In vivoでのマウス前肢筋の複合筋活動電位の測定

麻酔をかけたマウスを仰臥位に固定します。

刺激電極を皮下に挿入し、前肢の筋肉を神経支配する神経に合わせます。

上腕の筋肉の上に記録電極を皮下に挿入し、参照電極をウォーキングパッドに、側面に接地電極

電気パルスを印加して前肢ニューロンを刺激し、正イオン流入と活動電位の生成を誘導します。

活動電位は神経筋接合部で興奮性神経伝達物質の放出を誘導し、筋線維の活性化と収縮を引き起こします。

すべての筋線維(複合筋活動電位(CMAP))からの複合反応を記録します。

すべての筋繊維を確実に刺激するために、最大限の刺激を加えます。

刺激を終了し、潜伏時間、刺激の開始から応答までの時間遅延を決定します。

潜時の増加は、ニューロンの脱髄による伝導速度の低下を示します。

CMAP振幅を測定します。振幅が減少すると、機能的なニューロンが失われていることを示します。

前肢のCMAPを測定するには、マウスを仰臥位で加熱パッドの上に置き、粘着テープを使用して体の側面に両前肢を伸ばします。次に、前肢の両側の下にある筋肉に穴を開けずに、刺激電極を5ミリメートル皮下に配置し、腕神経叢神経と整列させます。

次に、記録電極を上腕二頭筋の上に皮下に置きます。続いて、3mmの参照電極をウォーキングパッドに30度の角度で置き、接地電極をマウスの側面に皮下に挿入します。

このセットアップでは、電極は互いに近接しています。電極同士が接触しないようにすると、記録が歪むため。

0.1ミリ秒の刺激持続時間で1秒に1パルスを使用してすべての軸索を刺激します。データを取得するには、コントローラーユニットのリカレント刺激ボタンを押して刺激を開始し、強度コントローラーノブを回して刺激を増加させます。

最大刺激に到達するには、CMAP応答の振幅の増加が止まるまで強度コントローラーノブを回して、増加する刺激を加えます。そこからさらに、刺激を20%増やして、CMAP振幅が最大応答に達するようにします。繰り返し刺激ボタンをもう一度押して刺激を終了します。

マーカーツールを使用して、記録内の次のポイントを示します。応答の開始、最大正のピーク、および最大の負のピーク。刺激の開始は、ソフトウェアによって自動的に決定されます。

潜伏時間を、刺激の開始から応答の開始までの遅延として決定します。潜時を使用して、軸索の脱髄を評価します。最大負のピークから最大の正のピークまでの振幅を測定し、振幅の大きさを使用して機能軸索の数を相関させます。