し、神経幹細胞を活性化します。

古い培地を取り除きます。新鮮な培地を加えてインキュベートします。

時間が経つにつれて、活性化された神経幹細胞は突起を生成します。

媒体を廃棄します。

逆位相差光学顕微鏡下では、神経細胞に見られるものに似た細長い突起が細胞に存在することは、分化を示しています。

神経幹細胞を血漿処理するには、シリンジノズルと細胞の最初のウェルの間の距離を15ミリメートルに設定します。神経幹細胞培養物の上清を800マイクロリットルの新鮮な分化培地に置き換え、プレートをプラズマジェットの下に置きます。

シリンジノズルが各ウェルの中心に固定されていることを確認し、処理ごとに60秒間プラズマで3つのウェルを作成し、処理ごとに60秒間1%のヘリウムと酸素ガスで3つのウェルを作成し、3つのウェルをコントロールとして未処理のままにします。次に、上清を1ミリリットルの新鮮な分化培地と交換し、細胞をインキュベーターに6日間戻します。異なるグループの分化状態を、逆位相差光学顕微鏡で毎日チェックします。

処理後、上清を新鮮な分化培地に置き換える前に、細胞をコンディショニング培地中で約1時間完全に平衡化させます。